潘晓义 作品数:5 被引量:50 H指数:5 供职机构: 浙江省淡水水产研究所 更多>> 发文基金: 浙江省科技厅重点资助项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
枯草芽孢杆菌B115株的毒性研究 被引量:11 2006年 本文初步报道了枯草芽孢杆菌(Baclllus subtllls)B115株对鲫鱼、淡水青虾的急性毒性及对小白鼠的30天喂养试验,枯草芽孢杆菌B115株对鲫鱼的96hLD_(50)>4000ppm,对淡水青虾的96hLD_(50)为1350ppm;以5×10^(10)、1×10^(10)和0.5×10^(10)分别口灌和拌饵投喂小白鼠30天,小白鼠的体表外观、运动能力及内脏器官与对照组无差异,血液学和血液生化指标与对照组无差异。结果表明枯草芽孢杆菌B115株对小白鼠无毒性。 尹文林 潘晓义 曹铮 沈智华 吴颖蕾 沈锦玉关键词:急性毒性 血液生化指标 淡水青虾 小白鼠 内脏器官 32种常用渔药对大黄鱼致病菌哈维氏弧菌的体外抗菌试验 被引量:13 2008年 采用试管二倍稀释法测定了32种常用渔药对本实验室分离鉴定的一株大黄鱼致病菌-哈维氏弧菌GYC1108-1的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。其中中草药7种,抗菌药8种,常用水体消毒剂17种。结果显示,7种中草药对受试菌GYC1108-1的MIC介于0.039~625 mg/L,MBC介于0.078~1 250 mg/L;8种抗菌药对该菌的MIC介于0.078~1.25mg/L,MBC介于0.156~2.5 mg/L;17种水体消毒剂对该菌的MIC介于0.062~3.125 mg/L,MBC介于0.078~6.25 mg/L。试验表明,这些渔药都对哈维氏弧菌有较好的抗菌效果。 郝贵杰 沈锦玉 潘晓义 尹文林关键词:渔药 哈维氏弧菌 最小抑菌浓度 最小杀菌浓度 体外 抗哈维氏弧菌脂多糖单克隆抗体的制备及其鉴定 被引量:10 2008年 以哈维氏弧菌GYC1108-1细菌颗粒性抗原免疫8周龄雌性BALB/c小鼠,5次免疫后取其脾细胞与SP2/0-Ag-14骨髓瘤细胞融合。用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)对杂交瘤进行筛选,阳性克隆经3次亚克隆后,获得一株针对GYC1108-1脂多糖(LPS)的特异性单克隆抗体,命名为2 F 9。该株单抗细胞培养上清ELISA效价为1∶1 600,腹水效价为6.4×104,交叉反应结果表明2 F 9除了与测试的多株哈维氏弧菌发生免疫识别外,还与溶藻弧菌、麦氏弧菌和副溶血弧菌代表株发生免疫交叉反应,但不与拟态弧菌、鳗弧菌、嗜水气单胞菌代表株等发生交叉反应。用温和高碘酸氧化法对LPS处理后,GYC1108-1的LPS与2 F 9的反应部分减弱,免疫印迹结果表明2 F9识别LPS的类脂A抗原。用抑制ELISA法半定量检测GYC1108-1培养上清的LPS,测得培养48 h LPS释放量不超过39μg/mL,大大低于使鱼类致死所需的LPS的剂量。 郝贵杰 沈锦玉 潘晓义 曹铮 尹文林关键词:哈维氏弧菌 脂多糖 间接ELISA 单克隆抗体 免疫印迹 抗哈维氏弧菌单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立及其特性鉴定 被引量:8 2007年 目的:研制抗哈维氏弧菌特异性单克隆抗体(mAb)并进行免疫学特性分析。方法:以哈维氏弧菌GYC1108-1颗粒性抗原免疫8周龄雌性BALB/c小鼠,5次免疫后取其脾细胞与Sp2/0-Ag-14骨髓瘤细胞融合。用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)对杂交瘤进行筛选,并鉴定mAb特异性及敏感性。结果:各株阳性克隆经3次亚克隆后,共获得5株抗GYC1108-1的mAb,其中1B7的细胞上清及腹水效价分别为1∶3 200和1∶32 000,交叉反应结果表明1B7除了与测试的多株哈维氏弧菌发生反应外,还与溶藻弧菌、麦氏弧菌和副溶血弧菌发生免疫交叉反应,但不与拟态弧菌、鳗弧菌、嗜水气单胞菌等发生交叉反应。ELISA检测1B7腹水对GYC1108-1的敏感性达107/L。结论:制备的抗哈维氏弧菌mAb可为哈维氏弧菌的检测及防治等提供有用的试剂。 郝贵杰 沈锦玉 曹铮 潘晓义关键词:哈维氏弧菌 间接ELISA 单克隆抗体 核酸疫苗的研究进展及其在鱼类免疫中的应用 被引量:8 2007年 核酸疫苗是20世纪90年代初发展起来的一种新型疫苗,它克服了传统疫苗所存在的一些缺陷,具有许多传统疫苗不可比拟的优点。有关核酸疫苗的研究已成为国内外科技界研究的热点之一,呈现出良好的应用前景。作者综述了核酸疫苗的研究背景、构建过程、作用机理以及疫苗本身具有的优缺点等,同时,概述了近年来国内外对鱼类DNA疫苗基础研究和应用研究的新进展,探讨了鱼用DNA疫苗当前需要解决的问题及发展前景。 郝贵杰 沈锦玉 潘晓义关键词:核酸疫苗 免疫机理 鱼类