由德林
- 作品数:45 被引量:49H指数:3
- 供职机构:上海交通大学生命科学技术学院微生物代谢国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划上海市浦江人才计划项目更多>>
- 相关领域:生物学化学工程理学农业科学更多>>
- 非水介质中多酚氧化酶催化羟基化反应的研究被引量:3
- 2001年
- 以对甲酚为底物 ,利用从马铃薯中提取的多酚氧化酶的粗酶液 ,用多孔玻璃包衣琼脂疏水吸附法将多酚氧化酶固定化 ,并利用此固定化酶 ,考察了在非水介质中羟基化反应的最适宜条件 .在此条件下催化合成 4-甲基邻苯二酚的产率为 5 5 .8%
- 由德林曹淑桂马林
- 关键词:非水介质多酚氧化酶催化合成羟基化反应
- 链霉菌线性质粒中抗砷基因簇
- 一种基因技术领域的链霉菌线性质粒中抗砷基因簇。本发明整个线性质粒上抗砷基因簇共6个基因及其DNA序列,具体为:砷抗性基因:sasB和sasC 2个基因,砷抗性调节基因:sasR和sasR22个基因,黄素单加氧酶基因:sa...
- 邓子新王连荣陈实由德林周秀芬肖湘黄曦
- 文献传递
- 杀念菌素/FR-008生物合成途径中转运基因fscTⅠ与fscTII的功能被引量:1
- 2012年
- 【目的】分析杀念菌素/FR-008生物合成途径中转运基因fscTⅠ和fscTⅡ的功能。【方法】构建转运基因fscTⅠ和fscTⅡ的敲除质粒pJTU4137,并通过接合转移和同源重组双交换的方法得到转运基因缺失突变株。转运基因fscTⅠ和fscTII也被克隆到高拷贝质粒pJTU1278上用于在链霉菌FR-008(Streptomyces sp.FR-008)的衍生菌株ZYJ-6中进行转运蛋白的过量表达。【结果】获得了转运蛋白缺失的双交换突变株LX10,发酵结果显示该突变株不再产生杀念菌素及其衍生物;过量表达转运蛋白的基因工程菌株LX11,其杀念菌素的产量约是对照菌株的1.5倍。【结论】体内遗传实验进一步证实FR-008生物合成途径中的fscTⅠ和fscTⅡ是ATP依赖的ABC转运基因,fscTⅠ与fscTⅡ的过量表达增加了杀念菌素的产量,为利用此方法提高其它多烯类抗生素的产量提供了例证。
- 雷璇孔令新张晨由德林邓子新
- 关键词:ABC转运蛋白基因敲除基因过量表达
- 透明颤菌血红蛋白vgbS核苷酸序列及其质粒和制备方法
- 一种生物工程技术领域的透明颤菌血红蛋白vgbS核苷酸序列及其质粒和制备方法,通过在作为宿主细胞的链霉菌的vgb核苷酸序列的两端分别引入NdeI和EcoRI的酶切位点获得。并另外通过将NdeI和EcoRI将pJTU4405...
- 邓子新朱冬青由德林白林泉姚芬
- 文献传递
- 黄脂菌素的生物合成基因簇
- 一种生物医学技术领域的黄脂菌素的生物合成基因簇,包括49个基因的核苷酸序列或由序列1形成的互补序列,其中:负责合成碳骨架及对其进行后修饰共二十九个基因;负责提供碳骨架延伸单位及后修饰过程中的甲基供体共八个基因;负责为宿主...
- 由德林张维克邓子新褚以文王辂赵子翰
- 文献传递
- 杀粉蝶菌素A1生物合成基因簇中甲基转移酶PieB2的功能被引量:2
- 2016年
- 【目的】研究杀粉蝶菌素A1产生菌中甲基转移酶基因pieB2的功能。【方法】利用接合转移和同源重组双交换的方法,构建pieB2基因缺失突变株,以及利用接合转移的方法,构建回补菌株。通过高保真PCR克隆pieB2基因到表达载体pET28a上,构建质粒pJTU5997,转化入大肠杆菌E.coliBL21(DE3)/pLysE中诱导表达。利用高效液相色谱检测PieB2的体外酶活。【结果】获得了pieB2基因缺失的双交换突变株。发酵结果显示,该突变株不再产生杀粉蝶菌素A1,而是积累了一种脱甲基产物。N-末端融合组氨酸标签的PieB2在大肠杆菌中获得可溶性表达,通过体外催化证明了PieB2甲基转移酶的功能。【结论】体内遗传实验和体外生化实验证明了PieB2作为甲基转移酶在杀粉蝶菌素A1合成中的作用。
- 赵震宇刘倩由德林
- 关键词:甲基转移酶基因敲除生物合成
- 提高链霉菌抗生素产量的方法及其质粒
- 一种生物医药技术领域的提高链霉菌抗生素产量的方法,通过构建metK基因和/或vgbS基因和/或adpA-c基因的对应整合表达质粒pFMetK、pFVgb、pFAdpA、pFMV、pFMA以及pFMVA,并将所述的整合表达...
- 由德林王涛朱冬青白林泉邓子新
- 文献传递
- 非水介质中辣根过氧化物酶(HRP)荧光活性测定法被引量:2
- 1994年
- 建立了一种分析HRP催化活力的新方法。该方法基于单体(底物)、聚合物(产物)的荧光发射光谱不重叠,使用荧光光谱仪,通过测量底物荧光淬灭来检测HRP在非水介质中(二氧六环-水、乙醇-水、丙酮-水体系)催化酚类、芳香胺类物质聚合的活力。此方法迅速、简便,结果是定量并可重复的,并能定量地计算底物转化率。
- 孙旭东马林刘伟黄仲立董爱武丁忠田唐玉秋孙天霄由德林程玉华
- 关键词:辣根过氧化物酶非水相活度
- 产生四环素单一组分的基因工程菌株的构建方法
- 本发明涉及一种生物医药技术领域的产生四环素单一组分的基因工程菌株的构建方法,包括如下步骤:对金霉素产生菌中参与金霉素合成氯化相关基因进行了基因中断,进而得到只产生四环素的基因工程菌株。本发明通过构建同源交换质粒,转入金霉...
- 由德林朱涛邓子新
- 文献传递
- 疏水吸附性载体上附加基团对天冬氨酸酶性质的影响被引量:1
- 1993年
- 6-氨基己酸和四乙烯基五胺通过高碘酸氧化法分别引入到邻甲苯胺基琼脂珠(TA)衍生物上,得到CTA和ATA,天冬氨酸酶在pH5.5,0.1mol/L磷酸缓冲液中,0.5mol/L KCl存在下通过疏水吸附固定化在TA,CTA和ATA上。结果表明三种固定化酶活力回收均达90%以上,同TA-天冬氨酸酶相比,CTA-酶,ATA-酶的最适pH,pH稳定性等均有所改变,其中ATA-酶的热稳定性,使用稳定性增强,CTA-酶的稳定性降低。
- 马林阎岗林高贵由德林程玉华
- 关键词:天冬氨酸酶固定化