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荔枝古树胚性愈伤组织LcCu/Zn-SOD3基因启动子的克隆及功能验证被引量：5: 2015年; 以荔枝古树"宋荔"胚性愈伤组织为材料,采用接头染色体步移法,分离获得LcCu/Zn-SOD3启动子片段长度为1 426bp,命名为ProLcCSD3(GenBank登录号:KF672186.1)。生物信息学分析表明,该启动子含有多个逆境应答元件、激素应答元件、胚乳特异表达元件,且可能受WRKY和MYB等转录因子调控。通过双酶切方法,以ProLcCSD3替换载体pCAMBIA1301上的CaMv35S启动子,构建了重组质粒p1301-proLcCSD3-GUS,并成功转化农杆菌EHA105和GV3101。注射烟草的瞬时表达分析表明,该启动子片段可以驱动下游报告基因表达。转化拟南芥分析表明,该启动子驱动的下游GUS可以在拟南芥的根、茎、叶中表达,且可响应NaCl、PEG-6000、ABA、MeJA和损伤等非生物胁迫。研究表明,荔枝古树LcCu/Zn-SOD3可能参与多种非生物胁迫应答和激素信号转导途径。; 练从龙卢秉国赖钟雄冯新林玉玲陈裕坤张梓浩; 关键词：胚性愈伤组织启动子

荔枝古树EC离体保存优化及其SOD克隆与启动子功能验证: 福州西禅寺的“宋荔”是最负盛名的荔枝古树之一,也是西禅寺重要的景观之一,具有很高的园林观赏价值；同时,由于其历经千年,是一座优良的荔枝“基因库”。因此,本研究以荔枝古树“宋荔”为材料,在前人的基础上,进行荔枝古树胚性愈伤...; 练从龙; 关键词：胚性愈伤组织离体保存启动子; 文献传递

不同处理对兰州百合子球根系生长的影响被引量：2: 2013年; 为研究不同处理对兰州百合子球根系生长的影响,以兰州百合子球为试验材料,对不同处理下子球根数和根长进行了测定分析。结果表明:腐殖土/沙子(1∶1)是适宜百合子球基生根系发生的基质;栽培深度为子球高度2倍时能获得较多的基生根,栽培深度与地平齐时可获得较长的根系;NAA溶液处理能促进子球生根,合适的NAA溶液浓度在1∶1 000到1∶500之间;轻划子球鳞茎盘能够提高基生根系的发生,其处理结果极显著高于对照处理;兰州百合子球根数与根长在生长过程中都表现出快-慢-快-慢的规律。; 郝瑞杰练从龙; 关键词：兰州百合子球根系根数

荔枝古树胚性愈伤组织Fe-SOD成员基因克隆及生物信息学分析被引量：3: 2014年; 为了解Fe-SOD在荔枝古树胚性愈伤组织保存中的分子机制,选择荔枝古树"宋荔"花药诱导而来的胚性愈伤组织为试验材料,采用同源克隆和RACE方法,获得荔枝Fe-SOD的两个转录本和基因组序列,并对该基因组的内含子进行分析。克隆获得长1 285 bp含有完整开放阅读框的荔枝Fe-SOD核酸序列,其编码1个含有250个氨基酸的蛋白质,将该序列命名为LcFe-SOD7a。生物信息学分析结果表明:该蛋白为稳定的、亲水的、含跨膜结构域的偏酸性蛋白质,定位于微体(过氧化物酶体)和细胞质,具有多样的磷酸化位点。LcFe-SOD7a基因组序列长2 284 bp,含7个内含子,其中第4个内含子较长,达920 bp。同时还得到其中的1条内含子驻留型可变剪接基因,该可变剪接基因提前终止,仅编码207个氨基酸的蛋白质,将该可变剪接基因命名为LcFe-SOD7b。; 练从龙赖钟雄卢秉国林玉玲冯新; 关键词：胚性愈伤组织可变剪接生物信息学分析

龙眼MEE70/MSI1基因DlMEE70-1a及其可变剪接体DlMEE70-1b的分离及其在体胚发生过程中的表达分析被引量：1: 2015年; MEE70/MSI1是拟南芥母性效应胚胎滞育基因,在植物胚胎发生过程中具有重要作用。采用RACE技术获得龙眼MEE70-1a(登录号KC492117)及其可变剪接体MEE70-1b(登录号KC492118)c DNA序列,克隆MSI1g DNA(登录号KC492126)序列。生物信息学分析预测Dl MEE70-1a和Dl MEE70-1b均为亲水不稳定的酸性蛋白,主要定位于过氧化物酶体和细胞核,各含有4和1个WD-repeat结构域。MEE70-1a和MEE70-1b在体细胞胚胎发生过程实时荧光定量PCR分析结果表明,Dl MEE70-1a和Dl MEE70-1b表达趋势以心形胚为界,除了Dl MEE70-1b的不完全胚型紧实结构(ICp EC)到球形胚(GE)阶段之间,都表现出先降后升的趋势;胚性愈伤组织(EC)时期两者表达量一致且最高;心形胚(HE)时期,两者表达量一致且最低,另Dl MEE70-1b在不完全胚性紧实结构(ICp EC)表达量与心形胚基本一致。这2个表达剂量是胚胎发生的重要保障,心形胚(HE)后,Dl MEE70-1a被再次激活转录促进胚胎正常发育。从Dl MEE70-1a和Dl MEE70-1b的理化性质、WD重复结构域数量、亚细胞定位以及表达量和趋势,可以推测Dl MEE70-1a需要Dl MEE70-1b的协同来调控龙眼胚胎发育。; 卢秉国练从龙赖钟雄; 关键词：龙眼体胚发生可变剪接

文心兰OnCOBRA基因克隆及表达模式分析被引量：2: 2014年; 以文心兰试管苗为材料,采用RT-PCR结合RACE法,克隆文心兰OnCOBRA基因的cDNA全长和DNA序列。结果表明:COBRA全长为1 601 bp,开放阅读框(ORF)为1 386 bp,共编码461个氨基酸;OnCOBRA的DNA序列共2 949 bp,且含有6个外显子和5个内含子。生物信息学结果表明,OnCOBRA属于不稳定的疏水蛋白,具有信号肽、跨膜结构和CCVS保守区域,亚细胞定位于细胞膜中;与无油樟、玉米、籼稻、拟南芥等具有较高的同源性。系统进化树分析结果表明,文心兰OnCOBRA蛋白与玉米(ZmCOBRA)、无油樟(AtCOBRA)、籼稻(OsCOBRA)处于统一分枝,推测OnCOBRA基因是COBRA基因家族的成员。qPCR结果表明,OnCORBA为组成型表达,在成苗期表达量最高,在文心兰类原球茎时期表达量最低。; 李玲赖钟雄陈裕坤练从龙林鹤延; 关键词：文心兰 COBRA 克隆生物信息学

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练从龙