- miR-519d-3p靶向KPNA2对胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制被引量：1
- 2020年
- 目的探讨微小RNA(miR)-519d-3p对核转运蛋白α-2(KPNA2)的靶向作用及其对胶质瘤细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其可能作用机制。方法体外培养胶质瘤细胞株U251、U87、T98G与正常胶质细胞株SVGp12,采用qRT-PCR与Western印迹法检测细胞中miR-519d-3p与KPNA2的mRNA及蛋白表达。脂质体将miR-519d-3p mimics、si-KPNA2及其各自阴性对照转染入胶质瘤U251细胞;共转染分组:miR-519d-3p+pcDNA组(miR-519d-3p mimics与pcDNA共转染胶质瘤U251细胞),miR-519d-3p+pcDNA-KPNA2组(miR-519d-3p mimics与pcDNA-KPNA2共转染胶质瘤U251细胞)。MTT实验与Transwell小室检测各组胶质瘤细胞增殖、迁移及侵袭。运用生物信息学方法预测miR-519d-3p与KPNA2的靶向配对关系,采用双荧光素酶报告实验验证miR-519d-3p与KPNA2的作用关系。Western印迹检测CyclinD1、p21、p27、MMP-2、MMP-9、MMP-14蛋白表达。结果与正常胶质细胞株SVGp12比较,胶质瘤细胞株U251、U87、T98G中miR-519d-3p的表达水平均显著降低(P<0.05),而KPNA2 mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);miR-519d-3p过表达后胶质瘤细胞增殖、迁移及侵袭能力均明显减弱,促进p21、p27表达,而抑制CyclinD1、MMP-2、MMP-9、MMP-14表达;抑制KPNA2表达后胶质瘤细胞增殖、迁移及侵袭能力均明显减弱,促进p21表达,而抑制CyclinD1、MMP-2、MMP-9表达;miR-519d-3p过表达同时上调KPNA2表达后部分逆转miR-519d-3p过表达对胶质瘤细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用。结论miR-519d-3p可通过负向调控KPNA2表达而抑制胶质瘤细胞增殖、迁移及侵袭。
- 胡德献孙衍昶冯基高莫业和
- 关键词：胶质瘤增殖迁移
- 急性脑出血患者血清MPO、S100A12、Omentin-1表达与神经功能损伤及预后的相关性被引量：6
- 2022年
- 目的 探讨急性脑出血患者血清髓过氧化物酶(MPO)、S100钙结合蛋白A12(S100A12)、网膜素-1(Omentin-1)表达,分析其与患者神经功能损伤及预后的关系。方法 选取2017年1月至2020年1月海南省第二人民医院神经外科收治的急性脑出血患者110例(观察组),应用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评估患者入院时神经功能损伤情况,将患者分为轻度组(<8分,25例)、中度组(8~<15分,47例)及重度组(≥15分,38例)。另选取海南省第二人民医院体检健康者80例作为对照组。采用酶联免疫吸附试验检测血清MPO、S100A12、Omentin-1水平。3个月后采用格拉斯哥预后量表(GOS)评估患者预后情况,将其分为预后不良组和预后良好组。采用多因素Logistic回归分析急性脑出血患者预后不良的影响因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清MPO、S100A12、Omentin-1对急性脑出血患者预后不良的预测价值。结果 观察组血清MPO、S100A12水平高于对照组,血清Omentin-1水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。不同严重程度急性脑出血患者血清MPO、S100A12、Omentin-1水平相比,差异有统计学意义(P<0.05)。预后不良组血清MPO、S100A12水平高于预后良好组,血清Omentin-1水平低于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果示,NIHSS评分,以及血清MPO、S100A12、Omentin-1水平是急性脑出血患者预后不良的独立影响因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清MPO、S100A12、Omentin-1联合检测预测急性脑出血患者预后不良的曲线下面积为0.901,灵敏度和特异度分别为0.736、0.897。结论 急性脑出血患者血清MPO、S100A12水平升高,血清Omentin-1水平降低,以上指标与患者神经功能损伤及预后不良有关。
- 崔海随胡德献杨昌立王刚
- 关键词：网膜素-1急性脑出血预后
- TSG101在人脑恶性胶质瘤中的表达与细胞增殖侵袭的关系
- 2017年
- 目的探讨人肿瘤易感基因101(TSG101)在人脑恶性胶质瘤组织中的表达及其与胶质瘤细胞增殖侵袭的关系。方法收集2015年7月至2016年10月我院神经外科收治的34例恶性胶质瘤患者的临床资料和肿瘤组织标本肿瘤组及同期因脑外伤入院的19例患者的正常脑组织作为对照组。使用Real-time PCR技术检测临床样本中TSG101的表达水平,Spearman等级相关分析检测TSG101的表达与患者各临床病理指标间的相关性。Western Bolt检测不同人脑恶性胶质瘤细胞系TSG101的表达水平,选取表达最高的细胞在体外构建干扰TSG101表达的细胞系siTSG101组,Western Bolt及Real-time PCR进行验证,MTT法检测细胞增殖能力,transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力。结果 Western Bolt结果示U251细胞中TSG101相对其他细胞高表达,体外成功干扰U251细胞TSG101的表达后其增殖能力在48h、72h出现升高(P<0.05)。Real-time PCR结果示恶性胶质瘤组织中TSG101的表达低于正常脑组织,差异具有统计学意义(P<0.05);Spearman等级相关分析结果示TSG101表达水平与患者性别、年龄及体重无显著相关,与患者胶质瘤细胞分级存在负相关。transwell侵袭实验结果示干扰TSG101表达的细胞侵袭能力显著增强(P<0.05)。结论 TSG101在恶性胶质瘤组织中低表达,其表达与胶质瘤恶性程度呈负相关,并在胶质瘤的增殖侵袭过程中发挥抑制作用。
- 冯基高莫业和张彩彩徐鹏翔胡德献欧阳一彬刘达远
- 关键词：TSG101恶性胶质瘤增殖能力
- 非高血压性自发性脑出血临床诊疗体会
- 胡德献
- 颅内-外动脉吻合术治疗复杂颈内动脉瘤的疗效分析被引量：6
- 2008年
- 目的探讨颅内-外动脉吻合术在治疗复杂颈内动脉瘤中手术方式的选择及其疗效。方法回顾性分析2003年—2008年首都医科大学宣武医院颅内-外吻合术16例患者的临床资料,分别采用高流量吻合术3例,中流量吻合术6例,低流量吻合术7例。观察术后并发症及以DSA随访患者的情况;分析手术方式的选择及手术效果的情况。结果16例患者中,施行高流量吻合术3例,1例术后出现偏瘫和大隐静脉内血栓形成,立即行取栓术,1个月后偏瘫完全恢复;1例术后过度灌注,去骨瓣减压后症状缓解。中流量吻合术6例,2例术后出现不同程度的脑梗死、失语、偏瘫,经扩容及康复理疗后好转。低流量吻合术7例,4例术后出现不同程度的偏瘫,也经扩容及康复理疗后好转。所有患者术后1~2周复查DSA,均显示载瘤动脉闭塞完全。所吻合的血管除一例单支闭塞外,其余血流均畅通,吻合口远端血管充盈良好,动脉瘤不再充盈显影。16例患者术后平均随访3.5年,随访期间均未见动脉瘤复发和破裂出血。结论颅内-外动脉吻合术是治疗复杂颈内外动脉瘤的一种有效手段。选择适合的手术术式是手术成功的关键;及时对术后并发症进行处理,就可以避免出现新发生的神经系统损伤症状。
- 胡德献李萌何川
- 关键词：动脉瘤颈内动脉
- 外引流治疗高血压脑出血破入脑室临床体会
- 2005年
- 胡德献周国泽
- 关键词：高血压脑出血破入脑室外引流蛛网膜下腔穿刺临床急症用脑
- 重型颅脑损伤术后并发症防治体会
- 2004年
- 胡德献周国泽
- 关键词：重型颅脑损伤术后并发症肺部疾病消化道出血
- 下调LSINCT5对人脑胶质瘤细胞系U251增殖、迁移和放疗敏感性的影响
- 2017年
- 目的观察下调LSINCT5对人脑胶质瘤细胞系U251增殖、迁移能力和放疗敏感性的影响。方法采用慢病毒转染法构建稳定干扰LSINCT5的细胞株(U251 sh LSINCT5细胞),得到干扰效率高的sh LSINCT5 1#组、sh LSINCT5 3#组和转染GV248的对照组细胞进行后续实验。采用噻唑蓝比色法(MTS)观察细胞培养0、24、48、72h时增殖能力变化,划痕修复实验观察细胞迁移能力的变化,Western blotting法检测细胞中细胞黏附分子(E-cadherin)、紧密连接蛋白-1(Zo-1)、细胞骨架蛋白(Vimentin)表达,MTS法观察X射线仪下分别照射0、2、4、8 Gy后细胞增殖能力。结果 sh LSINCT5 1#组、sh LSINCT5 3#组培养48、72 h时细胞增殖能力均较对照组低(P均<0.05)。sh LSINCT5 1#组、sh LSINCT5 3#组细胞的修复距离均较对照组短,P均<0.05。与对照组相比,sh LSINCT51#组、sh LSINCT5 3#组E-cadherin、Zo-1表达高,Vimentin表达低(P均<0.05)。sh LSINCT5 1#组、sh LSINCT5 3#组在2、4 Gy剂量照射时细胞增殖能力均较对照组低(P均<0.05)。结论下调人胶质瘤细胞系U251中LSINCT5的表达,能抑制细胞增殖、转移,并增强细胞放疗敏感性。
- 冯基高莫业和徐鹏翔胡德献欧阳一彬刘达远张彩彩
- 关键词：胶质瘤细胞迁移上皮间充质转化放疗敏感性
- 脑膜瘤组织中MGMT甲基化状态及其对脑膜瘤细胞生长与转移的影响被引量：2
- 2022年
- 目的探讨O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)在脑膜瘤组织中的甲基化状态及其对人脑膜瘤细胞系IOMM-Lee细胞生长和转移的作用。方法收集本院34例脑膜瘤患者的标本,甲基化特异的PCR(MSP)法检测脑膜瘤组织和正常脑组织中MGMT甲基化水平,免疫组织化学染色检测脑膜瘤组织和正常脑组织中MGMT表达。将培养的人胶质瘤细胞系IOMM-Lee细胞分为空白对照组(正常培养的IOMM-Lee细胞)、阴性对照组(空载体病毒转染IOMM-Lee细胞)和RNAi慢病毒转染组(转染RNAi慢病毒载体下调MGMT表达的IOMM-Lee细胞),通过RNAi技术沉默IOMM-Lee细胞中MGMT的表达,实时荧光定量PCR和Western blot检测细胞中MGMT mRNA与蛋白表达水平,CCK-8实验检测细胞增殖活性,细胞克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,Transwell实验和细胞划痕实验分别检测各组细胞侵袭与迁移能力。结果脑膜瘤组织中MGMT甲基化达到88.23%(30/34),正常脑组织中未检测到MGMT甲基化;脑膜瘤组织中MGMT染色强度较正常脑组织明显增加。与空白对照组和阴性对照组比较,RNAi慢病毒转染组IOMM-Lee细胞中MGMT mRNA和蛋白相对表达量均显著下降(均P<0.05),转染24、48和72 h后IOMM-Lee细胞增殖活性显著下降(均P<0.05),细胞克隆形成数目、细胞侵袭数目显著下降(均P<0.05),同时,细胞划痕愈合率显著降低(P<0.05)。结论MGMT在人脑膜瘤组织中多呈高甲基化,沉默脑膜瘤细胞中MGMT表达可抑制脑膜瘤细胞生长与转移。
- 胡德献孙衍昶冯基高莫业和
- 关键词：脑膜瘤甲基化细胞迁移
- SNAI2在人脑恶性胶质瘤中的表达情况及其与细胞增殖转移的关系被引量：1
- 2017年
- 目的观察锌指转录因子2(zinc-finger transcription factor-2,SNAI2)在人脑胶质瘤中的表达及其对胶质瘤细胞增殖转移能力的影响。方法收集37例恶性胶质瘤患者的临床资料及肿瘤组织标本。采用反转录-聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)技术检测组织中SNAI2的表达水平,分析其表达与患者临床病理资料间的关系。在体外实验中,构建稳定干扰SNAI2(small interfering RNA SNAI2,shSNAI2)的胶质瘤细胞株,通过噻唑蓝比色法检测细胞增殖能力,划痕实验检测细胞侵袭转移能力,Western blot检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)及紧密连接蛋白(Zo-1)的表达,检测细胞上皮间充质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)的水平。结果高级别脑胶质瘤中SNAI2的表达显著高于低级别脑胶质瘤、良性脑膜瘤及正常脑组织,且低级别脑胶质瘤SNAI2的表达显著高于良性脑膜瘤及正常脑组织,差异均有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关分析结果显示SNAI2的表达与患者性别、年龄及体质量不相关,与患者肿瘤大小及胶质瘤细胞分级呈正相关(P<0.05)。MTS实验结果示各组细胞随时间增加增殖能力增强,且shSNAI2细胞系相比对照细胞系增殖能力显著减弱(P<0.05)。划痕修复实验结果示相比对照细胞系转移能力明显减弱(P<0.05)。Western blot结果显示shSNAI2细胞系E-cadherin及Zo-1表达增高,Vimentin表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 SNAI2在人脑胶质瘤中高表达,且与患者肿瘤的大小和分级密切相关,其能够促进胶质瘤细胞的增殖、转移及EMT过程的发生,是潜在的促癌基因。
- 冯基高莫业和徐鹏翔胡德献欧阳一彬张彩彩
- 关键词：神经胶质瘤细胞增殖
