胡志贤
- 作品数：11 被引量：18H指数：3
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- 分泌抗IBDV单抗的杂交瘤细胞在新型5L细胞反应器中连续培养的研究
- 1998年
- 能稳定分泌抗ＩＢＤＶ单抗的杂交瘤细胞，直接从方瓶中接种进入已改装的新型５Ｌ细胞反应器，接种浓度不少于３×１０＾８个细胞／Ｌ，细胞在ｐＨ７，１０，ＤＯ５５，５０－７０ｒ／ｍｉｎ，３７℃的培养条件下生长良好；在保持反应器内的葡萄糖浓度不低于１．０ｇ／Ｌ的情况下，平均每天可生产单抗３Ｌ左右，产物的平均ＯＤ值为０．３６８，持续周期达３０ｄ左右。
- 陆苹王欣胡志贤孙涛孙建和
- 关键词：杂交瘤细胞
- 引起猪腹泻的冠状病毒的分离与纯化
- 1994年
- 取患病典型的死猪小肠或肠系膜淋巴结．经匀浆、差速离心、蔗糖密度梯度离心而获得纯化的ＴＧＥＶ条带．通过电镜观察．病毒是圆形或椭圆形，并呈现冠状结构，经透析、浓缩和Ｆｏｌｉｎ酚试剂测定，病毒蛋白含量为２５０μｇ／ｍｌ．
- 陆苹胡志贤周培吴祖立黄保青
- 关键词：猪病腹泻日冕形病毒提纯
- 抗鸡传染性法氏囊病毒单克隆抗体的提纯和鉴定
- 1994年
- 取抗鸡传染性法氏囊病毒单克隆抗体．经饱和硫酸铵盐析，透析除盐、葡聚糖凝胶过滤粗提后，经ＤＥＡＥ—２２纤维素离子交换层析，获得纯化的单抗，ＥＬＩＳＡ效价达１０（－６）以上．双向琼扩效价达１：６４以上；抗体回收率达６０％以上；最高浓度达１．２ｍｇ／ｍｌ．经抗鼠全血清双向琼扩结果证明所提取物为纯一的ＩｇＧ．
- 陆苹倪学英胡志贤王欣黄薇
- 关键词：鸡病IBD抗体提纯
- 杂交瘤细胞在细胞反应器中连续培养的研究被引量：2
- 1995年
- 稳定分泌抗ＩＢＤＶ单克隆抗体的杂交瘤细胞（Ｉ—４—３），培养于５ＬＣｅｌｌｉｇｅｎ中，接种浓度不少于２ｘ１０９／Ｌ，杂交瘤细胞在Ｃｅｌｌｉｇｅｎ中生长，随着细胞数浓度的变化，其生物学和动力学参数发生相应的变化，杂交瘤细胞在ＰＨ７．１８、ＤＯ５０、５０～７０ｒ／ｍｉｎ及葡萄糖浓度为２．５ｇ／Ｌ下生长良好。每天可收集３Ｌ的单抗，结合抗体定量试验，测得具有生物学特性的抗体含量为３００ｍｇ／Ｌ以上。研究结果表明５ＬＣｅｌｌｉｇｅｎ可用于杂交瘤细胞在体外大规模生产单克隆抗体。
- 陆苹胡志贤倪学英王欣
- 关键词：杂交瘤细胞单克隆抗体细胞培养IBD鸡病
- 猪细小病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及初步应用被引量：3
- 1992年
- 用经超滤浓缩、PEG 沉淀,氯化铯密度梯度离心纯化的猪细小病毒(PPV)免疫 BALB/C 小白鼠,取免疫鼠脾细胞与骨髓瘤细胞 SP_2/O在PEG 存在下融合,经 HAT 筛选、ELlSA 测定及3次克隆化后,获得3株(P-15—36—6,P-15—45—51,P—15—52—28)能持续稳定分泌抗 PPV 单克隆抗体的杂交瘤细胞株,3株杂交瘤细胞的染色体数均在95条以上,经分类测定,其免疫球蛋白均属 Ig G,且均为 IgG_1亚类。阻断试验证明单抗具有抗 PPV 的特异性。利用间接 ELISA 抑制试验进行了单抗在诊断上应用研究。
- 陆苹胡志贤王国丰周培黄保青
- 关键词：细小病毒单克隆抗体酶联免疫吸附试验杂交瘤细胞
- 抗鸡传染性法氏囊病毒单克隆抗体冻干制剂的制备、效检与应用被引量：4
- 1994年
- 取液体状抗鸡传染性法氏囊病毒单克隆抗体经过滤、浓缩、脱盐和冷冻干燥技术处理后．获得抗ＩＢＤＶ单抗的粉制剂．该制剂在ｐＨ５．０～９．０之间１ｈ．效价稳定；在４℃下保存一年以上；３７℃下保存１个月以上，效价稳定．其双向琼脂扩散效价１∶６４以上；ＥＬＴＳＡ效价达１０－６以上．在临床诊断传染性法氏囊病上有高度的特异性和准确性．
- 陆苹倪学英胡志贤
- 关键词：冷冻干燥鸡病IBD
- 抗鸡传染性支气管炎病毒单克隆抗体的临床应用研究
- 1995年
- 采用纯化的抗鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）多抗作为第一抗体，抗ＩＢＶ单克隆抗体作为第二抗体，应用ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法诊断鸡ＩＢＶ病。以多抗包被浓度为１：８０稀释，单抗１：４稀释，显色反应时间３０ｍｉｎ为最佳工作条件。该方法快速、简便、准确、特异性强。ＩＢＶ发病鸡服用１：１０稀释的单抗１ｍｌ／羽一次后有良好治疗效果。健康鸡服用单抗后无任何变态反应。初步建立了抗ＩＢＶ单克隆抗体制剂及安全的治疗方法与诊断系统。
- 陆苹倪学英胡志贤王国丰王欣
- 关键词：支气管炎病毒单克隆抗体鸡病
- 用改良型5L细胞反应器连续培养杂交瘤细胞被引量：2
- 1999年
- 能稳定分泌抗鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）单抗的杂交瘤细胞，直接由方瓶接种入已改装过的新型５Ｌ细胞反应器，接种细胞浓度不少于３２×１０８个／Ｌ，其中８０％以上的细胞滞留在聚脂载体内，杂交瘤细胞在ｐＨ７１０、溶解氧５５％、５５～６０ｒ／ｍｉｎ、３７℃的条件下生长良好；在保持反应器内的葡萄糖浓度不低于１０ｇ／Ｌ的情况下，平均每天可生产单抗３升左右，抗体浓度可达８４μｇ／ｍｌ，培养３８ｄ，共收获抗体５１２ｍｇ。
- 陆苹王欣胡志贤王国丰孙涛
- 关键词：杂交瘤细胞
- 抗猪传染性胃肠炎病毒单克隆抗体的研制及应用被引量：3
- 1993年
- 将纯化的猜传染性胃肠炎病毒免疫 BALB/C 小白鼠后,取免疫脾细胞与骨髓瘤细胞在 PEG 存在下进行融合,HAT-1640培养液筛选,并用 ELISA 间接法检测阳性克隆。通过有限稀释法进行三次克隆化后,获得了二株稳定分泌抗 TGEV 的单克隆抗体杂交瘤细胞株。杂交瘤细胞染色体皆在95条以上;其分泌抗体均属 IgG_1亚类。通过阻断试验证明其作用的特异性。对该单抗在诊断上的初步应用作了探讨。
- 陆苹胡志贤倪学英周培王国丰
- 关键词：传染性胃肠炎单克隆抗体猪病
- 抗鸡传染性法氏囊病毒单克隆抗体的定量检测被引量：2
- 1993年
- 以免抗鼠 IgG 作为抗血清,首先验证了应用单向琼脂扩散法与酶联兔疫测法(ELISA)测定中试样品中抗鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)单抗浓度的相应关系;以 DEAE 纤维离子交换层析法纯化的鼠 IgG(3.8mg/ml)作标准样品,以单向琼扩法确定中试样品 F.中具有生物活性单抗含量为330uG/ml,并以 F.作为 ELISA 标准样品,作标准曲线,检测不同样品中抗 IBDV 单抗含量皆在50ug/ml(此为1:10稀稀应用的浓度标准值)以上,ELISA 效价皆在10^(-4)以上。证明了我们的中试产品 OD 值在0.050以上,都可以1:10稀释,可靠地投放市场广泛应用。
- 陆苹倪学英胡志贤何云海王国丰
- 关键词：单克隆抗体IBD鸡病
