谢平丽
- 作品数：24 被引量：17H指数：3
- 供职机构：中南大学湘雅医学院基础医学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 全人源抗鼻咽癌噬菌体单链抗体的筛选与鉴定
- 2009年
- 目的从全人源抗鼻咽癌噬菌体抗体库中筛选特异性单链抗体（ScFv），并对其特异性进行鉴定。方法通过噬菌体表面展示技术把ScFv表达在噬菌体表面，以鼻咽癌细胞作为抗原，用抗原递减法，通过“吸附-洗脱-扩增”过程筛选并富集特异性抗体，及ELISA筛选，获得特异阳性克隆进行免疫组化鉴定并测序。结果通过对抗体库进行三轮正负淘洗和富集后，随机挑选4212个克隆进行ELISA，发现3个克隆对CNE2呈强阳性反应，而与人正常细胞系HUVEC等呈弱阳性反应或不反应。对克隆HNSA033进一步进行免疫细胞化学验证，结果与ELISA反应一致；免疫组织化学鉴定表明克隆HNSA033与鼻咽癌组织和鼻咽组织阳性率的差别有统计学意义。结论通过淘选富集、ELISA和免疫化学鉴定获得特异性较强的噬菌体克隆，为鼻咽癌发病机制的研究和临床诊断以及治疗奠定了基础。
- 李艳东谢平丽王甲甲李跃辉胡锦跃李官成
- 关键词：抗体
- 转染异种CXCR4基因下调黑色素瘤的致瘤性被引量：3
- 2007年
- 【目的】利用基因转染技术将人源趋化因子受体CXCR4基因转染小鼠黑色素瘤细胞B16,研究异源CXCR4基因转染对肿瘤致瘤性的影响。【方法】脂质体转染法将人CXCR4基因导入小鼠黑色素瘤B16细胞中,RT-PCR、流式细胞术(FACS)分析人CXCR4在B16细胞中的表达,体内成瘤实验验证B16细胞的致瘤性。【结果】人CXCR4基因转染B16细胞,G418筛选获得阳性细胞克隆,RT-PCR检测到人CXCR4 mRNA的表达,流式细胞分析检测到人CXCR4蛋白的表达,体内成瘤实验证实异源CXCR4转染降低了B16的生长速度。【结论】异源CXCR4基因转染下调黑色素瘤的致瘤性,其机制可能与异源CXCR4诱导的免疫交叉反应有关。
- 汪砥刘蓓李跃辉周国华谢平丽李官成胡锦跃
- 关键词：黑色素瘤
- 人源抗肝癌哺乳动物细胞表面展示全长抗体库的构建及初步应用
- 研究背景:工程抗体作为肿瘤防治的新型手段,为肝癌等恶性肿瘤的治疗带来了希望,为了克服目前鼠源性单克隆抗体和人源化单克隆抗体的局限性,全人源全长抗体是治疗性工程抗体的发展方向。目的:构建全人源抗肝癌哺乳动物细胞表面展示全长...
- 李峰刘艳红李艳雯李跃辉谢平丽周国华鞠强陈琳李官成
- 关键词：抗体库肝癌EGFL7抗体工程
- 文献传递
- 全人源抗结肠癌噬菌体单链抗体库的构建及筛选鉴定被引量：2
- 2010年
- 采用体外致敏法和EBV转化技术联合噬菌体展示技术构建噬菌体呈现型单链抗体库.从中筛选获得阳性克隆,并进行ELISA、免疫组化及测序鉴定.结果得到了库容为4.0×109的初级噬菌体抗体库,全长ScFv(Single-chain Fv)基因的插入率为90%.筛选获得两个克隆对HT-29呈强阳性反应,而与HFF等人正常细胞系呈弱阳性或阴性反应.免疫组织化学鉴定表明克隆F12与结肠癌组织和结肠癌旁组织阳性率的差别有统计学意义.由上述结果可见构建库容量达4.0×109的全人源抗结肠癌噬菌体单链抗体库是完全可行的,经筛选及鉴定获得了特异性较强的噬菌体克隆,为结肠癌的临床导向诊断和治疗奠定了基础.
- 谢平丽李官成李艳东周国华李跃辉郭锋杰王甲甲
- 关键词：EB病毒转化噬菌体抗体库结肠癌单链抗体
- GOLPH2的原核表达及单克隆抗体的制备
- 背景:研究发现II型高尔基体膜蛋白(GOLPH2)与肝癌的发生发展关系密切,不管是由病毒感染引起还是由非病毒原因引起的肝病患者中,GOLPH2水平均可能上调。同样发现在急性肝炎和进行性肝硬化患者中,GOLPH2也体现出高...
- 鞠强李峰李跃辉赵艳洁刘艳红陈琳周国华谢平丽李官成
- 关键词：杂交瘤单克隆抗体
- GP73融合蛋白原核表达及纯化
- 2014年
- 目的原核表达并纯化高尔基体糖蛋白-73(GolgiProtein73,GP73)。方法以人肝癌细胞系HepG2总RNA为模板,经RT-PCR扩增GP73基因,克隆至原核表达载体pET-21a(+)-TRX中,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。His-tag磁珠纯化重组蛋白GP73,SDS-PAGE鉴定。结果克隆目的基因的序列正确,未发生碱基突变;重组表达质粒pET21a(+)-TRX-GP73经双酶切鉴定构建正确;表达的重组蛋白相对分子量为80 kD,与预期相符。结论本实验成功在大肠杆菌BL21(DE3)中表达并纯化了GP73重组蛋白,为后续研究奠定了基础。
- 谢平丽赵艳洁李跃辉王宇环罗晓玲李官成
- 关键词：GP73原核表达
- 全人源抗结肠癌噬菌体单链抗体库的构建
- 2009年
- 【目的】构建全人源抗结肠癌噬菌体单链抗体库。【方法】采用体外致敏、EBV转化技术，PCR技术，噬菌体展示技术。【结果】构建了库容量达4×10^9的全人源抗结肠癌噬菌体ScFv库，ScFv基因的插入率为90％。【结论】体外致敏联合EBV转化及噬菌体展示技术制备抗结肠癌单链抗体库，这一策略是完全可行的，为进一步筛选抗结肠癌特异性单链抗体奠定了基础。
- 谢平丽王红红李官成周国华李跃辉郭锋杰
- 关键词：结肠肿瘤噬菌体抗体
- MicroRNA-33a靶向Twist1调节宫颈癌细胞的侵袭被引量：6
- 2015年
- 目的:研究转录因子Twist1在宫颈癌组织中的表达及其在宫颈癌细胞进展过程中的作用。方法:免疫组织化学检测32对临床宫颈癌组织及正常宫颈组织中Twist1的表达情况,并运用RNA干扰技术沉默宫颈癌He La细胞内Twist1后检测细胞的侵袭能力以及侵袭相关基因表达的变化;采用Pearson相关性检验分析Twist1与micro RNA-33a(mi R-33a)在宫颈癌组织内的关系,并分析mi R-33a对Twist1的调节关系及其对细胞侵袭能力的影响。结果:Twist1在宫颈癌组织和正常宫颈组织中表达的阳性率分别为75.0%(24/32)和21.9%(7/32),二者表达差异具有统计学意义(P<0.05);Twist1 sh RNA能显著减低He La细胞的体外侵袭能力。宫颈癌组织中mi R-33a的表达较正常组织减低(P<0.05),并与Twist1呈负相关(r=-0.661,P<0.05);而宫颈癌细胞内过表达mi R-33a可减低Tiwst1的表达(P<0.05),并减弱细胞的体外侵袭能力。结论:Twist1在宫颈癌的侵袭转移过程中发挥着重要的作用,mi R-33a为上游调控Twist1的表达及细胞侵袭能力的抑癌基因。
- 胡佳桂艳红谢平丽李官成
- 关键词：宫颈癌TWIST1RNA干扰细胞侵袭
- 带通风过滤装置的全自动酶免仪
- 本实用新型涉及医疗器械技术领域，公开了带通风过滤装置的全自动酶免仪，包括轨道，活动安装于轨道上用于放置酶标板的载架，依次设于轨道上的液体添加系统模块、恒温孵育系统模块、洗板系统模块和结果判读系统模块，用于安装机柜，轨道、...
- 李官成李跃辉孙瑞利谢平丽
- 文献传递
- 骨髓中表达VEGFR—1的造血前体干细胞在肝细胞癌肺转移中的表达及临床意义
- 目的肝细胞癌是我国常见恶性肿瘤之一,每年约有23万人死于肝癌,其死亡率位居我国恶性肿瘤第二位,手术切除是肝癌获得根治的最好手段,但即使是根治性切除,5年内仍约有70%的病人出现复发转移,转移复发已成为攻克癌症最重要的难关...
- 左朝晖欧阳永忠曾亮周国华李跃辉谢平丽
