邬敏辰
- 作品数：142 被引量：986H指数：18
- 供职机构：江南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金“九五”国家科技攻关计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程医药卫生更多>>
- 胆固醇氧化酶基因的克隆及在E.coli中的表达被引量：12
- 2006年
- 根据NCBI中报道的BrevibacteriumsterolicumATCC21387胆固醇氧化酶基因序列,采用PCR方法以Brevibacteriumsp.DGCDC-82的基因组为模板,扩增得到了编码胆固醇氧化酶的基因,该基因与来源于BrevibacteriumsterolicumATCC21387的胆固醇氧化酶基因(choB)同源性为98%。将得到的基因定向克隆到pET28a载体中,转化至含有编码argU和proL基因的大肠杆菌BL21-CodonPlus(DE3)-RP中表达。经过IPTG诱导后,经SDS-PAGE检测在约55kD处有一蛋白表达条带,目的蛋白表达量约占总蛋白的16%,经测定酶活为340U/L。
- 王龙刚邬敏辰王武
- 关键词：BREVIBACTERIUM胆固醇氧化酶克隆原核表达
- 圆弧青霉PG37碱性脂肪酶的发酵生产、分离纯化及基因克隆和表达
- 该博士论文对圆弧青霉碱性脂肪酶进行了较系统深入地研究,实验内容包括:圆弧青霉突变株PG37的诱变选育、PG37碱性脂肪酶发酵工艺条件的优化、25L实验室小罐发酵条件探索、20m<'3>发酵罐大生产试验以及脂肪酶提取和颗粒...
- 邬敏辰
- 关键词：碱性脂肪酶发酵纯化基因序列
- 文献传递
- 弓形虫昆山分离株速殖子期表达型cDNA文库的构建及鉴定被引量：17
- 2000年
- 目的 构建弓形虫速殖子期表达的基因的完整长度cDNA文库。方法 用CF - 11纤维素柱快速提纯速殖子 ,以盐酸异硫氰酸胍 (AGPC)一步法抽提总RNA ,oligo -dT纤维素分离mRNA后 ,用ClonTech公司的SmartTMPCRcDNA文库构建试剂盒 ,构建了弓形虫昆山分离株的表达型文库。结果 获得 5× 10 6个独立克隆 ,重组率为 99% ,插入片段的平均长度为 1kb。
- 杨秋林陆惠民邬敏辰黄伟达
- 关键词：弓形虫CDNA文库克隆
- 基因重组技术在疾病诊断和治疗中的应用被引量：1
- 2002年
- 综述了疾病基因的发病机制和基因重组技术在疾病诊断和治疗中的应用 .基因重组技术作为分子生物学发展的一个重要领域 ,它为生命科学的理论研究提供了崭新的技术手段 ,也为工农业生产和现代医学的发展开辟了广阔的前景 .
- 邬敏辰陈屏
- 关键词：疾病诊断基因重组疾病治疗生命科学分子医学
- 茶树菇多糖的提取工艺被引量：6
- 2006年
- 对茶树菇胞内和胞外多糖的提取工艺进行了研究，通过单因素法确定了胞内多糖水提法的最适条件：提取温度80～90℃，水料体积比为4：1，提取10h，共提取3次，醇析中加入3倍体积的体积分数为95％的乙醇。应用响应面分析法对胞外多糖醇析过程进行了优化。结果表明，在添加4倍体积的体积分数为95％乙醇，醇析17h，pH5．5的条件下，胞外多糖产量可达5．76mg/mL。
- 邓超邬敏辰
- 茶树菇多糖对荷瘤动物模型影响的研究被引量：26
- 2005年
- 对茶树菇多糖对荷瘤动物模型的影响进行了研究,实验结果表明:茶树菇多糖对小鼠S180移植肉瘤及S180腹水瘤具有显著的抑制作用,对环磷酰胺所致的实验小鼠白细胞数下降有显著的升高作用。
- 徐静娟邬敏辰陈屏
- 关键词：抑瘤作用
- β-甘露聚糖酶高产菌株选育及产酶条件的研究被引量：25
- 2005年
- 从实验室保藏的曲霉菌株中,通过筛选和紫外线诱变,获得了一株遗传性状稳定的酸性β甘露聚糖酶高产菌株Aspergillus usamii YL0178。在单因素试验基础上,采用Plackett Burman和Box Behnken实验设计确定的最佳产酶培养基组成和培养条件为:m(麸皮)∶m(豆饼粉)=7∶3,魔芋粉2%,KH2PO40.2%,MgSO40.1%,CaCl20.1%,NaNO31.5%(均相对于固体物料),液固比为1.2∶1,自然pH;31℃静置培养72h,期间翻曲2～3次。最高酶活可达3362IU/g(干曲)。
- 李剑芳邬敏辰夏文水
- 关键词：Β-甘露聚糖酶宇佐美曲霉菌株选育产酶条件紫外线诱变培养基组成高产菌株
- 连接肽的设计及在融合蛋白中的应用被引量：11
- 2015年
- 利用基因工程技术改造酶分子已成为现代分子酶工程的一个研究热点,其中基于融合蛋白设计的融合酶技术已逐渐应用于多功能酶的构建中,表现出了重要的理论与应用研究价值。作为重组融合蛋白不可缺少的部分,连接肽已在融合蛋白的稳定性、生物活性等方面表现出重要的作用。根据近年来的最新研究成果,作者总结了自然界中天然连接肽的性质,并对糖苷水解酶融合酶中连接肽的分类及其对融合酶的作用作了归纳和总结,并对连接肽设计的关键问题进行了探讨和展望。
- 李剑芳王春娟邬敏辰
- 关键词：糖苷水解酶融合蛋白连接肽
- 宇佐美曲霉木聚糖酶基因xynⅡ在不同毕赤酵母中的分泌表达被引量：6
- 2008年
- 将宇佐美曲霉E001的内切-1,4-木聚糖酶基因克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K中,得到重组质粒pPXY-NII,将其经SalⅠ线性化后分别转化2株毕赤酵母GS115和KM71,xynⅡ基因通过同源重组被整合到毕赤酵母染色体上,并处于酵母α因子的下游,经筛选获得阳性重组菌PXGL98(Mut+)和PXKL29(Muts)。该木聚糖酶基因在2株毕赤酵母中均实现了分泌表达。同时对工程菌的发酵条件进行了优化,在甲醇诱导下,PXGL98与PXKL29培养物上清液中的酶活力分别可达1156.92 U/mL和1646.03 U/mL。
- 周晨妍邬敏辰李东峰王瑾王武
- 关键词：宇佐美曲霉毕赤酵母分泌表达
- 阿魏酸酯酶A的基因克隆与表达及其水解产物的纯化被引量：5
- 2014年
- 为在毕赤酵母中表达来源于米曲霉Aspergillus oryzae的A型阿魏酸酯酶并研究其水解功能,探讨大孔树脂对其水解产物阿魏酸的纯化条件及纯化效果,以米曲霉A.oryzae CICC 40186总RNA为模板,通过RT-PCR技术克隆出了米曲霉阿魏酸酯酶A(AorFaeA)成熟肽的编码基因AorfaeA,并借助pPIC9K质粒实现了其在毕赤酵母GS115中的异源表达。SDS-PAGE分析结果显示纯化后的重组阿魏酸酯酶(reAorFaeA)为单一条带,其表观分子质量约39.0 kDa。以阿魏酸甲酯为底物,经高效液相色谱法测得该酶的最高酶活为58.35 U/mg。利用reAorFaeA和木聚糖酶复合酶水解去淀粉麦麸制备阿魏酸,用大孔树脂纯化小麦麸皮阿魏酸粗提液,所测树脂中HPD-300型大孔树脂的吸附量和解吸率较高,以50%的乙醇为洗脱液,当流速为1.0 mL/min时洗脱效果较好。在该纯化条件下,阿魏酸的回收率为92%,质量分数由原材料中的0.13%富集提高到10.55%。这些研究为阿魏酸的酶法"绿色生产"及应用奠定了坚实的理论基础。
- 曾妍龚燕燕邬敏辰殷欣唐存多
- 关键词：米曲霉克隆表达纯化
