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黄耕: 作品数：205 被引量：680H指数：16; 供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所更多>>; 发文基金：国家科技支撑计划国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>

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犬细小病毒的分离鉴定: 我们进行了CPV的流行病学调查,成功地从不同地区送检的肠炎犬病料中分离到了10株细小病毒,经系统鉴定均证明为CPV,这为开展我国CPV的流行、变异、基因分型和防治研究打了基础.; 谢之景夏咸柱赵忠鹏扈荣良黄耕; 关键词：军犬细小病毒病毒分离鉴定; 文献传递

犬、猫科动物重要疫病病原胶体金银联合检测试纸及其制备技术: 本发明涉及一种犬、猫科动物重要疫病病原胶体金银联合检测试纸及其制备方法，将胶体金标记的鼠源RV、CDV、FPV和CPV等单抗混合包被在玻璃纤维素膜上，制成结合垫；分别将纯化的犬抗RV、CDV、FPV和CPV等的IgG包被...; 夏咸柱杨松涛黄耕王承宇高玉伟王铁成侯小强高明华苏建青; 文献传递

犬腺病毒SY-45株不同大小蚀斑特性研究被引量：2: 2001年; 应用蚀斑方法将 SY- 4 5毒株经过 3次蚀斑纯化直到蚀斑大小相对稳定。从不同大小的蚀斑中挑选出三种蚀斑 ,大斑直径约 3mm (简称 LP)、中斑约 2 mm(简称 MP)、小斑约 1 mm(简称 SP)。分别在 MDCK细胞上增殖并进行了三种不同大小斑毒对犬的毒力、免疫原性和在 MDCK细胞上产毒量比较 ,以筛选最佳的疫苗株 ,试验结果表明用不同大小蚀斑病毒大剂量人工感染易感犬后 ,所有的试验犬临床症状和病理解剖学和病理组织学表现均正常 ;对挑选的 4窝 CAV HI抗体效价小于等于 1 :2的健康幼犬进行免疫试验 ,测定血清的中和抗体效价和血凝抑制抗体效价 ,结果表明 :大斑毒的免疫原性要稍高于中斑毒 ,而明显高于小斑毒 ;不同大小蚀斑毒在 MDCK细胞上产毒量差异很大 ,大斑毒可达 1 0 7TCID50 / m L、小斑毒达 1 0 6 TCID50 /ml、小斑毒达 1 0 4 .5TCID50 / m L。综合所有试验结果表明 :大斑毒株具有产毒量高、安全性好、免疫原性强的优点 ,是较为理想的疫苗株。; 范泉水夏咸柱邱薇黄耕何洪彬余春乔军武银莲殷震; 关键词：犬2型腺病毒

犬Ⅱ型腺病毒分离、致弱及其基因重组苗的基础研究: 1.应用DK细胞先后从犬、狐、熊等动物病料中,分离获得6株犬腺病毒,经系统鉴定证明4株为1型CAV(CA-1)强毒,2株为2型CAV(CAV-2),其中强、弱毒各1株。2.应用DK细胞,将所分离的CAV-2强毒株SY-5...; 夏咸柱范泉水扈荣良邱薇黄耕邹啸环; 文献传递

一种粉末气溶胶发生器: 一种粉末气溶胶发生器，包括空气压缩机、空气过滤器、干法分散仪以及分散喷头。其通过超声波高频振荡使加料漏斗中的粉末样品均匀进入分散漏斗，再通过高速压缩气体产生负压带动粉末粒子运动，在分散漏斗中搅拌、剪切、碰撞等方式充分分散...; 钱军刘林娜赵思言禹忠全陈权威夏志平郭振东周博王承宇李忠义黄耕李乾学; 文献传递

犬瘟热病毒的蚀斑克隆试验被引量：1: 2000年; 对血清、胰酶以及染色时间等可能影响犬瘟热病毒蚀斑形成的条件进行了摸索。结果发现 ,对必须同步接毒的CDV小熊猫 (LP)株来讲 ,其形成蚀斑的最佳条件是 :同步接毒 10h后 ,加入血清含量为 2 %的无酚红的DMEM营养琼脂 ,第 5d时 ,加入 1/ 5体积的胰酶含量为 1/ 80 0 0的含中性红的DMEM营养琼脂染色 ,于第 6d时 ,便可形成蚀斑。挑选不同大小的蚀斑 ,克隆 3次后 ,获得了蚀斑直径为 0 .4～ 0 .6 ,0 .6～ 0 .8及 0 .7～ 0 .; 何洪彬夏咸柱黄耕范泉水邱薇余春乔军徐黎王雷; 关键词：犬瘟热病毒克隆

一种实验室刀具清理装置: 本实用新型提供一种实验室刀具清理装置，由盒体、清理板、拉紧弹簧构成；盒体为内带旋转轴且具有倾斜开口的半封闭结构；所述倾斜开口为带有限位挡板的四边形开口；两片清理板的一端分别铰接在倾斜开口两侧边缘，配合构成V型开口式结构；...; 何扬王承宇郝镯黄耕钱军夏志平万忠海高玉伟周博李乾学田多刘林娜王铁成刘烨李楠郭振东赵思言; 文献传递

犬瘟热病毒野毒株H蛋白基因的序列分析被引量：22: 1999年; 对引起长春某犬场犬死亡的犬瘟热病毒（ＣＤＶ）野毒株（ＬＩＵ）附着或血凝蛋白（Ｈ）基因进行了全基因序列测定，并与疫苗弱毒Ｏｎｄｅｒｓｔｅｐｏｏｒｔ株作了比较。用４对引物对ＬＩＵ株进行了ＲＴ ＰＣＲ扩增，将扩增得到的４个阳性ＰＣＲ片段纯化后直接测序。将所测序列拼接后，去掉侧翼的Ｆ基因和Ｌ基因序列，得到了Ｈ蛋白的全基因序列。该基因全长为１９４６ｂｐ，开放阅读框架（ＯＲＦ）始于２１～２３位的ＡＴＧ，终止于１８４２～１８４４位的ＴＧＡ，编码６０７个氨基酸。将ＬＩＵ毒株与疫苗弱毒Ｏｎｄｅｒｓｔｅｐｏｏｒｔ株进行比较，二者Ｈ基因核苷酸序列的同源性为９１．７％，推导的Ｈ蛋白氨基酸序列的同源性为９０．２％。Ｏｎｄｅｒｓｔｅｐｏｏｒｔ株的Ｈ蛋白潜在的Ｎ 联糖基化位点为４个，而ＬＩＵ株Ｈ蛋白为８个。糖基化位点的不同可能对ＬＩＵ株Ｈ蛋白的抗原性产生影响。２个毒株Ｈ蛋白的半胱氨酸残基数目均为１２个，且位置是保守的；疏水性有一定的不同，但推测的穿膜区位置是相同的，位于３５～５５位氨基酸之间。; 何洪彬李金中夏咸柱黄耕范泉水余春邱薇; 关键词：犬瘟热病毒抗原性

SARS病毒核蛋白基因的克隆、序列分析及其在E.coli中的高效表达被引量：1: 2005年; 对SARS病毒核蛋白(N)基因进行了克隆和序列测定。根据GenBank中已发表的SARS全基因组序列,设计合成了1对特异性引物,对SARS病毒N蛋白基因进行了RT-PCR扩增。将PCR产物纯化后与pGEM-T连接得到重组质粒pGEM-N,进行核苷酸序列测定。结果该基因全长1269bp,编码422个氨基酸。与Tor2、Urbani和TW1株相比,核苷酸和推导的氨基酸序列的同源性均为100%。将pGEM-N双酶切,回收目的基因片段并克隆到大肠杆菌表达载体pET28a中,构建了重组质粒pET-N;将其转化表达菌BL21(DE3)用IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE结果表明:重组菌可表达相对分子量约为53kD的蛋白。Western-blotting证实,重组N蛋白可以与SARS免疫血清发生特异性反应。经凝胶薄层扫描分析,重组N蛋白表达量约占菌体蛋白的43%。; 杨松涛夏咸柱乔军高玉伟常爽黄耕郑明光; 关键词：SARS病毒 N蛋白基因克隆