于云飞
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：暨南大学更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 二硫键稳定的人源性抗bFGF双链抗体抑制人肺癌细胞生长的作用研究被引量：1
- 2016年
- 目的研究二硫键稳定的人源性抗b FGF双链抗体(ds-Diabody)对人肺癌A549细胞的体内外增殖抑制作用。方法利用镍离子亲和层析和离子交换层析的方法纯化得到ds-Diabody,间接ELISA检测其抗原结合活性,CCK-8法检测ds-Diabody对人肺癌A549细胞的增殖抑制作用,Western blot分析其作用于肿瘤细胞的机制,Transwell检测其对肿瘤细胞迁移侵袭的影响。建立裸鼠皮下移植瘤模型,记录各处理组裸鼠皮下移植瘤的体积及裸鼠体质量变化。免疫组化法检测肿瘤组织CD31和LYVE1的表达情况,初步探讨抗b FGF的人源性ds-Diabody抗体的抗肿瘤机制。结果成功纯化得到具有抗原结合活性的ds-Diabody。CCK-8结果显示,纯化的ds-Diabody可剂量依赖性地抑制人肺癌A549细胞株的增殖。Western blot结果表明ds-Diabody能有效阻断与b FGF相关的MAPK和Akt通路。Transwell结果表明ds-Diabody可以显著抑制A549细胞的迁移及侵袭。裸鼠体内试验中,ds-Diabody抗体显著地抑制了肿瘤的生长,抑制率为86.54%。免疫组化的结果显示ds-Diabody抗体处理组肿瘤组织中微血管密度和淋巴管密度均有下降。结论抗bFGF的人源性ds-Diabody抗体可有效地抑制人肺癌A549细胞的生长。
- 蔡亚雄张晋霞姜浩武于云飞姚双娥邓宁
- 关键词：人肺癌细胞淋巴管新生
- ONECUT2基因沉默抑制卵巢癌细胞增殖、转移和血管新生
- 目的：ONECUT2(One Cut Homeobox2,OC-2)是一个新发现的与肿瘤细胞增殖、血管新生和转移相关的转录因子，同时，它也与癌细胞的EMT(Epithelial Mesenchymal Transitio...
- 于云飞
- 关键词：卵巢癌基因沉默细胞增殖血管新生
- 抗FGF2人鼠嵌合抗体在HEK293T细胞中的表达优化
- 2014年
- 目的:FGF2是肿瘤血管新生过程中最重要的因子之一,因此通过制备抗FGF2人鼠嵌合抗体中和其发挥作用,以达到抑制肿瘤生长的目的。方法:利用分泌抗FGF2抗体的杂交瘤细胞株IgG9B9和人B淋巴细胞,分别克隆抗体轻链可变区V L、重链可变区V H和人重链恒定区C H基因,从pComb3λ载体中扩增出人λ链恒定区C L基因,通过重叠PCR,将V L,V H和C L,C H片段分别连接形成嵌合抗体的轻链L和重链H,将L/H链以单独构建或串联于同一载体的方式,构建抗FGF2嵌合抗体表达载体,并通过调控元件WPRE优化载体、共转染促生长因子aFGF以及调整表达温度等方式提高嵌合抗体在真核细胞中的表达。结果:成功构建了优化表达载体PLexmWPRE、PLexm-aFGF;L、H链基因也成功构建,并以L、H或L-F2A-H(2A连接肽将L和H连接起来)的方式分别成功连接到PLexm,PLexm-WPRE载体中。转染细胞上清的ELISA鉴定结果表明,L/H链单独构建要比串联构建的方式具有更高的表达水平,WPRE能有效促进抗体的表达而aFGF并不能促进其表达,与31、37℃相比,33℃时抗体的表达量最高,同时嵌合抗体表现出了很好的结合活性及中和活性,竞争IC50=6.25μg/ml。通过亲和层析获得了高纯度的抗FGF2嵌合抗体。结论:在33℃下,人鼠嵌合抗体基因在WPRE存在下表达量最高,且与抗原FGF2有很好的结合活性及中和活性,为临床应用奠定了基础。
- 王金胜姜浩武张晋霞潘磊赵凤芝于云飞蔡亚雄邓宁
- 关键词：碱性成纤维生长因子嵌合抗体真核表达载体
- 一种靶向OC-2基因的siRNA及其应用
- 本发明公开一种靶向OC‑2基因的siRNA及其应用。本发明以ONECUT2 mRNA为靶标，设计两对特异性双链siRNA分子，序列如SEQ ID NO.2～5所示。合成的双链siRNA能与与OC‑2基因序列互补，导入细胞...
- 邓宁鲁统一于云飞
- 文献传递
