何芳
- 作品数：58 被引量：159H指数：7
- 供职机构：中南大学湘雅医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 小胶质细胞活化对内侧颞叶癫痫的影响:MRP8的重要作用
- 目的 探讨内侧颞叶癫痫时小胶质细胞是否活化及髓样相关蛋白8(Myeloid-re-lated protein-8,MRP8)的表达变化,证实活化的小胶质细胞可产生MRP8,并探讨其参与内侧颞叶癫痫(Mesial temp...
- 孔总敏甘娜彭镜吴丽文何芳尹飞
- 儿童变异型吉兰-巴雷综合征11例临床分析被引量：2
- 2019年
- 2010年11月至2018年2月中南大学湘雅医院收治11例儿童变异型吉兰-巴雷综合征(Guillain-Barrésyndrome,GBS)患者,主要临床表现为颅神经受累(9例)、肢体无力(9例)、共济失调(8例)、感觉异常(7例),均有腱反射减弱或消失;脑脊液呈现蛋白-细胞分离现象6例,肌电图提示神经源性改变8例。5例患者予丙种球蛋白治疗,1例予大剂量激素治疗,1例予丙种球蛋白联合大剂量激素治疗,4例对症治疗。所有患者预后良好,未遗留明显神经系统后遗症。变异型GBS的诊断主要基于临床表现。有颅神经受累表现、共济失调及腱反射减弱或消失的患者,需高度警惕变异型GBS。脑脊液蛋白-细胞分离现象及肌电图检查有助于明确诊断。变异型GBS属于自限性疾病,重症患者免疫治疗可缓解病情。
- 黎巧王国丽何芳杨海燕吴丽文
- 关键词：吉兰-巴雷综合征变异型
- TNF-α对小鼠脑微血管内皮细胞RhoA活性的影响被引量：7
- 2011年
- 目的:观察肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对小鼠脑微血管内皮细胞RhoA活性和表达的影响,探讨p115RhoGEF是否参与其调控。方法:以小鼠脑微血管内皮细胞株bEnd.3为实验对象,TNF-α(10μg/L)刺激后pull-down检测RhoA活性,Western blotting检测RhoA总蛋白表达;再将bEnd.3分为siRNA组(转染p115RhoGEFsiRNA)和对照组(转染无活性的nsRNA),Western blotting检测p115RhoGEF蛋白的表达,pull-down检测TNF-α预处理后RhoA活性的变化。结果:RhoA活性在TNF-α刺激30 min后明显增高达到高峰,RhoA总蛋白表达在TNF-α刺激12 h和24 h显著上调;TNF-α刺激siRNA组bEnd.3细胞30 min后,RhoA活性较对照组明显降低。结论:TNF-α可导致小鼠脑微血管内皮细胞RhoA活性增加和表达上调,p115RhoGEF可能参与了TNF-α诱导RhoA活化的调控过程。
- 邓小鹿彭镜何芳杨丽芬吴丽文尹飞
- 关键词：肿瘤坏死因子RHO内皮细胞
- 永生化小鼠Bend.3细胞株具有脑微血管内皮细胞的屏障特性被引量：11
- 2010年
- 目的评价永生化小鼠脑微血管内皮细胞株Bend.3是否具有脑微血管内皮细胞的屏障特性。方法将小鼠脑微血管内皮细胞株Bend.3接种于细胞培养插内,跨内皮细胞电阻抗(transendothelial electrical resist-ance,TEER)和辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)通透性实验检测其屏障功能。Western blot法和直接荧光染色法观察其紧密连接相关蛋白Occludin、ZO-1的表达及细胞骨架蛋白F-actin的分布。结果 Bend.3细胞的TEER随培养时间延长逐渐升高,10d达82.3±6.0Ω.cm2,与培养3d时的37.3±3.1Ω.cm2相比,差异有统计学意义(P<0.05)。其培养10d和3d的平均HRP通透率在120min分别为(2.2±0.05)%和(4.3±0.20)%,差异有统计学意义(P<0.05)。培养10d时该细胞表达高浓度的紧密连接蛋白Occludin、ZO-1,且F-actin主要分布在细胞周边,线条完整连续,未见明显缝隙形成。结论小鼠脑微血管内皮细胞株Bend.3具有脑微血管内皮细胞的屏障特性,且其屏障功能在接种10d后可达到最理想的状态。
- 何芳尹飞彭镜李孔昭吴丽文邓小鹿
- 关键词：小鼠
- TLR4、MRP8在内侧颞叶癫痫幼大鼠海马中表达的动态变化被引量：6
- 2012年
- 目的观察氯化锂-匹罗卡品致痫幼大鼠各期海马中Toll-样受体4(TLR4)、髓样相关蛋白8(MRP8)表达的变化,探讨其是否与内侧颞叶癫痫(MTLE)发生有关。方法 21d SD雄性大鼠90只,随机分对照组(30只)和模型组(60只),腹腔注射氯化锂。17～18h后模型组腹腔注射匹罗卡品诱导癫痫持续状态(SE);对照组予等量生理盐水取代匹罗卡品腹腔注射。按自发发作出现和稳定时间(自发痫性发作在致痫后约3w出现,8w趋稳定),对照组和模型组随机分6个亚组:急性模型组(SE后2h)、潜伏模型组(SE后3w)、慢性自发发作组(SE后8w)及相对应时间点对照组。每亚组动物10只。免疫组化、免疫印迹、RT-PCR技术测定各亚组幼大鼠海马内TLR4、MRP8的表达。结果 TLR4、MRP8在模型组海马内表达明显增多,以CA3、CA1、DG区显著;与对照组相比,差异有显著性(P<0.05)。模型亚组内,TLR4、MRP8在急性期和慢性期表达明显增高,而潜伏期无明显表达变化;3组比较差异有显著性(P<0.05)。结论大鼠海马内TLR4、MRP8表达增多可能与MTLE发生有关。探讨其机制可能为MTLE的治疗提供新的靶点。
- 向秋莲张慈柳彭镜何芳吴丽文欧曼尹飞
- 关键词：内侧颞叶癫痫
- CHD2基因突变导致Dravet综合征1例病例报告被引量：6
- 2016年
- 1病例资料
男,汉族,4岁9个月。因＂反复抽搐4年＂于2015年10月22日就诊中南大学湘雅医院（我院）儿科神经专科门诊。患儿9个月时第1次出现发热时抽搐,表现为双眼上翻,双眼凝视,口唇发绀,双手握拳,双上肢屈曲,双下肢强直,呼之不应,持续约3 min自行缓解,当地医院诊断为＂热性惊厥＂,EEG及头颅CT检查未见异常。
- 邓小鹿何芳吴丽文尹飞彭镜
- 关键词：基因突变神经专科棘慢波肌阵挛发作
- 发动蛋白-1的脯氨酸和精氨酸富集域功能域与大鼠神经突触小体相互作用蛋白的筛选及鉴定
- 2012年
- 目的筛选及鉴定发动蛋白-1(Dynamin-1)的脯氨酸和精氨酸富集域(PRD)功能域在大鼠神经突触小体中的相互作用蛋白。方法构建Dynamin-1 PRD功能域的重组原核表达质粒pGEX-4T-2-PRD,通过大肠杆菌表达系统进行诱导表达;谷胱甘肽琼脂糖凝脂柱纯化得到融合蛋白GST-PRD,继而利用谷胱甘肽巯基转移酶沉淀技术,筛选出GST-PRD融合蛋白与分离提取的大鼠神经突触小体的相互作用蛋白,并通过液相质谱技术结合数据库,对上述获得的相互作用蛋白进行分析、鉴定。结果通过构建pGEX-4T-2-PRD重组质粒及诱导表达,成功纯化出了融合蛋白GST-PRD;同时成功提取了大鼠神经突触小体,经谷胱甘肽巯基转移酶沉淀技术联合液相质谱分析,获得在大鼠神经突触小体中与Dynamin-1的PRD域有相互作用的蛋白共35个,分别属于突触囊泡相关蛋白、细胞骨架蛋白、代谢酶及其他类的蛋白。结论本研究获得的与Dynamin-1的PRD域有相互作用的蛋白共35个。
- 彭镜张慈柳李玉飞吴蕾何芳邓小鹿尹飞
- 儿童髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体病复发因素及预防复发方案疗效的回顾性分析被引量：2
- 2021年
- 目的探讨儿童髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(myelin oligodendrocyte glycoprotein,MOG)抗体病的临床特点、复发因素及预防复发方案的疗效。方法回顾性分析2014年12月至2020年9月在中南大学湘雅医院小儿神经专科住院的41例儿童MOG抗体病患儿的临床资料,根据患儿是否复发分为单相病程组(n=19)、复发组(n=22),复发患儿根据是否采用预防治疗分为预防治疗组及未预防治疗组。分析各组患儿的临床特征及比较各预防方案治疗前、治疗中年复发率(annualized relapse rate,ARR)的差异。结果41例患儿中最常见的首发表现为急性播散性脑脊髓炎(56%,23/41)。54%(22/41)患儿复发,共有57次复发事件,最常见的复发事件为视神经炎(30%,17/57)。复发组急性期皮质激素疗程不足3个月的患儿比例高于单相病程组(64%vs 32%,P<0.05)。预防治疗组和未预防治疗组ARR差异无统计学意义(P>0.05)。评估32例次预防治疗方案发现,使用利妥昔单抗、硫唑嘌呤的治疗中ARR较治疗前ARR降低(P<0.05)。结论超半数儿童MOG抗体病会出现复发,多数复发患儿急性期皮质激素疗程不足3个月;利妥昔单抗、硫唑嘌呤可能减少复发风险。
- 朱飒英彭镜毛蕾蕾邓小鹿张慈柳杨丽芬尹飞何芳
- 关键词：复发免疫治疗儿童
- miR-132和miR-146a在内侧颞叶癫痫患儿和幼年大鼠海马组织中的表达变化
- 2014年
- 目的:观察miR-132、miR-146a在内侧颞叶癫痫(mesial temporal lobe epilepsy,MTLE)患儿及幼年大鼠模型海马组织中的表达变化。方法:收集MTLE患儿海马标本及正常对照人海马标本,Real-time PCR方法检测两组人海马组织中miR-132、miR-146a的表达改变。利用匹罗卡品诱导建立幼年大鼠MTLE模型,收集急性期(造模后2 h)、潜伏期(造模后3周)、慢性期(造模后8周)海马组织标本及相应时间点对照组大鼠海马标本,Real-time PCR方法检测各实验组大鼠海马组织中miR-132、miR-146a的表达改变。结果:miR-132、miR-146a在患儿MTLE海马组织中表达明显升高,分别为2.2±0.1和3.0±0.2,与正常对照组(1.0±0.2)比较差异有统计学意义(P<0.05)。miR-132在MTLE大鼠模型急性期、潜伏期及慢性期表达均明显增加,分别为5.2±0.5,2.5±0.2和3.6±0.2,较正常对照组大鼠(1.0±0.1)差异有显著性(P<0.05);miR-146a在MTLE大鼠急性期改变不明显,在潜伏期及慢性期表达明显增加(2.8±0.2,1.8±0.2),与对照组大鼠(1.0±0.1)比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-132、miR-146a在MTLE患儿及幼年大鼠模型中存在差异表达,其可能与MTLE中脑组织炎症反应的异常调控有关。
- 孔惠敏尹飞吴丽文何芳彭镜
- 关键词：MIR-146A
- 不明原因智力障碍共患癫痫患者的临床及遗传学分析被引量：3
- 2017年
- 目的 探讨不明原因智力障碍共患癫痫（ID-E）患者的临床特点、病因及预后。方法 对2015年3月至2016年3月中南大学湘雅医院儿科40例不明原因ID-E患者的临床特点、病因及癫痫控制情况进行回顾性分析，并对所有患者进行随访。结果 40例不明原因ID-E患者中男25例（62.5%），重度智力障碍34例（85.0%）。癫痫首次发作年龄为0.16～8.00岁（中位年龄1.5岁），脑电图背景慢化20例（50.0%），局灶性放电22例（55.0%）。头颅磁共振异常10例（25.0%），主要为脑发育异常及脑萎缩。随访时间0.58～1.58年，癫痫发作控制19例（47.5%），25例（62.5%）在病程中使用2种及2种以上抗癫痫药物，药物难治性癫痫患者占47.5%（19例）。癫痫发作控制患儿及未控制患儿精神运动发育改善分别为12例（63.2%）及2例（9.5%）。通过全基因组拷贝数变异（CNVs）检测及CNVs检测阴性部分患者进行基因靶向捕获测序检测，分别有8例（8/40例，20.0%）及3例（3/16例，18.8%）明确了遗传学病因。结论 不明原因ID-E患者男性多见，智力受损程度重，药物难治性癫痫比例高，有效控制癫痫发作有助于患者精神运动发育。遗传病因学检测对于癫痫的控制、预后评估有重要作用，全基因组CNVs检测阳性率高，可作为临床一线遗传学检测手段。
- 彭镜陈晨廖立红杨丽芬何芳单丽丹陈施梦尹飞
- 关键词：智力障碍癫痫遗传学检测
