修朝阳
- 作品数：12 被引量：104H指数：6
- 供职机构：中国科学院上海生命科学研究院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程理学更多>>
- I.人甲状旁腺素1～34肽的制备 II.人胸腺素α1的制备及其与干扰素α-1b的融合表达
- 第一部分：人甲状旁腺素1-34肽的制备 第一章：人甲状旁腺素1-34肽的化学合成 目的 以wang树脂为载体，应用Fmoc/tBu方法合成人甲状旁腺素。方法 Fmoc保护氨基酸用TBTU/HoBt活化后，进行缩合反应。合...
- 修朝阳
- 文献传递
- 凝血酶的亲和层析纯化技术被引量：13
- 2003年
- 以新鲜猪血为原料 ,采用离心、激活、沉淀等技术提取出粗凝血酶 ,利用化学方法将分子量范围在 6KD左右的肝素连接到经溴化氰活化的 Sepharose CL- 6B树脂上 ,制成亲和树脂 ;采用亲和方法 ,从粗酶中纯化得到猪凝血酶。活性测定表明 ,在保持酶的底物专一性的同时 ,凝血酶的比活上升了 32 .5倍左右。计算总活力回收率约 5 0 .6%。同时对肝素亲和层析柱的制备以及洗脱方法进行了探讨。
- 王海亭修朝阳丁彩凤王贵武董宏伟
- 关键词：凝血酶纯化技术肝素
- 甲状旁腺素1-34肽的固相合成被引量：6
- 2002年
- 目的以Wang树脂为载体 ,应用芴甲氧羧基 /tBu方法合成人甲状旁腺素。方法芴甲氧羧基保护氨基酸用 1 氧 3 双二甲胺羧基苯骈三氮唑四氟化硼盐 / 1 羧基苯并三氮唑活化后 ,进行缩合反应。合成的多肽用三氟乙酸处理 ,从Wang树脂上切除。所得粗肽用SP Sepharose FF色谱柱和半制备型高效液相色谱分离纯化。结果用反相高效液相色谱法和毛细管电泳法鉴定纯度在 92 %以上。通过电喷雾质谱法测定其分子量为 4 1 1 6D ,与计算值相符。总收率为 8%。结论此工艺简单 ,易于扩大 。
- 周贺钺修朝阳陈常庆
- 关键词：固相合成甲状旁腺素
- 人胸腺素α1在大肠杆菌中的融合表达被引量：13
- 2002年
- 利用基因工程表达的方法 ,在大肠杆菌中通过与GST蛋白融合的方式高效表达了胸腺素α1前体基因 ,随后经亲和层析和SP强阳离子树脂纯化相结合的方式 ,得到了胸腺素前体肽段 31肽和N 端未经乙酰化修饰的 2 8肽。融合蛋白表达量达到菌体总蛋白的 35 %～ 40 % ,样品肽的产量也达到了约 2 0 0mg L(肽 发酵液 )的产量。经质谱测定 ,分子量分别为 336 6和 30 6 6。BalB C小鼠脾脏淋巴细胞体外测活表明 ,所构建的GST Tα1融合蛋白和纯化后的产物对于淋巴细胞具有比较明显的增殖作用 ,其中N 端未经乙酰化的 2 8肽产物与 31肽产物活性相近 。
- 修朝阳周穗菁俞璎陈常庆
- 关键词：大肠杆菌
- 黄海黄杆菌YS-9412-130低温碱性蛋白酶性质鉴定被引量：31
- 2001年
- 对黄海黄杆菌 YS- 94 12 - 130菌株产低温碱性蛋白酶的理化性质研究表明 ,该酶由 2 56个氨基酸组成 ,分子量为 330 0 0 Dar,等电点 p I为 9.4 5,米氏常数 Km为 5× 10 -3 m mol/ L;酶的最适作用p H范围为 9.5～ 10 .5,最适作用温度 30℃ ,具有一定的抗氧化稳定性。Ca2 +、Mn2 对酶有激活作用 ,而 Hg2 +、Ag+对酶有抑制作用。 DFP、NBS严重抑制酶的活性 ,而同时该酶也能被 EDTA抑制。结果表明该低温碱性蛋白酶为一新型的丝氨酸蛋白酶。
- 孙谧修朝阳王跃军陈丽芳张云波洪义国阎晓玲韩艳波李晶陈良
- 关键词：理化性质
- 黄海黄杆菌YS-9412-130低温碱性蛋白酶活性必需基团分析被引量：3
- 2002年
- 用化学修饰法结合酶的紫外吸收光谱变化研究黄海黄杆菌 YS- 94 12 - 130分泌的海洋低温蛋白酶的功能基团性质 ,结果表明 ,羟基、咪唑基、ε-氨基及胍基均与酶活性有关 ,而羧基、巯基与酶活性无关。酶的性质与丝氨酸蛋白酶有很大的相似性。
- 洪义国孙谧修朝阳张云波王海英王跃军
- 关键词：低温碱性蛋白酶必需基团酶活力
- 脯氨酰内肽酶培养条件的优化及高密度发酵被引量：12
- 2000年
- 基因工程菌E.coliBL21/pGEMPEP可以组成型表达重组的点状产气单胞菌脯氨酰内肽酶(PEP),但培养条件极大地影响着酶的产量,为了获得高效表达,首先测定了工程菌表达PEP的稳定性并考察了培养温度、pH、发酵时间、碳源、氮源、无机盐等对产酶的影响,得到了优化的发酵条件,L9(34)正交试验进一步明确了摇床转速、培养温度、pH值、培养时间对产酶量的影响都有高度的统计学意义。在此基础上利用NBSBioFlo3000型5L自控发酵罐进行了高密度、高表达发酵、经20h培养,最终菌体密度达OD60060(相当于干菌体225g/L),PEP表达量为28%,每升发酵液中含PEP酶315g。
- 李民修朝阳陈常庆
- 关键词：高密度发酵正交实验
- 人甲状旁腺素1～34肽的制备 人胸腺素α1的制备及其与干扰素α-1b的融合表达
- 修朝阳
- 关键词：氨基酸甲状旁腺素胸腺素基因工程
- 海洋微生物低温酶特性及其在工业中的潜在用途被引量：27
- 2002年
- 依据近年来关于低温酶的研究资料 ,讨论了低温酶的研究现状 ,对产低温酶海洋细菌的种类、嗜冷特性、适应低温的机制以及对其在工业上的应用作一评述。
- 孙谧洪义国李勃生修朝阳
- 关键词：低温酶海洋微生物
- 重组人甲状旁腺素1－34肽的生产工艺
- 本发明提供了发明涉及人甲状旁腺素1－34肽的生产工艺，包含以下步骤：(a)在适合表达人甲状旁腺素1－34肽的条件下，培养权利要求6所述的宿主细胞；(b)从培养物中分离出具有Gly－Ser－Pro－PTH1－34肽；(c)...
- 陈常庆修朝阳李民
- 文献传递
