张云波 作品数:11 被引量:176 H指数:5 供职机构: 中国水产科学研究院黄海水产研究所 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 生物学 轻工技术与工程 化学工程 农业科学 更多>>
16SrRNA在海洋微生物系统分子分类鉴定及分子检测中的应用 被引量:111 2002年 16 S r RNA序列分析作为微生物系统分类的主要依据已得到广泛认同 ,随着微生物核糖体RNA数据库的日臻完善 ,该技术成为细菌分类和鉴定的一个有力工具。本文总结了 16 S r RNA作为海洋微生物系统分子分类鉴定的理论基础和具体方法 ,分析了用 16 S r RNA研究海洋微生物的进化关系 ,并且对 16 S r 洪义国 孙谧 张云波 李勃生关键词:海洋微生物 分子检测 黄海黄杆菌YS-9412-130低温碱性蛋白酶活性必需基团分析 被引量:3 2002年 用化学修饰法结合酶的紫外吸收光谱变化研究黄海黄杆菌 YS- 94 12 - 130分泌的海洋低温蛋白酶的功能基团性质 ,结果表明 ,羟基、咪唑基、ε-氨基及胍基均与酶活性有关 ,而羧基、巯基与酶活性无关。酶的性质与丝氨酸蛋白酶有很大的相似性。 洪义国 孙谧 修朝阳 张云波 王海英 王跃军关键词:低温碱性蛋白酶 必需基团 酶活力 黄海黄杆菌YS-9412-130低温碱性蛋白酶性质鉴定 被引量:31 2001年 对黄海黄杆菌 YS- 94 12 - 130菌株产低温碱性蛋白酶的理化性质研究表明 ,该酶由 2 56个氨基酸组成 ,分子量为 330 0 0 Dar,等电点 p I为 9.4 5,米氏常数 Km为 5× 10 -3 m mol/ L;酶的最适作用p H范围为 9.5~ 10 .5,最适作用温度 30℃ ,具有一定的抗氧化稳定性。Ca2 +、Mn2 对酶有激活作用 ,而 Hg2 +、Ag+对酶有抑制作用。 DFP、NBS严重抑制酶的活性 ,而同时该酶也能被 EDTA抑制。结果表明该低温碱性蛋白酶为一新型的丝氨酸蛋白酶。 孙谧 修朝阳 王跃军 陈丽芳 张云波 洪义国 阎晓玲 韩艳波 李晶 陈良关键词:理化性质 黄海黄杆菌YS-9412-130低温碱性蛋白酶的制备工艺研究 被引量:11 2001年 对黄海黄杆菌所产低温碱性蛋白酶的工业生产技术和电泳纯级试剂酶的分离纯化工艺进行了实验。按照设计的中试生产技术 ,每吨发酵液可得酶粉 2 0 kg,粗酶比活大于 2 0× 10 4 U/ g;同时运用一系列纯化手段和条件 ,制备出电泳纯级试剂酶 ,纯化过程蛋白回收率在 7%左右 ,活性回收率在60 %以上 ,比活性也稳定在 1.9× 10 3U/ mg以上 ,激光灰度扫描结果试剂酶纯度大于 99% ,可以作为试剂酶满足进一步生物学研究和实际应用。其产品质量和制造工艺均达到了中试放大规模的要求。 王跃军 孙谧 洪义国 张云波 沙珍霞 阎晓玲 苗小庆 姜展军关键词:絮凝沉淀 分离纯化 一种新型低温碱性蛋白酶、制造方法、应用和产生该蛋白酶的微生物 本发明涉及一种新的黄杆菌属未知种菌株YS 9412-130,保藏在中国武汉CCTCC,保藏号为M 200014。由该菌株或其突变体产生的新型低温碱性蛋白酶,该蛋白酶在低温条件下具有低活化能和高活性比,能有效降解蛋白类;酶... 孙谧 王跃军 张云波文献传递 黄海黄杆菌YS-9412-130低温碱性蛋白酶发酵过程动力学研究 被引量:4 2001年 应用自动控制发酵设备 ,对黄海黄杆菌 YS- 94 12 - 130碱性蛋白酶发酵动力学和工艺条件进行了研究。从基本的动力学概念和方程出发 ,通过分批发酵试验摸索了黄海黄杆菌 YS- 94 12 - 130生长与代谢的基本规律 ,证明了发酵过程中低温碱性蛋白酶的形成为生长部分关联型。采用补料分批培养方法限制生长基质浓度 ,确定其一系列参数值 。 孙谧 王跃军 李民 张云波 洪义国 阎晓玲关键词:发酵动力学 补料分批培养 海洋低温溶菌酶抗肿瘤活性的初步研究 被引量:5 2001年 通过观察海洋低温溶菌酶对体外培养细胞株增殖的影响、对角膜诱生血管的影响、对小鼠肉瘤 S180 (实体型 )及对小鼠肝癌 HAC(实体型 )的抑制作用 ,探讨海洋低温溶菌酶抑制肿瘤生长活性。结果表明 ,该酶与蛋清溶菌酶在抑瘤作用机制上有很大区别 ,海洋低温溶菌酶具有血管生成抑制因子的活性 。 张云波 孙谧 蔡勤 王跃军 洪义国 郝建华关键词:血管生成抑制因子 抗肿瘤活性 产低温碱性蛋白酶黄海黄杆菌YS-9412-130高产菌株的选育 被引量:5 2000年 以黄海黄杆菌 YS- 94 12 - 130菌株为出发株 ,经亚硝基胍、硫酸二乙酯、紫外线 ( UV)与微波( MI)复合诱变和自然选育 ,获得 1株产低温碱性蛋白酶高产稳定的突变株 YS- 94 12 - 130 - SW1- 10 4 ,其产低温碱性蛋白酶为出发株的 16倍。在摇瓶发酵培养条件下 ,酶活力达 2 32 0 U/ ml( 2 0℃测定 ) ,该诱变株具有 Refr、Strr、Ampr和 Met-、Lys-标记。突变株与出发菌株在细胞形态上比较 。 张云波 孙谧 洪义国 王跃军 阎晓玲 董美娜 桑玉泉 田杰 王瑞娟关键词:低温碱性蛋白酶 诱变 选育 黄海黄杆菌YS-9412-130产酶发酵条件的优化 被引量:12 2000年 以产低温碱性蛋白酶的黄海黄杆菌 YS- 94 12 - 130突变株 SW2 - 10 4为培养菌株 ,进行碳源、氮源、无机盐、起始 p H值、培养时间、接种量和接种龄等发酵条件的优化实验。实验结果证明 ,在以1%葡萄糖为碳源 ,以 3.5%豆饼粉为氮源 ,无机盐 :0 .4 % Na2 HPO4 、0 .0 3% KH2 P0 4 、0 .0 2 % Mg SO4 、0 .1% Na2 CO3、0 .2 % Ca Cl2 ,起始 p H值 7.0 ,接种 12 h种龄的种子 4 % ,2 0℃、2 50 r/ min的条件下在旋转摇床中培养 36h,菌株产酶活性最高。 张云波 孙谧 王跃军 洪义国 阎晓玲 田杰 谢峰 姜展军关键词:低温碱性蛋白酶 发酵条件 黄海黄杆菌YS-9412-130固定化细胞产酶技术 被引量:5 2000年 3种不同的包埋材料固定化 YS- 94 12 - 130菌体细胞 ,进行半连续发酵。结果表明 ,用 2 .5%卡拉胶固定化细胞 ,产酶效率最高 ;添加明胶对产酶不利而添加豆饼粉与玉米粉后 ,酶活力有显著提高 ;卡拉胶固定化细胞发酵液中游离菌体浓度随发酵时间变化略有上升 ,总体水平较低。发酵液酶活随菌体浓度的增大而呈上升趋势 ;固定化细胞半连续发酵效率远高于游离细胞分批发酵的效率。 张云波 王跃军 洪义国 孙谧 刘惠 王春波 刘晓萍关键词:卡拉胶 固定化细胞 发酵工艺