农小献
- 作品数:8 被引量:35H指数:4
- 供职机构:长沙大学生物工程与环境科学系更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金湖南省教育厅重点项目湖南省高校科技创新团队支持计划更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 斑鳜轻链3基因(MLC3)cDNA的克隆及纵向表达分析被引量:6
- 2011年
- 提取斑鳜肌肉组织总RNA,逆转录得到cDNA,然后利用常规PCR法扩增得到斑鳜肌球蛋白轻链3基因(MLC3)序列.斑鳜MLC3基因cDNA序列的全长为532 bp,编码150个氨基酸.通过PROSITE tools软件预测显示该序列具有2个EF-手相结构.通过实时荧光定量PCR法对斑鳜MLC3纵向表达进行分析发现,MLC3在斑鳜背肌的近头部、中部和近尾部都有表达,近头部和中部的表达量差异不显著,近尾部表达量显著高于近头部和中部.
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- 关键词:斑鳜
- 鳜鱼与鲢鱼肌球蛋白轻链2启动子的克隆及其序列比较分析被引量:4
- 2011年
- 采用PCR方法从鳜鱼(Siniperca chuasti)基因组DNA中分离得到了鳜鱼肌球蛋白轻链2基因启动子序列,其大小为890 bp,包含1个TATA框、3个MEF2结合位点和5个与b HLH转录因子相结合的E-框(CANNTG).用同样的方法从鲢鱼基因组DNA中分离得到鲢鱼肌球蛋白轻链2基因启动子序列,其大小为870bp,包含了1个TATA框、1个MEF2结合位点和3个与bHLH转录因子相结合的E-框.鳜鱼比鲢鱼肌球蛋白轻链2基因启动子转录调控元件更加丰富.
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- 关键词:鳜鱼鲢鱼启动子
- 翘嘴鳜线粒体基因组全序列的克隆与特征分析被引量:2
- 2011年
- 通过直接测序的方法获得翘嘴鳜线粒体DNA基因组全序列(GenBank:JF972568)。翘嘴鳜线粒体基因组全长为16 496 bp,其包含13个编码蛋白基因、22个tRNA基因、2个rRNA基因和1个Control region区域。整个翘嘴鳜线粒体DNA利用率非常高,仅仅只有32 bp的基因间隔和35 bp的基因重叠。翘嘴鳜线粒体的编码蛋白基因具有明显的A+T偏好性,同时整个基因组中G碱基含量非常低,仅有16.2%。翘嘴鳜线粒体基因起始密码子以ATG为主,但终止密码子却呈现多样性。翘嘴鳜22个tRNA基因只有tRNA-leu(UUR、CUN)和tRNA-Ser(UCN、AGY)有2个密码子,22个tRNA按位置可分为3个基因簇(IQM、WANCY、HSL)。翘嘴鳜rRNA的位置和大小与其他鱼类相似,D-Loop区域具有明显的A+T碱基偏好性。翘嘴鳜线粒体全序列的克隆对进一步确定鳜类分类地位和多样性保护具有重要意义。
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- 关键词:翘嘴鳜线粒体基因组密码子偏好性多样性
- 斑鳜肌球蛋白轻链2基因cDNA的克隆及其纵向表达分析被引量:1
- 2011年
- 从斑鳜(Siniperca scherzeri)背部白色肌肉组织中提取总RNA,利用RT-PCR法克隆到斑鳜肌球蛋白轻链2基因(MLC2)(GenBank:GQ283000).斑鳜MLC2基因cDNA序列的开放阅读框的长度为513 bp,编码170个氨基酸,理论相对分子质量为19 105.61 Da,等电点为4.73.该开放阅读框具有4个EF-手相结构.斑鳜MLC2推导的氨基酸序列与已报道的其它6种鱼类MLC2氨基酸序列同源性在89%以上,其中与Ca2+结合的区域非常保守,氨基酸序列同源性为100%.用实时荧光定量PCR对斑鳜MLC2纵向表达分析显示,MLC2在斑鳜背肌的前部、中部和后部都有表达,但无显著差异.
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- 关键词:斑鳜CDNA克隆
- 鳜鱼生肌调节因子MyoD的克隆及其发育表达分析被引量:4
- 2013年
- 生肌调节因子是肌肉形成的关键控制因素.通过RT-PCR方法克隆得到鳜鱼主要生肌调节因子MyoD序列.鳜鱼MyoD基因cDNA长度为813 bp,编码270个氨基酸,推导的氨基酸序列含有1个bHLH结构.经与其他动物MyoD氨基酸序列比对发现不同动物MyoD的bHLH结构域保守性高.通过合成地高辛标记的反义RNA探针对鳜鱼不同发育阶段的胚胎进行整体胚胎原位杂交,结果发现:MyoD最早在肌节早期被检测到信号.伴随着鳜鱼体节从头部往后发育,MyoD也从头部往尾部表达.在体节期,MyoD在中后部表达.尾芽期MyoD的表达量达到最大值.然而,尾芽期过后,头部MyoD的表达量急剧减少,但尾部仍然有强烈的信号.在血流期仍然能在鳜鱼尾部检测到MyoD的微弱信号.到孵出期在鳜鱼鱼眼的后方和胸部腹侧检测到MyoD的强信号,而身体其他地方检测不到信号.仔鱼期没有检测到MyoD表达的信号.
- 李玉珑农小献李虹辉王贝贝刘希良褚武英张建社李琦华
- 关键词:鳜鱼MYOD发育表达
- 翘嘴鳜肌球蛋白轻链3b基因(MLC3b)的分子克隆和特征分析被引量:2
- 2010年
- 翘嘴鳜以其优良肉质性状近期已成为中国极具商品价值和大力推广的人工养殖名贵鱼类之一。为了解其控制优良肉质性状的遗传基础,本文采用同源克隆RT-PCR方法,获得该鱼肌球蛋白轻链MLC3b基因cDNA序列,该基因cDNA序列为453bp,编码150个氨基酸残基,通过PROSITE tools软件预测显示,该轻链具有两个保守的EF-手相结构和一个C-末端保守序列,且该MLC3轻链N端没有高等脊椎动物特有标志序列。MLC3b基因cDNA序列与MLC3a编码区的同源性达97.7%。本研究结果将为名贵鱼类肉质结构基因及功能的研究提供分子生物学基础。
- 农小献赵发兰陈敦学周瑞雪蒙涛成嘉张建社褚武英
- 关键词:翘嘴鳜克隆
- 小清蛋白研究进展被引量:18
- 2011年
- 小清蛋白作为维持细胞内钙离子交换的钙结合蛋白,是脊椎动物体内肌浆蛋白的主要组成部分,在调节细胞内钙离子交换中起重要作用。我们简要综述了小清蛋白的分布、分类、结构和作用机理等,重点介绍小清蛋白在鱼肌肉运动、系统发育和神经组织中的作用以及由小清蛋白引起的过敏反应。
- 农小献宾石玉蒙涛陈敦学刘希良张建社
- 关键词:小清蛋白钙结合蛋白肌肉运动过敏
- 斑鳜肌球蛋白轻链1基因cDNA的克隆及其分析
- 2011年
- 为提取斑鳜肌肉组织的总RNA,应用PCR法扩增肌球蛋白轻链1基因(MLC1)。结果获得斑鳜MLC1(基因库登录序列号为:GQ282999),cDNA序列的全长为579 bp,编码192个氨基酸,理论相对分子质量为20 778.57,等电点为4.51,该序列具有2个EF-手相结构。氨基酸序列比对结果表明,第2个EF-手相结构中的Ca2+结合域非常保守,氨基酸序列同源性为100%。
- 赵发兰宾石玉陈敦学农小献刘希良
- 关键词:斑鳜CDNA克隆