叶宏
- 作品数:21 被引量:45H指数:3
- 供职机构:哈尔滨医科大学公共卫生学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金黑龙江省卫生厅科研项目更多>>
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- 缺氧时15-脂氧化酶在体外牛肺动脉内皮细胞的表达被引量:1
- 2005年
- 目的探讨急性缺氧时,15-脂氧化酶(15-LO)在体外肺动脉内皮细胞的表达部位及程度。方法通过细胞培养,然后牛肺动脉内皮细胞分别缺氧0h、0.5h、1h、2h、3h,在倒置显微镜下观察细胞形态,通过做免疫组化,观察牛肺动脉内皮细胞15-LO的表达情况及表达部位。结果正常情况下,牛肺动脉内皮细胞,倒置显微镜下呈扁平或多角形。通过免疫组化实验可观察到,15-LO在牛肺动脉内皮细胞胞质内有表达,而且在不同缺氧时间均有表达, 15-LO被染成褐色,缺氧0h时胞质内无褐色颗粒。结论缺氧条件下,在体外牛肺动脉内皮细胞15-LO确有表达, 而且随缺氧时间增加,表达增强。
- 金明顺刘慧雯叶宏张翠香单智焱刘东华朱大岭
- 关键词:缺氧肺动脉内皮细胞
- 不同初代分离方法对肠球菌检出率的影响
- 1994年
- 用pH9.6葡萄糖肉汤加6.5%NaCl琼脂和分别单独使用6.5%NaCl琼脂及3%—5%羊血琼脂三种不同培养基,从同一份样品中初代分离肠球菌,初代分离率有显著差别。pH9.6葡萄糖肉汤加6.5%NaCl琼脂分离法可对检样选择性增菌和选择性分离,其检出率明显高于现在普遍使用于肠球菌初代分离的3%—5%血琼脂平板(P<0.05),也高于单纯使用6.5%NaCl琼脂平板(P<0.05);后两者间无显著差别(P>0.05);属中种的构成用不同初代分离方法检出情况也不同。”
- 李蓉叶宏王晋张晶王佰文关承春
- 关键词:肠球菌检出率微生物培养培养基
- 抗病毒1号体外抗呼吸道合胞病毒和腺病毒的药效学研究
- 呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)和腺病毒(adenovirus,Adv)是引起婴幼儿病毒性肺炎的主要病原.目前尚无令人满意的预防和治疗办法.为寻找安全有效的抗呼吸道合胞病毒...
- 叶宏
- 关键词:呼吸道合胞病毒腺病毒药效学
- 15-HETE对肺动脉内皮细胞一氧化氮合酶苏氨酸495位点(eNOS Thr495)磷酸化的影响被引量:2
- 2006年
- 目的:探讨15-羟化二十烷四烯酸(15-HETE)对肺动脉内皮细胞(pu lm anory artery endothelialcells,PAECs)一氧化氮合酶(endothelia n itric oxide synthase,eNOS)活性的影响。方法:通过测定大鼠离体肺动脉环张力,比较去血管内皮、eNOS抑制剂L-NAME对15-HETE收缩肺动脉的影响;通过免疫沉淀和免疫印迹方法测定牛PAECs经2×10-6mol/L 15-HETE作用后,eNOS Thr 495磷酸化情况;用免疫印迹方法测定15-HETE对牛PAECs eNOS总蛋白表达的影响;用G re iss法检测15-HETE及15-脂氧酶(15-LO)抑制剂CDC和NDGA对牛肺动脉内皮细胞一氧化氮(NO)产量的影响。结果:(1)除去肺动脉内皮后,15-HETE收缩血管作用明显增强(P<0.01)。(2)抑制剂L-NAME 10-4mol/L可使15-HETE收缩肺动脉的作用明显增强(P<0.05)。(3)牛PAECs经2×10-6mol/L 15-HETE作用后,eNOS Thr 495位点磷酸化水平增强(P<0.01)。(4)10-6mol/L 15-HETE可抑制亚硝酸盐(NO2-/NO3-)的产生(P<0.05),抑制内源性15-HETE可明显增加NO2-/NO3-的产量,和对照组相比10-5mol/L CDC组P<0.05,10-4mol/L NDGA组P<0.01。结论:肺动脉内皮细胞eNOS/NO通路参与抑制15-HETE收缩大鼠肺动脉,15-HETE抑制肺动脉内皮细胞eNOS活性,使NO产量(NO2-/NO3-)下降。
- 叶宏吕昌莲朱大岭
- 关键词:一氧化氮血管收缩肺动脉内皮细胞一氧化氮合酶
- ERK1/2通路参与15-羟二十碳四烯酸收缩缺氧大鼠肺动脉的过程(英文)被引量:5
- 2005年
- 缺氧诱导的15-羟二十碳四烯酸(15-hydroxyeicosateteraenoic acid,15-HETE)是引起肺动脉收缩的重要介导因子。15- HETE引起肺动脉收缩的信号转导途径尚不清楚。本研究旨在确定细咆外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase-1/2, ERK1/2)信号转导通路是否参与15-HETE收缩缺氧大鼠肺动脉的过程。采用组织浴槽肺动脉环张力检测、蛋白质免疫印迹 (Western blot)和免疫细胞化学方法。制备缺氧大鼠动物模型,成年雄性Wistar大鼠在低氧环境下(吸入氧分数为0.12)正常喂养 9 d。显微分离直径1~1.5mm肺动脉,剪成长为3 mm的动脉环,进行血管张力检测。用ERK1/2 上游激酶(MEK)抑制剂PD98059 抑制ERK1/2活性。结果显示,PD98059可明显抑制15-HETE对缺氧大鼠肺动脉环的收缩作用。在去除内皮的肺动脉环, PD98059仍可明显降低15-HETE的缩血管作用。Western blot和免疫细胞化学结果都显示,15-HETE能促进ERK1/2磷酸化。 由此表明ERK1/2信号转导通路参与15-HETE收缩缺氧大鼠肺动脉的过程。
- 吕昌莲叶宏唐晓波朱大岭
- 关键词:缺氧细胞外信号调节激酶
- 15-羟二十碳四烯酸下调肺动脉内皮型一氧化氮合酶的活性(英文)被引量:2
- 2005年
- 15-羟二十碳四烯酸(15-hydroxyeicosatetraenoic acid,15-HETE)在低氧性肺血管收缩中起着重要作用,低氧肺动脉高压 下调内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS),使一氧化氮(nitric oxide,NO)的产量下降,但目前尚无关 于15-HETE与eNOS/NO相互作用研究的报道。我们通过Wistar大鼠肺动脉环张力、牛肺动脉内皮细胞NO产量、总eNOS 表达及eNOS磷酸化测定等方法对15-HETE与eNOS/NO的相互作用进行研究。首先分离大鼠肺动脉,分为eNOS抑制剂L- NAME组(0.1 mmol/L)、去血管内皮组与内皮完整组,用15-HETE作用大鼠离体肺动脉环,测定肺动脉张力。结果表明, L-NAME组、去除内皮组与内皮完整组分别比较,15-HETE对血管的收缩作用增强,且都有统计学意义(P<0.05)。培养牛肺 动脉内皮细胞,分别用15-HETE、15-脂氧酶(15-lipoxygenase,15-LO)抑制剂[(cinnamyl 3,4-dihydroxy-[alpha]-cyanocinnamate, CDC)利(nordihydroguiairetic acid,NDGA)]处理细胞,通过Greiss方法检测亚硝酸盐含量,间接测定NO产量,与对照组比较, 1 μmol/L 15-HETE 明显降低肺动脉内皮细胞NO水平(P<0.05), 10 μmol/L CDC和0.1 mmol/L NDGA显著增加NO水平(分别 是P<0.05,P<0.01);通过Western blot检测不同时间(5,10,15,20,30,60 min)eNOS的表达情况,结果显示,15- HETE的小同作用时间,没有引起eNOS表达的明显不同;用苏氨酸495位点磷酸化eNOS(Thr495)抗体进行免疫沉淀,再用 总eNOS抗体和15-LO抗体通过Western blot检测磷酸化型含量,间接测定eNOS活性,结果表明15-HETE增强Thr495磷酸 化型eNOS含量。由于Thr495为eNOS抑制性磷酸化位点,因此15-HETE降低eNOS活性。这些数据表明;15-HETE的缩 血管作用有eNOS/NO参与,15-HETE可以通过磷酸化Thr495位点降低eNOS活性,并且首次发现磷酸化eNOS(Thr495)和15- LO之间存在蛋白质相互作用。
- 叶宏毕海荣吕昌莲唐晓波朱大岭
- 关键词:肺动脉收缩内皮细胞内皮型一氧化氮合酶
- 抗病毒1号中药在Hela细胞中对呼吸道合胞病毒的抑制作用被引量:1
- 2001年
- 为了解抗病毒1号单味中草药对呼吸道合胞病毒的抑制作用,本研究采用细胞培养技术,以病毒唑为阳性对照药,观察抗病毒1号对呼吸道合胞病毒的抑制作用。结果表明,抗病毒1号和病毒唑的半数中毒浓度(TC_(50))分别为13.9mg/ml、76.43ug/ml;其抗呼吸道合胞病毒的半数有效浓度(EC_(50))分别为0.827mg/ml、5.672ug/ml,TI分别为16.81、13.47;抗病毒1号对呼吸道合胞病毒的抑制作用存在着明显的量效关系(P<0.01)。
- 刘密凤李洪源叶宏刘电力周昆佟奎明
- 关键词:呼吸道合胞病毒抗病毒作用中医药治疗HELA细胞
- 15-羟基二十碳四烯酸(15-HETE)对肺动脉血管内皮细胞eNOS的作用
- 慢性缺氧时出现的肺血管收缩(HPV)是机体保证血气交换的一种重要调节方式,机理复杂,至今尚不完全清楚。
本文对15-HETE对eNOS/NO通路的作用进行了探索性研究。文章通过动物实验,用Greiss法检测15...
- 叶宏
- 关键词:肺血管收缩脂氧酶一氧化氮合酶动脉内皮细胞
- 文献传递
- 肺动脉内皮细胞eNOS/NO通路对15-HETE收缩大鼠肺动脉的影响
- 目的:在肺动脉中,115-羟化二十烷四烯酸(15-HETE)是花生四烯酸代谢产物,具有血管活性。慢性缺氧条件下,主要产生于新生免肺动脉内皮细胞,增加肺动脉收缩,提示15-HETE是一种调节缺氧肺动脉收缩(HPV)的重要因...
- 叶宏吕昌莲朱大岭
- 抗病毒1号中药在鸡胚中对流感病毒的抑制作用被引量:24
- 2000年
- 目的 开发安全有效的抗流感病毒新药。方法 采用鸡胚实验技术观察抗病毒 1号中药对流感病毒的抑制作用。结果 抗病毒 1号最大无毒剂量大于 72 0mg/胚 ;36 0、2 40mg/胚剂量组对流感病毒A3 有显著的抑制作用(P <0 .0 5 ) ,半数有效量 (ED50 )为 130 .6 4mg/胚 ,95 %可信区间为 10 2 .13~ 16 7.11mg/胚 ,治疗指数 (TI)大于 5 .5 ;36 0、2 40、16 0、10 6 6mg/胚剂量组对流感病毒B有显著的抑制作用 (P <0 .0 5 ) ,ED50 为 6 8.2 8mg/胚 ,95 %可信区间为 5 7.37~ 81.2 7mg/胚 ,TI大于 10 5 ;病毒唑各治疗组均未见明显作用 (P >0 .0 5 )。结论 抗病毒 1号在鸡胚中对流感病毒有显著的抑制作用。
- 杨怡姝刘电力叶宏李洪源佟奎明周昆
- 关键词:流感病毒抗病毒作用中药鸡胚