周厚君
- 作品数：16 被引量：44H指数：4
- 供职机构：中国林业科学研究院林业研究所国家林业局林木培育重点实验室更多>>
- 发文基金：浙江省重大科技专项基金浙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 杨树次生壁纤维素合酶的表达与互作模式分析被引量：6
- 2017年
- [目的]纤维素的合成在木材形成过程中具有重要的作用,纤维素合酶(Cellulose Synthase,CESA)是参与纤维素合成的关键酶。由于3种CESA形成一个有功能的纤维素合酶复合体,而杨树中包含CESA4、CESA7A、CESA7B、CESA8A和CESA8B5种次生壁CESA,本文从这5种CESA的表达模式与互作分析入手,探讨了其在次生壁纤维素合成中的工作模式。[方法]利用RNA-seq与基因芯片数据进行基因表达分析,揭示5种次生壁CESA在根、茎、叶组织的表达模式与次生维管再生过程中的表达变化。利用启动子驱动的GUS转基因材料GUS染色分析与实时定量PCR揭示5种次生壁CESA在各个组织的表达模式与在激素处理下的响应模式。利用荧光素酶互补实验揭示CESA7A、CESA7B、CESA8A与CESA8B之间的互作模式。[结果]基因表达分析表明,杨树5种次生壁CESA基因在杨树成熟茎中高表达,尤其在次生维管组织发育的后期高表达,表明其主要参与木材次生壁纤维素的合成。对启动子驱动的GUS转基因材料观察表明,CESA4、CESA7B、CESA8A和CESA8B的GUS信号在杨树茎和叶中较强,但这些次生壁CESA的表达模式存在一定的差异,这种差异在叶脉中表现地尤为明显。此外,在赤霉素GA3和细胞分裂素6-BA处理下,杨树次生壁CESA的表达量显著上调;在生长素NAA、油菜素内酯BR和乙烯处理下,杨树次生壁CESA的表达量下调,但不同的CESA对激素响应的表达量变化幅度存在差异。荧光素酶互补实验表明,杨树次生壁CESA7B和CESA8B、CESA7B和CESA8A、CESA7A与CESA8B之间存在互作,说明它们之间可以形成复合体。[结论]这些数据显示杨树5种次生壁CESA基因在不同组织与不同激素处理下的表达变化存在一定的差异,而它们之间均能互作,提示杨树5个次生壁CESA基因虽然具有同等的能力形成功能性的纤维素合酶复合体,但在不同组织、不同激素作用下可能有不同的组合方式,进而会导致
- 魏凯莉周厚君江成赵岩秋宋学勤卢孟柱
- 关键词：次生壁激素杨树
- 光皮桦茎叶cDNA文库构建及部分EST序列SSR分析
- 以光皮桦茎叶组织为材料,构建了cDNA文库.初级文库滴度为1.5x106pfu·mL-1,重组率达97.3％,插入片段大小在0.5-3.0kb之间,平均长度约为1.3kb,表明所构建的文库质量较高,可用于后续基...
- 张敏黄华宏林二培周厚君王亚辉童再康
- 关键词：光皮桦CDNA文库SSR分析
- 光皮桦成花相关MADS-box基因BlMADS1的克隆与表达被引量：3
- 2015年
- MADS-box家族基因广泛分布于植物中,在花发育过程中起着重要调控作用。采用同源克隆结合c DNA末端快速扩增技术(RACE)在光皮桦Betula luminifera中克隆到1个MADS-box基因,命名为Bl MADS1。该基因可能存在2个不同的转录本Bl MADS1S和Bl MADS1L:前者为1 150 bp,编码254个氨基酸,具有MADS-box基因的典型结构,与欧洲白桦Betula pendula的同源基因相似性最高(97%);后者长1 312 bp,但仅含有690 bp的开放阅读框(ORF),编码229个氨基酸,缺失MADS-box蛋白的C端。这种缺失可能由内含子可变剪切造成。同源比对和系统进化分析表明:Bl MADS1属于AP1/SQUA亚家族的AGL79这一分支。定量聚合酶链式反应(PCR)表达分析表明:Bl MADS1基因在根、茎、叶和花器官中均有表达,但Bl MADS1S和Bl MADS1L这2个转录本表达模式存在差异。雄花序发育过程中,Bl MADS1的2个转录本的表达峰值均在萌动雄花序时期;而在雌花序发育过程中,Bl MADS1L和Bl MADS1S表达水平的峰值分别出现在初生雌花芽和萌动雌花序。
- 赵传慧周厚君童再康林二培黄华宏牛明月
- 关键词：林木育种学光皮桦开花MADS-BOX
- 光皮桦LFY同源基因的克隆及表达分析被引量：2
- 2015年
- 以珍贵用材树种光皮桦(Betula luminifera)为材料,采用同源克隆与RACE的方法,克隆获得LFY同源基因,命名为Bl LFY(Gen Bank号:KP970616)。Bl LFY基因c DNA全长1 305 bp,开放阅读框(ORF)长1 212 bp,编码403个氨基酸。基因结构分析显示,Bl LFY基因具有2个内含子和3个外显子,与其它植物同源基因具有一致的基因结构。多序列比对和系统进化分析表明,Bl LFY基因编码蛋白具有典型的N-domain和C-domain,与板栗(Castanea mollissima)及核桃(Juglans regia)等木本植物的LFY具有最高的同源性和进化关系。进一步的表达模式分析结果表明,Bl LFY基因在光皮桦植株进入成年期时表达水平最高,在开花植株的营养器官和生殖器官中均有表达,且贯穿雌、雄花序发育的整个过程,但在雌花序中的表达明显高于雄花序,说明Bl LFY基因可能与花期转换和花器官的发育有关,但在雌、雄花序发育过程中的调控作用可能不同。
- 牛明月周厚君周世水李玉岭黄华宏童再康林二培
- 关键词：光皮桦LFY开花
- 光皮桦ACC氧化酶基因BlACO的克隆和表达分析被引量：4
- 2010年
- ACC(1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid)氧化酶(ACO)是植物乙烯合成过程中的关键限速酶,对乙烯的合成具有重要的调控作用。以光皮桦茎叶组织提取的RNA为模板,据已报道的ACO同源序列设计简并引物,通过RT-PCR扩增获得部分基因片段,结合5',3'RACE方法从光皮桦中扩增出1个ACO的全长cDNA序列。该基因cDNA全长1262bp,具有一个957bp的完整开放阅读框架,编码含318个氨基酸的蛋白。与其他植物中的ACO基因进行同源性比对的结果显示,BlACO蛋白与欧洲白桦的同源性最高,达到97%。该基因在光皮桦的雄花和雌花中表达量较高,而在茎中的表达量较低。
- 周厚君黄华宏林二培程龙军彭沙沙童再康
- 关键词：光皮桦ACO基因克隆
- 光皮桦茎叶cDNA文库构建及部分EST序列SSR分析被引量：2
- 2012年
- 以光皮桦茎叶组织为材料,构建了cDNA文库。初级文库滴度为1.5×106pfu/mL,重组率达97.3%,插入片段大小在0.5～3.0kb之间,平均长度约为1.3kb,表明所构建的文库质量较高,可用于后续基因克隆及基因表达谱的研究。利用微卫星查找软件对获得的224条EST序列进行微卫星位点搜寻及其丰度、分布比较,发现47条序列含微卫星位点60个,占全部EST序列的26.80%;在所有SSRs中二碱基重复最多,为42个,占总数的70.00%,含三、四碱基重复分别占总数的28.30%和1.70%。通过对光皮桦EST序列中微卫星位点信息的发掘分析,为有针对性地设计EST-SSR引物、进行遗传多样性分析奠定了基础。
- 张敏黄华宏林二培周厚君王亚辉童再康
- 关键词：光皮桦CDNA文库SSR分析
- 光皮桦SPL1转录因子的克隆、表达及单核苷酸多态性分析
- Squamosa promoter binding protein like genes(SPLs)在植物的发育中具有重要的调控作用.本研究基于转录组序列利用RACE技术从光皮桦中分离获得BlSPL1基因,其cDNA序列...
- 李玉岭林二培黄华宏周厚君徐莉莉童再康
- 关键词：光皮桦转录因子
- 光皮桦BlSPL1转录因子基因的克隆、表达及单核苷酸多态性分析被引量：6
- 2013年
- Squamosa promoter binding protein like genes(SPLs)对植物开花具有重要的调控作用。基于转录组序列并利用RACE技术从光皮桦中分离获得BlSPL1基因,其cDNA序列全长1 825 bp,包含开放阅读框长1 170 bp,编码389个氨基酸,与桃PpSPL1(EMJ10405)的同源性最高(67%),属于陆地植物SPLs基因家族的group VII分支。表达分析显示BlSPL1在光皮桦芽、雌花、雄花、幼苗中均有表达,在雄花和幼苗中表达量较低,但在芽发育成雌花过程中明显上调,推测其可能对早期的雌花形成起调控作用。同时,从57个不同的光皮桦无性系中克隆BlSPL1的基因组序列,进行单核苷酸多态性(SNP)分析,共检测到98个SNP位点,SNP频率为1/26 bp,多样性指数π为0.007 12。在外显子区域,共检测到28个SNP位点,其中11个为同义突变,17个为错义突变。进一步的连锁不平衡分析显示,随着序列长度的增加,不同光皮桦群体BlSPL1内的SNPs连锁不平衡在基因内部迅速衰退。
- 李玉岭周厚君林二培黄华宏徐莉莉童再康
- 关键词：光皮桦转录因子单核苷酸多态性
- 濒危植物伯乐树遗传多样性的初步研究被引量：13
- 2011年
- 利用ISSR和RAPD分子标记技术对23份伯乐树材料进行遗传多样性研究。结果表明,筛选出的13条ISSR和10条RAPD引物分别得到79条和57条扩增带,其中多态性条带分别为50条和33条,多态性条带比率分别为63.29%和57.89%;ISSR和RAPD检测的有效等位基因数分别为1.4036和1.3601,基因多样性为0.2305和0.2115,Shannon信息指数为0.3405和0.3145;分析表明23份伯乐树之间具有比较丰富的遗传变异。对比ISSR和RAPD在PCR反应中的稳定性和检测变异的能力表明,对于试验条件的稳定性而言,ISSR优于RAPD,且总的来说ISSR能检测到比RAPD更多的遗传变异。另外,本研究推断人类活动的干扰和生境的片断化是导致伯乐树濒危现状的主要因素之一。
- 彭沙沙黄华宏童再康周厚君时剑余国民骆文坚
- 关键词：伯乐树RAPDISSR
- 光皮桦BlSPL1转录因子基因的克隆、表达及单核苷酸多态性分析
- uamosa promoter binding protein like genes(SPLs)对植物开花具有重要的调控作用.基于转录组序列并利用RACE 技术从光皮桦中分离获得BlSPL1基因,其cDNA序列全长182...
- 李玉岭周厚君林二培黄华宏徐莉莉童再康
- 关键词：光皮桦单核苷酸多态性
