周畅
- 作品数：30 被引量：85H指数：5
- 供职机构：青岛大学医学院附属医院更多>>
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- 人骨髓间质干细胞经心脏移植治疗超氧化物歧化酶1-G93A转基因鼠的疗效被引量：1
- 2010年
- 目的研究经心脏移植人骨髓间质干细胞（hMSCs）对肌萎缩侧索硬化（ALs）模型鼠发病时间、生存期和病理的影响。方法体外培养扩增hMSCs，流式细胞仪鉴定其性质及纯度。将3×10。个第5代hMSCs经心脏移植入预放疗的8周龄超氧化物歧化酶1（SOD1）-G93A转基因鼠，用Weyd4分法评定移植鼠和未治疗鼠的生存期、发病时间，采取尼氏染色计数脊髓前角运动神经元，通过免疫荧光检测人特异性核抗原验证hMSCs在受体鼠中枢神经系统中的植入。结果生存分析显示，经心脏移植hMSCs的ALS模型鼠平均发病时间为（172．85±5．82）d，比未治疗组[（156．56±3．60）d]延迟16d，差异有统计学意义（χ2=10．888，P=0．001）；hMSCs经心脏移植组平均生存期为（202．19±d．09）d，比未治疗组[（188．32±3．51）d]延长14d，差异有统计学意义（χ2=3．917，P=0．04）。尼氏染色显示在20周时移植鼠脊髓前角大运动神经元计数多于未治疗鼠；终末期hMSCs移植鼠中，在脑和脊髓前角病变区可检测到人特异性核抗原。结论hMSCs可经心脏移植，在ALS模型鼠中可长期植入，延长生存期，延缓脊髓前角运动神经元的丢失。
- 赵翠萍张成王益华周畅李婉仪
- 关键词：肌萎缩侧索硬化间质干细胞移植超氧化物歧化酶
- 脑脊液内移植小鼠骨髓基质细胞对铜锌超氧化物歧化酶1转基因小鼠的作用被引量：1
- 2013年
- 目的研究脑脊液内移植小鼠骨髓基质细胞（mouse marrow stromal cells，mMSCs）对铜锌超氧化物歧化酶1（Cu／Zn superoxide dismutase 1，SOD1）转基因小鼠的作用。方法将5×10^5个mMSCs经枕大池单次移植（8周龄时）或多次移植（8、10和12周龄时）到SOD1转基因小鼠的脑脊液中。通过临床观察、体重、悬线实验和运动神经元计数来评估小鼠的疾病进展。结果单次移植mMSCs对SOD1转基因小鼠没有明显有益的作用；与对照组SOD1转基因小鼠相比，多次移植mMSCs则能够减轻体重的丢失，改善运动行为，保护运动神经元，更重要的是还能够将SOD1小鼠的存活时间延长17d[（157±15）d与（140±11）d；X^2=7．56，P〈0．01]。结论我们认为鞘内移植可能是一种有前景的细胞移植途径，且多次移植mMSCs对于SOD1小鼠的治疗作用是十分必要的。
- 周畅张晨赵翠萍王岩刘贤张成
- 关键词：肌萎缩侧索硬化骨髓移植细胞移植超氧化物歧化酶小鼠转基因
- ALOX5AP基因多态性与动脉粥样硬化性脑梗死相关性被引量：5
- 2013年
- 目的探讨5-脂氧合酶激活蛋白（ALOX5AP）基因多态性与动脉粥样硬化性脑梗死（ACI）的相关性。方法应用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）分析法，检测412例ACI病人和472例性别、年龄与ACI病人相匹配的健康人群ALOX5AP基因（SGl3S114、SGl3S89、SGl3S32）多态性。结果病例组和对照组相比，SGl3S114位点等位基因T和基因型TT／TA分布差异具有统计学意义（x^2=21．63、10．99，P〈O．01）。应用多因素Logistic回归方法排除传统危险因素的影响后，携带SGl3S114TT／TA基因型和SG13S32CC／CA基因型的人群ACI发病风险分别是携带AA基因型人群的2．35倍（OR=2．35，95％CI=1．46～3．78，P〈0．01）和1．43倍（OR=1．43，95％CI=1．02～2．01，P〈O．05）。经传统危险因素糖尿病分层后，SGl3S32CC／CA基因型能够明显增加糖尿病人群患ACI的风险（OR=3．27，95％CI=1．55～6．88，P〈o．01）。单倍型TGC作为一种危险单倍型（OR=1．46，95％CI=1．17～1．82，P〈0．01）可以增加ACI的发病风险。结论ALOX5AP基因多态性与ACI的发生密切相关，且该基因可明显增加糖尿病人群ACI的发病风险。
- 姚倩倩周畅刘丽君袁荣荣张晨
- 关键词：动脉粥样硬化脑梗死多态性单核苷酸白三烯类
- 白细胞介素-1基因多态性与缺血性脑卒中相关性被引量：4
- 2012年
- 目的探讨白细胞介素(IL)-1α-889C/T和IL-1β-511C/T基因多态性与缺血性脑卒中(IS)的相关性。方法采用病例对照研究,对440例IS病人和486例对照人群应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性的方法检测IL-1α-889C/T和IL-1β-511C/T两个位点基因多态性。比较两组基因型及等位基因分布频率。用Logistic回归方法调整传统危险因素后分析基因多态性与IS发病的相关性。结果 IS组及大动脉粥样硬化型亚组IL-1α-889C/T基因型分布及等位基因频率与对照组比较差异具有显著性(χ2=7.623～14.152,P<0.05)。IS组及其亚组IL-1β-551C/T基因型及IL-1β-511T等位基因的分布频率与对照组比较差异无显著性。IL-1α-889TT基因型与IS的发病具有相关性,是IS的重要危险因素(OR=1.304,P<0.01)。结论 IL-1α-889C/T基因多态性可能增加IS的发病风险,IL-1β-511C/T基因多态性可能与IS的发病无关。
- 宋博李聪孙蕾周畅王海萍张晨
- 关键词：脑血管意外白细胞介素1多态性单核苷酸
- 不同基因载体转导人骨髓间充质干细胞比较
- 2008年
- 目的比较腺病毒载体、腺相关病毒载体、杆状病毒载体和质粒载体对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)的转导效率。方法体外原代培养hBMSCs,进行腺病毒载体、腺相关病毒载体、杆状病毒载体和质粒载体转染实验。采用倒置荧光显微镜及流式细胞仪检测经基因载体转染后的hBMSCs胞内目的蛋白表达情况。结果倒置荧光显微镜观察结果显示,基因载体转染后的部分hBMSCs胞内有GFP表达而发绿色荧光,其中杆状病毒转导的hBMSCs荧光强度较强。流式细胞仪检测结果表明,腺病毒载体、腺相关病毒载体及质粒载体的转导效率和绿色荧光蛋白阳性细胞平均荧光强度分别是42%、37%、22%和158、115、77,均明显低于杆状病毒的70%(P<0.01)和212(P<0.05)。结论杆状病毒载体对hBMSCs的转导效率高于腺病毒载体、腺相关病毒载体和质粒载体,有望成为人体基因治疗研究中更为理想的基因载体。
- 刘正山张成尚延昌熊符冯善伟李勇许勇峰周畅
- 关键词：杆状病毒基因载体转导人骨髓间充质干细胞
- pVAX1-microdystrophin重组质粒的构建及其治疗Duchenne型肌营养不良症的初步研究被引量：2
- 2008年
- 目的构建含有人microdystmphin基因的重组质粒，体内、外研究其表达，为进一步应用此重组质粒来研究电转、静脉、动脉注射或加入其它基因来增强microdystrophin基因的表达等方法对Duchenne型肌营养不良（Duchennen musculardystrophy，OMD）进行基因治疗奠定基础。方法用NotI酶切含microdys—trophin基因的pBSK-MICRO质粒，获得microdystrophin基因。片段回收后定向插入真核表达质粒pVhX1，获得重组质粒pAMICDYS。然后将重组质粒pAMICDYS转染小鼠成纤维细胞3T3细胞，通过逆转录-PCR以及间接免疫荧光检测microdystmphin的转录及蛋白表达；最后将重组质粒pAMICDYS通过肌肉注射到DMD模型鼠胫前肌中，检测治疗肌肉的病理变化和microdystrophin的表达情况。结果成功构建了含有microdys—troth基因的重组质粒，并在体外得到了很好表达，体内研究表明microdystrophin基因在mdx鼠TA也有一定程度的表达，而且减少了所治疗肌肉的核中移数量，证实了其对mdx鼠有一定的治疗作用。结论该重组质粒的构建及体内、外得到成功表达，为下一步用该质粒进行电转、静脉、动脉注射或加入其它基因来增强microdystrophin基因的表达来治疗DMD疾病奠定了基础。
- 熊符张成郑卉肖少波于美娟许勇峰刘正山周畅
- 关键词：重组质粒DUCHENNE型肌营养不良症
- LTA4H基因多态性及吸烟对动脉粥样硬化型脑梗死发生影响被引量：1
- 2014年
- 目的探讨白三烯A4水解酶（LTA4H）基因多态性及吸烟对动脉粥样硬化型脑梗死（ACI）发生的影响。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法,对450例ACI病人和400例非脑卒中者进行LTA4Hrs6538697T/C位点基因型检测。采用Logistic回归分析该位点多态性与ACI发病风险的相关性,以及基因多态性与吸烟共同作用对ACI发生的影响。结果经Logistic回归方法排除脑卒中的传统危险因素影响后,LTA4Hrs6538697C等位基因携带者ACI易感性是非携带者的1.34倍（OR=1.34,95%CI=1.010-1.786,P〈0.05）,吸烟者ACI的发病风险是非吸烟者的1.97倍（OR=1.97,95%CI=1.306-2.733,P〈0.05）,携带LTA4Hrs6538697C等位基因同时为吸烟者的人群患ACI风险是非携带C等位基因吸烟人群的3.07倍（OR=3.07,95%CI=1.489-6.340,P〈0.05）。结论 LTA4Hrs6538697C等位基因的高表达可增加ACI的发病风险,LTA4Hrs6538697基因多态性与吸烟在ACI的发生中存在协同作用。
- 袁荣荣张宏陈静周畅姚倩倩张晨
- 关键词：脑血管意外吸烟
- 神经梅毒26例磁共振成像表现被引量：17
- 2008年
- 目的 分析不同临床类型神经梅毒的MRI表现。方法 回顾性研究26例神经梅毒患者的临床及MRI资料，描述各种临床类型神经梅毒的MRI表现。结果26例神经梅毒患者中，17例MRI有异常表现。其中脑膜血管型梅毒7例，主要表现为脑部多发的缺血灶、梗死灶，少数表现为脑炎样改变；麻痹性痴呆6例，主要表现为额、颞叶萎缩，少数伴有脑缺血灶、颗粒性室管膜炎及海马硬化；脊髓膜血管梅毒3例，主要表现为下颈段至下胸段脊髓轻度肿胀，其内可见多发的缺血灶；脊髓痨1例，其脑部MRI表现为缺血灶。9例患者MRI表现正常，其中脑膜型梅毒4例，脊髓痨5例。结论 不同临床类型神经梅毒的MRI表现具有一定特征，但缺乏特异性，临床上容易误诊。
- 周畅邓德茂张晨许勇峰刘正山罗伯宁张成孟悛非
- 关键词：神经梅毒磁共振成像MRI表现麻痹性痴呆
- 骨髓基质细胞对SOD1转基因小鼠的作用及机制探讨被引量：1
- 2013年
- 目的研究脑脊液内移植小鼠骨髓基质细胞（MSCs）对铜锌超氧化物歧化酶1（SODI）转基因小鼠的作用及机制。方法将5×10^5MSCs经枕大池移植（8、10和12周龄时）到SODl转基因小鼠的脑脊液中。通过悬线试验和运动神经元计数来评估小鼠的疾病进展。应用免疫荧光染色观察15周龄SODl小鼠脊髓前角胶质细胞的活化。应用反转录一聚合酶反应检测MSCs神经营养因子mRNA的表达。结果鞘内移植MSCs能够改善SODl小鼠的运动行为，并保护运动神经元。MSCs鞘内移植明显减轻SODl小鼠脊髓前角小胶质细胞（52±7比38±7；F=69．3，P=0．02）和星形胶质细胞（79±9比63±9；F=40．7，P=0．03）的活化。另外，在炎症环境中，MSCs神经生长因子mRNA的表达明显增多（P〈0．05）。结论鞘内移植MSCs对SODl转基因小鼠有治疗作用，可能与减轻神经炎症和分泌神经生长因子发挥了神经保护作用有关。
- 周畅张晨姚倩倩赵翠萍张成
- 关键词：肌萎缩侧索硬化骨髓基质细胞细胞移植胶质细胞
- 磷酸二酯酶4D基因多态性与缺血性脑卒中的相关性被引量：2
- 2012年
- 目的探讨中国汉族人群磷酸二酯酶4D(PDE4D)基因多态性与缺血性脑卒中(IS)的相关性。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法检测440例IS病人和486例健康对照者PDE4D基因单核苷酸多态性(SNP)83和SNP87位点的突变情况,用Logistic回归分析去除混杂因素的影响,比较两组间基因型分布及等位基因频率的差异。结果两组SNP83基因型分布差异有显著性(χ2=8.293,P<0.05),IS组C等位基因频率明显高于对照组(χ2=8.386,P<0.05)。两组SNP87基因型分布差异无显著性(χ2=4.716,P>0.05),IS组T等位基因频率与对照组比较差异无显著性(χ2=2.300,P>0.05)。结论中国汉族人群中,PDE4D基因SNP83可能与IS的发病有关,C等位基因可能是IS的危险因素。
- 李聪宋博孙蕾周畅王海萍张晨
- 关键词：脑缺血脑血管意外多态性单核苷酸
