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组合式荧光定量PT-PCR快速检测禽流感H7N9核酸的试剂盒研发与应用: 张舟听傅纪波王忠发夏文英刘妙翁瑛瑛; 该研究所采用实时荧光PCR技术经过20年的开发，已经相当成熟，具有反应快速、重复性好、灵敏度高、特异性强、结果清晰等优点，且试剂成本低廉。被广泛应用于基础科学研究、临床诊断、疾病研究及药物研发等领域。该试剂盒从2013年...; 关键词：; 关键词：禽流感病毒

实时荧光定量RT—PCR快速检测H7N9禽流感病毒被引量：5: 2014年; 目的构建一种灵敏、特异、快速的实时荧光定量RT—PCR反应体系用于临床H7N9禽流感疑似病例早期诊断及外环境H7N9病毒的监测。方法以H7N9禽流感病毒H7基因和N9基因为靶基因设计引物以及TaqMan探针，并对引物、探针及反应条件进行优化，验证该反应体系检测的特异性、灵敏度、重复性和检测速度，然后与两种商品化试剂盒（试剂盒I和试剂盒Ⅱ）进行各项指标及184份现场样本作平行比对。结果新建立的H7N9禽流感病毒实时荧光定量RT-PCR反应体系呈典型的扩增曲线、扩增时间约50min，H7基因与N9基因的最低检出限分别为28拷贝／μL与41拷贝／μL。重复性测定显示，H7和N9检测Ct值的变异系数（CV）分别为0．17％～0．89％和0．33％～0．59％，扩增效率分别为0．9491和0．9713；与其他常见禽流感病毒或肠道病毒无明显交叉反应。184份现场可疑样本阳性检出率为5．43％（10／184），与试剂盒Ⅱ结果一致。结论本研究建立的实时荧光定量RT—PCR反应体系具有检测速度快、灵敏度高、特异性强、重复性好、结果可靠等特点，可用于临床疑似病例的应急检测、早期诊断及养鸡场、活禽交易市场等外环境H7N9禽流感病毒监测。; 张舟听夏文英王忠发刘妙翁瑛瑛; 关键词：禽流感 RT-PCR

舟山市3例发热伴血小板减少综合征的病原学与遗传特征被引量：2: 2014年; 目的对舟山市3例疑似发热伴血小板减少综合征（SFTS）病例进行病原学鉴定、确诊，并分析其遗传特征。方法选用巢式RT-PCR测定新布尼亚病毒核酸及L、M、S3个特异性基因，并对基因扩增产物进行测序，测序结果与GenBank上公布的序列进行比对确认。用DNAStar软件构建进化树与序列距离表。用间接免疫荧光法测定患者恢复期和急性期血清新布尼亚病毒IgG抗体滴度。结果3例SFTS患者急性期血清中均能检测到新布尼亚病毒的3个特异性基因片段，其中S基因核苷酸序列与舟山市同类基因核苷酸序列的同源性在9414％～100．0％，患者恢复期血清病毒抗体滴度较急性期增高4倍以上。结论经过病原学鉴定，3例临床疑似患者确诊为发热伴血小板减少综合征的新近感染病例。舟山市新布尼亚病毒的遗传特征比较稳定。; 傅纪波李世波王忠发夏文英张舟听; 关键词：布尼亚病毒科感染发热伴血小板减少综合征病原学鉴定

一起由2种致泻性大肠埃希菌所致食物中毒的病原学鉴定被引量：2: 2021年; 目的查明引起食物中毒病原菌,为明确食物中毒诊断提供依据。方法收集食物中毒患者及厨师肛拭样本、厨房炊具及操作台样本、饮用水样本进行病原菌致泻性大肠埃希菌(DEC)、沙门菌和霍乱弧菌的分离检测;DEC毒力基因检测采用PCR鉴定;黏附性检测采用Hep-2细胞黏附方法。结果食物中毒患者主要症状为腹痛、腹泻伴发热。从19份标本(患者肛拭样本12份,厨师肛拭样本4份,厨房炊具及操作台样本2份,饮用水样本1份)中检出7株D EC,肠道聚集性致泻大肠埃希菌(EAEC)6株,致病性大肠埃希菌(EPEC)1株,其中1患者同时检出2种食物中毒病原菌,检出率为31.58%,2厨师标本检出EAEC。结论综合流行病学调查、临床症状和实验室检测,确定本起食物中毒为2种致泻大肠埃希菌所致。; 刘妙夏文英徐景野许小敏; 关键词：食物中毒致泻性大肠埃希菌毒力基因

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夏文英