孙志杰
- 作品数：9 被引量：9H指数：2
- 供职机构：中国科学院大连化学物理研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 微囊微环境体外扩增人脐血造血干/祖细胞
- 2009年
- 背景:由于单份脐血所含的造血细胞数量有限,目前只能用于儿童或低体质量成人血液病和急性辐射损伤等疾病患者,有效扩增脐血造血干/祖细胞已成为研究热点。目的:观察微囊微环境对脐血造血干/祖细胞扩增的影响,以及此过程中可否使造血干/祖细胞在扩增的同时仍维持其未分化状态。设计、时间及地点:单一样本观察,于2006-06/2007-09在中国科学院大连化学物理研究所完成。材料:正常足月产新生儿脐带血由大连市妇产医院提供,提供者知情同意。方法:Ficoll法梯度分离人脐血单个核细胞,采用静电液滴法在生理条件下进行微囊化包封和体外培养。以同条件平面培养的脐血单个核细胞作为对照。主要观察指标:观察微囊化脐血细胞的生长特点及脐血细胞总数的变化;流式细胞仪检测培养过程中CD34+细胞扩增情况;应用甲基纤维素半固体培养法观察扩增细胞的集落形成能力。结果:脐血细胞在微胶囊内持续增殖,并以聚集成团的三维方式生长,两种培养方式对脐血细胞总数均无明显影响(P>0.05)。对比CD34+细胞扩增和细胞集落的生成发现,微囊化培养脐血细胞的CD34+细胞数量和集落密度均在培养第6天达到高峰,明显高于平面培养3d时所达到的峰值;之后逐渐下降,至12d后平面培养细胞的CD34+细胞和集落形成能力几乎检测不到,而此时微囊化培养的CD34+细胞数量和集落密度仍与平面培养的扩增高峰相近。结论:微囊化培养能有效扩增人脐血造血干/祖细胞,并显著减缓造血干/祖细胞的分化进程,维持其多分化潜能,提示微囊为造血干/祖细胞维持未分化状态的扩增提供了特殊的微环境。
- 李双月王华郭昕孙志杰吕国军王为马小军
- 关键词：造血干祖细胞扩增微胶囊微环境脐血
- 一种微生物的固定化方法
- 本发明涉及微生物固定化，其以重悬微生物的海藻酸钠溶液和纳米碳酸钙为分散相，液体石蜡或植物油为分散介质，Span85为表面活性剂，通过搅拌乳化形成液滴，再以冰醋酸为凝胶引发剂制备包埋有微生物的海藻酸钙凝胶珠，该凝胶珠与壳聚...
- 马小军林军章于炜婷孙志杰吕国军
- 文献传递
- 牛磺酸对微囊化肝细胞生长的影响被引量：1
- 2008年
- 目的:微胶囊中存在一定程度的高渗透压胁迫,可造成细胞生长代谢减慢,为改善微囊化肝细胞的生长,尝试应用抗渗透压胁迫物质牛磺酸,观察其对微囊化肝细胞生长的影响。方法:实验于2006-07/08在中国科学院大连化学物理研究所生物医学材料工程实验室完成。将HepG2细胞悬液(非微囊化细胞)和微囊化HepG2分别接种于牛磺酸浓度为0,0.6,0.8和1.2mmol/L的MEM培养液中,在37℃体积分数为0.05的CO2中培养。MTT法测定非微囊化和微囊化HepG2细胞的生长活性,相差显微镜观察囊内细胞生长状态。结果:①非微囊化HepG2细胞:0.6,0.8和1.2mmol/L的牛磺酸对其生长无影响,吸光度值比较差异无显著意义(P>0.05)。②微囊化HepG2细胞:0.6,0.8mmol/L牛磺酸对微囊化肝细胞的生长亦无影响(P>0.05);但1.2mmol/L牛磺酸可以显著改善微囊化肝细胞的生长,其吸光度值高于0mmol/L牛磺酸组(P<0.05),并促进细胞的聚集。结论:1.2mmol/L牛磺酸可以改善微囊化肝细胞的生长并抵制微囊内的高渗透压胁迫对细胞的生长抑制作用。
- 孙志杰郭昕宁小娟李双月吕国军于炜婷王为马小军
- 关键词：微囊化牛磺酸肝细胞生物材料
- 一种适用于微囊化CHO细胞的无血清培养基及其应用
- 本发明涉及细胞培养与移植，具体地说是一种适用于微囊化CHO细胞的无血清培养基，其以DMEM/F12为基础培养基，针对微囊化细胞生长代谢特点，并添加一定比例的胰岛素、大豆卵磷脂、吐温80、环庚三烯酚酮(Tropolone)...
- 马小军吕国军李娜王为林军章于炜婷孙志杰
- 文献传递
- 不同渗透压敏感型酿酒酵母在海藻酸钠-壳聚糖-海藻酸钠非凝胶化核心微囊(ACA)生物微反应器中的代谢生理分析
- 本文考察了野生型酿酒酵母SPSC01和高渗透压敏感的HOG1(高渗透溶质甘油)基因敲除酿酒酵母BY4741在海藻酸钠-壳聚糖-海藻酸钠非凝胶化核心微囊(ACA)生物反应器中厌氧发酵的生长和代谢行为。结果显示与悬浮培养相比...
- 孙志杰王为于炜婷马小军
- 文献传递
- 一种适用于微囊化CHO细胞的无血清培养基及其应用
- 本发明涉及细胞培养与移植，具体地说是一种适用于微囊化CHO细胞的无血清培养基，其以DMEM/F12为基础培养基，针对微囊化细胞生长代谢特点，并添加一定比例的胰岛素、大豆卵磷脂、吐温80、环庚三烯酚酮(Tropolone)...
- 马小军吕国军李娜王为林军章于炜婷孙志杰
- 文献传递
- 渗透压敏感和耐高渗酵母菌在海藻酸钠-壳聚糖-海藻酸钠微囊中的生长和代谢被引量：3
- 2008年
- 为了研究微囊微环境中渗透压对微囊内不同渗透压敏感性细胞生长、代谢的影响,分别以渗透压敏感型酿酒酵母Y02724与耐高渗酵母Hansel为细胞模型,考察了有氧条件下这两种细胞在海藻酸钠-壳聚糖-海藻酸(Alginate-chitosan-alginate,ACA)微胶囊中的生长、代谢状态。主要检测了细胞比生长速率、最大产物生成量以及代谢物乙醇、甘油分泌量等的变化。实验结果分析表明,渗透压胁迫可能是导致不同渗透压敏感性细胞在微囊微环境中生长代谢特征变化的因素之一,即微囊微环境内可能存在渗透压胁迫。
- 宁小娟孙志杰钟盛华林军章吕国军于炜婷朱静王为马小军
- 关键词：酵母生长代谢
- 微囊微环境对脐血细胞造血相关基因表达的影响
- 2009年
- [目的]利用基因芯片技术研究微囊微环境对脐血细胞造血相关基因表达的影响。[方法]将新鲜分离的人脐血细胞在生理条件下进行微囊化包封、培养7 d后,对其进行总RNA提取、纯化、体外转录合成cRNA探针、cRNA探针生物素标记、与基因芯片杂交、扫描杂交信号,最后进行芯片数据处理和生物学信息分析。[结果]基因芯片筛选结果显示,与平面培养对照组相比,微囊化培养脐血细胞中差异表达2倍及以上的造血相关基因有32个,其中19个表达上调,13个表达下调。[结论]微囊微环境影响脐血细胞造血相关基因的表达。
- 李双月王为王秋艳孙志杰吕国军郭昕朴丰源马小军
- 关键词：脐血细胞基因表达培养环境
- 生物黏附材料壳聚糖的黏附性能被引量：5
- 2007年
- 目的:考察壳聚糖与黏蛋白的相互作用,评价壳聚糖黏附性能的影响因素。方法:于2006-07/12在中国科学院大连化学物理研究所生物医用材料工程实验室完成。将壳聚糖溶液与黏蛋白溶液混合,用紫外分光光度计测定溶液混合前后紫外吸收值的变化,表征壳聚糖的黏附性能。①调节反应溶液的pH值(1.0,3.0,5.0),考察环境pH对壳聚糖黏附性能的影响。②改变反应温度(4,25,37℃),考察环境温度对壳聚糖黏附性能的影响。③选择不同相对分子质量(48000,124000,230000)的壳聚糖,考察壳聚糖相对分子质量对其黏附性能的影响。④选择不同脱乙酰度(56%,67%,97%)的壳聚糖,考察壳聚糖脱乙酰度对其黏附性能的影响。⑤使用不同种类(I-S型及Ⅲ型)黏蛋白,考察黏蛋白中唾液酸含量对壳聚糖黏附性能的影响。结果:①环境介质pH由1.2升至5.0时,壳聚糖黏附性能随之显著升高。②壳聚糖黏附性能随着温度的升高而显著增强。③壳聚糖相对分子质量对于壳聚糖黏附无显著影响。④壳聚糖脱乙酰度增加,其黏附性能显著增强。⑤I-S型黏蛋白与壳聚糖的作用较之Ⅲ型黏蛋白与壳聚糖的相互作用明显增强。结论:壳聚糖的黏附受环境pH、温度、壳聚糖及黏蛋白两种分子电荷密度的显著影响;在酸性环境下增大环境pH值、升高环境温度、增加壳聚糖的脱乙酰度和增加黏蛋白中唾液酸的含量,均有利于壳聚糖的黏附。
- 王媛珍郑建华包德才林军章孙志杰刘袖洞马小军
- 关键词：壳聚糖生物黏附黏蛋白生物材料
