安烨
- 作品数：13 被引量：18H指数：2
- 供职机构：北京市农林科学院畜牧兽医研究所更多>>
- 发文基金：北京市科技新星计划国家高技术研究发展计划国家留学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 利用噬菌体展示肽库筛选鸡传染性支气管炎病毒模拟抗原表位被引量：9
- 2007年
- 目的:利用噬菌体展示肽库技术筛选鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的模拟抗原表位。方法:用IBV阳性血清纯化IgG作为靶标,对噬菌体展示随机12肽库进行筛选,通过ELISA和竞争抑制ELISA鉴定筛选克隆的结合特性,并对阳性克隆提取ssDNA进行测序分析。结果:3轮生物淘洗后,目标噬菌体得到125倍富集。随机挑选50个克隆进行ELISA和竞争抑制ELISA,其中有12个噬菌体克隆可以与IBV阳性血清高特异性结合。测序分析发现,这12个克隆带有2种氨基酸序列,即KSPKHSSSALHF和SFFQLNLHRPTS,且未发现这2种序列与GenBank中已发表的IBV氨基酸序列有同源性。结论:结果提示,这2个肽可能是IBV抗原的模拟表位。
- 安烨王宏俊张培君
- 关键词：鸡传染性支气管炎噬菌体展示肽库抗原表位
- 两株B型副鸡嗜血杆菌致病力和免疫原性的初步研究
- 从大连和北京分离到两株副鸡嗜血杆菌,经血清型鉴定确认为B型副鸡嗜血杆菌.用这两个菌株不同剂量分别攻击非免疫鸡,以测定其致病力.同时,用这两个菌株分别制备抗原液,经甲醛灭活后,制成油乳剂灭活疫苗,经胸肌注射途径免疫42日龄...
- 龚玉梅安烨孙惠玲苗得园张培君
- 关键词：致病力免疫原性血清型鉴定
- 文献传递
- 鸡传染性支气管炎病毒抗原表位的筛选及鉴定
- 鸡传染性支气管炎(Infectious bronchitis，IB)是由传染性支气管炎病毒(Infectiousbronchitis virus，IB)引起鸡的一种急性高度接触性呼吸道传染病。本研究利用噬菌体随机展示肽库...
- 安烨
- 关键词：鸡传染性支气管炎病毒噬菌体展示模拟表位
- 文献传递
- 鸡血清IgG纯化方法的比较
- 本文比较了两种纯化鸡血清IgG的方法,通过用辛酸-硫酸铵法与硫酸铵法分别盐析沉淀鸡血清IgG,将获得的IgG利用SDS-PAGE进行纯度鉴定比较.结果表明:辛酸-硫酸铵法提取的IgG纯度较高,且辛酸-硫酸铵法具有简便、快...
- 安烨王宏俊张培君
- 关键词：鸡血清IGG分离纯化鸡传染性支气管炎
- 文献传递
- Modesto株副鸡禽杆菌血凝素基因的克隆表达及生物活性鉴定
- 目的克隆并原核表达Modesto株C型副鸡禽杆菌的血凝素基因,鉴定该重组血凝素的生物学活性。方法根据GenBank上已发表的Modesto株Apg的血凝素基因序列,设计合成了1对特异性引物,克隆Apg血凝素基因。以Mod...
- 王宏俊安烨龚玉梅陈小玲张培君
- 关键词：副鸡禽杆菌血凝素原核表达
- 文献传递
- 传染性支气管炎病毒抗原模拟表位在大肠杆菌鞭毛上的展示
- 2008年
- 目的:进一步验证通过噬菌体肽库筛选得到的2个传染性支气管炎病毒(IBV)抗原模拟表位在脱离噬菌体后仍具有与IBV抗体结合的生物学活性。方法:应用基因工程技术合成2个IBV抗原模拟表位(KSPKHSSSALHF和SⅡQMNLHR PTS)的编码碱基序列,将其分别插入质粒pFliTrx,构建重组展示载体p1和p2,并分别转化大肠杆菌GI826,形成展示IBV模拟抗原表位肽的重组菌F1和F2,进行体外抗原抗体反应。结果:体外抗原抗体反应试验表明,重组菌F1与F2可以与IBV阳性鸡血清特异性结合。结论:提示得到的2个抗原模拟表位在脱离噬菌体后,仍具有与IBV抗体结合的生物学活性,在研制IBV新型疫苗和诊断试剂方面具有潜在的应用价值。
- 安烨王宏俊徐慧龚玉梅张培君
- 关键词：传染性支气管炎病毒抗原表位大肠杆菌
- Granulomatis曼氏杆菌PCR检测方法的建立
- Granulomatis曼氏杆菌是导致牛、羊呼吸道传染病的一种病原菌。为快速、准确诊断由本菌导致的疫病,从基因库中获得M.granulomatis的基因序列,再从M. granulomatis的基因序列中获得与其它细菌包...
- 安烨龚玉梅Jeanette MiflinPat Blackall孙惠玲张培君
- 关键词：呼吸道传染病PCR检测方法
- 文献传递
- IBV抗原模拟表位在大肠杆菌鞭毛上的展示
- 目的为进一步验证通过噬菌体肽库筛选得到的2个IBV抗原模拟表位在脱离噬菌体后仍具有与IBV抗体结合的生物学活性。方法应用基因工程技术,合成这2个IBV抗原模拟表位:KSPKIHSSSALHF和SIIQMNLHRPTS的编...
- 安烨王宏俊徐慧龚玉梅张培君
- 关键词：IBV抗原表位大肠杆菌
- 文献传递
- C型副鸡禽杆菌血凝素基因的克隆表达及生物活性鉴定
- 血凝素是副鸡禽杆菌(Avibacterium paragallinarum,Apg)的主要抗原成分之一,鸡只对Apg的免疫力与血凝素抗体滴度成正相关。根据GenBank上已发表的C型Apg Modesto株的血凝素基因序...
- 王宏俊安烨龚玉梅陈小玲张培君
- 关键词：副鸡禽杆菌血凝素原核表达
- 文献传递
- Modesto株副鸡禽杆菌血凝素的原核表达及其生物活性鉴定被引量：1
- 2008年
- 目的:克隆并原核表达Modesto株C型副鸡禽杆菌(Apg)的血凝素(HA)基因,鉴定该重组HA的生物学活性。方法:根据GenBank上已发表的Modesto株Apg的HA基因序列,设计合成了1对特异性引物,克隆Apg HA基因;以Modesto株Apg中提取的细菌DNA为模板,利用PCR扩增ApgHA全长基因(1026bp),将其克隆到pET-32a(+)载体上,构建原核表达载体pET-HA,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达并纯化重组HA;通过Western印迹及血凝和血凝抑制试验鉴定该重组蛋白的生物学活性。结果:表达并纯化了Apg重组HA,该蛋白可以和C型Apg抗血清特异性结合,并且可以凝集鸡红细胞。结论:构建了Modesto株Apg HA基因的原核表达载体,并表达纯化了Apg HA融合蛋白,该重组HA具有凝集鸡红细胞的活性,为进一步研究Apg HA的免疫功能奠定了基础。
- 王宏俊安烨龚玉梅陈小玲张培君
- 关键词：副鸡禽杆菌血凝素原核表达
