张秀丽
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
- 供职机构：东华大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：生物学化学工程更多>>
- 利用搭桥PCR技术对蛋白质内含子HP进行改造(英文)被引量：1
- 2012年
- [目的]利用搭桥PCR技术对蛋白质内含子HP进行改造。[方法]根据搭桥PCR中寡聚核苷酸链之间重叠的部分互相搭桥、互为模板的原则设计多对引物,通过多次PCR扩增获得目的基因片段,进而实现对蛋白质内含子HP在基因水平上进行多个位点同时定点突变和添加Linker。[结果]搭桥PCR产物克隆经DNA测序分析,证明蛋白质内含子HP内部的4个半胱氨酸成功突变成丝氨酸,几个PCR前体片段也无缝的融合成HP基因片段,而且没有引进任何其他突变;经DNA测序,46bp的DNALinker成功的插入到设计好的HP基因序列中,且没有任何碱基突变和错配。[结论]该研究不仅实现了对蛋白质内含子HP的快速改造,而且扩大了搭桥PCR的应用范围,同时也为蛋白质内含子的基础改造提供了低成本、简捷、高效的方法。
- 李佳林瑛张秀丽扬子江贾秋品孟清
- 关键词：引物设计
- E.australis MaSp1模块的原核表达研究
- 蜘蛛能够产生六种丝纤维和一种粘液物,其化学本质都是蛋白质。蜘蛛丝具有优良的材料学特性,在军工、航空航天以及生物医学工程等领域有着潜在应用价值。牵引丝作为蛛丝的一种,亦享有“生物钢”的美誉,受到更多研究者的关注。但由于蜘蛛...
- 张秀丽
- 关键词：融合蛋白原核表达
- 文献传递
- Euprosthenops australis牵引丝蛋白的原核表达
- 2013年
- 参照GenBank收录的牵引丝蛋白编码序列,经过密码子优化,人工合成3段cDNA序列:NT、CT和4Rep,由Ⅰ型限制性内切酶BsaⅠ和BspMⅠ介导无缝拼接,分别构建4RepCT、NT4RepCT、NT8RepCT和NT12RepCT重组模块.通过改造表达载体和优化培养温度,成功提高了4RepCT的表达量(30 mg/L).另外还首次成功表达NT4RepCT和NT8RepCT重组蛋白模块,表达量分别为21 mg/L和8.5 mg/L.4RepCT表达量的提高及NT4RepCT和NT8RepCT的成功表达证实了融合标签TRX有利于提高蛛丝蛋白的表达水平,为E.australis全长牵引丝蛋白的表达奠定了基础.
- 张秀丽陈格飞林瑛李佳孟清
- 关键词：基因克隆融合蛋白原核表达
- E.australis MaSpl模块的原核表达研究
- 蜘蛛能够产生六种丝纤维和一种粘液物，其化学本质都是蛋白质。蜘蛛丝具有优良的材料学特性，在军工、航空航天以及生物医学工程等领域有着潜在应用价值。牵引丝作为蛛丝的一种，亦享有“生物钢”的美誉，受到更多研究者的关注。但由于蜘蛛...
- 张秀丽
- 关键词：融合蛋白原核表达蜘蛛丝
