张莉娟
- 作品数:7 被引量:19H指数:2
- 供职机构:河南农业大学牧医工程学院更多>>
- 发文基金:河南省科技攻关计划国家自然科学基金河南省重大公益性科研项目更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 一种猪传染性胃肠炎病毒毒株
- 本发明公开了一种猪传染性胃肠炎病毒毒株,其特征在于:猪传染性胃肠炎病毒(swine transmissible gastroenteritis virus),CCTCC NO:V201216。本发明的猪传染性胃肠炎病毒灭...
- 胡慧魏战勇崔保安陈雅君张莉娟刘中原寇亚楠
- 文献传递
- PCV2与PPV共感染猪外周血单个核细胞对其细胞凋亡相关因子表达水平的影响被引量:2
- 2013年
- 为分析猪圆环病毒2型(PCV2)与猪细小病毒(PPV)体外共感染对猪外周血单个核细胞(PBMC)细胞凋亡相关因子mRNA转录水平的影响,探讨PCV2和PPV共感染机制及宿主—病毒之间的作用关系,运用病毒滴度和相对荧光定量PCR技术,测定和分析PCV2和PPV感染PBMC后PCV2、PPV的病毒滴度含量及Bcl-2、FasL、p53、Caspase-8、PBR、TNF-α等的转录时相变化。结果表明:PCV2、PPV能够感染PBMC细胞,PCV2/PPV共感染中PCV2、PPV的含量分别在24h显著最高(P<0.001);PCV2、PPV单独感染和PCV2与PPV共感染PBMC后引起Bcl-2、FasL、p53、Caspase-8、PBR、TNF-αmRNA转录水平上升;在3h时PCV2/PPV共感染组PBR、P53mRNA转录水平显著高于PCV2、PPV单感染组(P<0.05),12h时PCV2/PPV共感染组FasLmRNA转录水平显著高于PCV2、PPV单感染组(P<0.05),24h时Bcl-2、Caspase-8mRNA转录水平显著高于PCV2、PPV单感染组(P<0.05),PCV2/PPV共感染组TNF-αmRNA转录水平显著高于PPV组(P<0.05),与PCV2组差异不显著。结论:PCV2与PPV共感染引起细胞凋亡相关因子mRNA转录水平上调,加速淋巴细胞凋亡,本试验为PCV2和PPV共感染机制研究提供了理论基础和试验依据。
- 郭东辉张莉娟李金磊寇亚楠王淑娟陈红英崔保安魏战勇
- 关键词:猪细小病毒细胞凋亡因子
- 动物源性肠出血性大肠杆菌O157∶H7及其3个毒力基因的多重PCR快速检测研究被引量:8
- 2013年
- 目的建立快速、特异的分离鉴定大肠杆菌O157∶H7及其3个主要毒力基因(hylA、eaeA和stx2基因)的多重PCR方法。方法根据GenBank公布的大肠杆菌O157∶H7菌体抗原rfbE基因、鞭毛抗原fliC基因、溶血素(hlyA)基因、紧密黏附素(eaeA)基因和志贺样毒素2(stx2)基因为靶基因,设计5对特异性引物,在同一扩增体系中进行PCR,优化反应体系,测定特异性和灵敏度,并进行了临床样品的检测。结果该方法扩增目的基因片段分别为327bp、247bp、494bp、384bp和779bp,特异性和灵敏度均高,细菌纯培养物的检测灵敏度为104cfu/mL。结论初步建立了快速、灵敏、特异的检测肠出血性大肠杆菌O157∶H7及其3个毒力基因的多重PCR方法,可用于临床动物携带大肠杆菌O157∶H7的分子流行病学调查及食品微生物检测。
- 陈雅君王亚宾张莉娟张龙现陈丽颖刘中原申果胡慧
- 关键词:动物源性毒力基因多重PCR
- 猪树突状细胞在猪传染性胃肠炎病毒感染中的作用及机制研究
- 猪传染性胃肠炎(TGE)是由猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)所致的以呕吐、严重腹泻、脱水和对7日龄以内仔猪高度致死率(通常可达100%)为特征的急性高度接触性肠道传染病。我国从第一次分离出该病毒后,在全国各地便不断有从猪场...
- 张莉娟
- 关键词:猪传染性胃肠炎病毒树突状细胞ELISA荧光定量PCR
- 文献传递
- 一种猪传染性胃肠炎病毒毒株
- 本发明公开了一种猪传染性胃肠炎病毒毒株,其特征在于:猪传染性胃肠炎病毒(swine?transmissible?gastroenteritis?virus),CCTCC?NO:V201216。本发明的猪传染性胃肠炎病毒灭...
- 胡慧魏战勇崔保安陈雅君张莉娟刘中原寇亚楠
- 文献传递
- 利用PCR技术对猪伪狂犬疫苗含毒量的评价被引量:7
- 2013年
- 为检测猪伪狂犬疫苗含毒量的高低,根据GenBank发表的猪伪狂犬病毒gh基因序列设计一对引物,采用倍比稀释的方法把猪伪狂犬疫苗稀释1倍、10倍、100倍、1 000倍,常规方法提取DNA进行PCR扩增。结果表明,通过琼脂糖凝胶电泳观察条带的明暗来判定疫苗含毒量的高低,筛选出含毒量较高的猪伪狂犬疫苗供养殖场免疫使用。
- 刘中原刘石徐卫松陈雅君张莉娟魏战勇
- 关键词:PCR技术
- 猪传染性胃肠炎病毒HN-2012分离株S基因的遗传变异分析及其真核表达被引量:2
- 2015年
- 以猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)HN-2012株的cDNA为模板,经克隆测序后,将得到的S基因序列及其推导的氨基酸序列与NCBI中不同来源的TGEV毒株的相应序列进行同源性和亲缘关系的比较分析,构建系统进化树进行遗传变异分析;然后将S基因亚克隆至真核表达载体pCAGGS-S-flag中,转染293T细胞进行表达,利用flag标签抗体进行Western-blot分析。结果显示,TGEV HN-2012株的S基因与其他毒株间核苷酸和氨基酸的同源性分别为95.1%~99.1%和93.6%~95.2%,与H株的亲缘关系较近,与我国其他毒株的亲缘关系较远。Western-blot分析中可见大小约为160ku的目的条带,表明S基因成功在293T细胞中表达。本试验结果为深入研究TGEV S蛋白的生物学功能奠定了基础。
- 陈雅君程慧芳徐卫松刘中原寇亚楠张莉娟崔保安胡慧
- 关键词:猪传染性胃肠炎病毒293T细胞真核表达