李冬宏
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：南昌大学更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人Tim-3基因真核表达载体的构建及表达被引量：1
- 2011年
- 目的:为了构建可在真核细胞中高效表达人Tim-3(hTim-3)的真核表达质粒,以便用于hTim-3肿瘤免疫治疗研究。方法:取健康人外周血的单个核细胞,用高保真聚合酶扩增hTim-3基因,先进行hTim-3基因的亚克隆,用BglⅡ和SalⅠ限制性内切酶切下带有酶切位点的hTim-3基因,最终构建hTim-3基因的真核表达质粒pEGFP-N1-hTim-3。用脂质体方法转染质粒至肝癌细胞SMMC7721和巨噬细胞U937中。48h后荧光显微镜观察转染细胞绿色荧光表达情况,初步判断转染效率。结果:酶切和测序鉴定证实目的基因hTim-3正确插入到真核表达载体pEGFP-N1中,转染肝癌细胞SMMC7721和巨噬细胞U937后,在荧光显微镜下观察到绿色荧光蛋白的表达。结论:成功构建了可在真核细胞中高效表达hTim-3基因的真核表达质粒pEGFP-N1-hTim-3,为进一步研究hTim-3的肿瘤免疫治疗奠定了基础。
- 刘津麟刘东升李冬宏周南进谢勇
- 关键词：TIM-3基因克隆
- 幽门螺杆菌sabA基因的克隆表达及江西地区幽门螺杆菌外膜蛋白的序列特征
- 研究背景与目的：
外膜蛋白与H.pylori的定植、胃黏膜的损伤、炎性介质的分泌和中性粒细胞的浸润等有着密切关系，同时它是激发免疫反应的主要成份，可诱导强大的菌株特异性免疫反应，这在H.pylori的致病中起重要...
- 李冬宏
- 关键词：幽门螺杆菌OIPA
- 文献传递
- 幽门螺杆菌唾液酸结合黏附素(SabA)的克隆表达
- 2012年
- 目的构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,简称H.pylori或Hp)唾液酸结合黏附素(sialic acid-binding adhe-sion,SabA)的重组质粒,并在大肠杆菌BL21中表达,为探讨SabA的功能及相关疫苗的发展提供帮助。方法以Hp26695株基因组为模板,设计sabA基因特异性引物扩增目的基因,将PCR产物插入到pGEX-4T-1载体构建重组质粒,在大肠杆菌BL21中诱导表达。表达蛋白经飞行质谱鉴定,并用免疫印迹法评价其抗原性。结果经SDS-PAGE和飞行质谱鉴定,该表达蛋白为Hp外膜蛋白SabA,经免疫印法迹检测具有良好的抗原性。结论成功克隆了Hp的SabA,并能在大肠杆菌BL21中表达,该蛋白具有良好的抗原性。
- 李冬宏宫雅楠肖迪周南进谢勇张建中
- 关键词：幽门螺杆菌基因克隆
