李剑
- 作品数：7 被引量：40H指数：4
- 供职机构：中南大学湘雅二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 复合杂合性CCN6基因突变致晚发型脊柱骨骺发育不良伴进行性骨关节病的关节软骨病理和分子病因研究被引量：15
- 2004年
- 目的 观察晚发型脊柱骨骺发育不良伴进行性骨关节病 (SEDT PA)患者的X线及磁共振成像特点、关节软骨病理特点 ,筛查CCN6基因突变位点 ,探讨SEDT PA的发病机制。方法 应用放射学、磁共振成像方法分析汉族家系中两例SEDT PA患者骨骼及软骨等结构特点 ;应用HE和甲苯胺蓝染色法对关节软骨进行组织病理学特点观察 ;用电子显微镜观察关节软骨组织和细胞的超微结构 ;设计引物对CCN6基因外显子进行扩增和测序分析 ;应用突变CCN6蛋白质三维结构预测等方法研究SEDT PA的发病机制。结果 病理检查发现汉族家系中一例SEDT PA关节软骨细胞增生活跃伴成熟障碍 ,而基质胶原纤维大小和密度明显下降。突变筛查提示两患者在CCN6基因 8号外显子存在两种突变类型 ,其中的替换突变 (10 0 0T→C ,Ser334Pro)来自父方 ;而缺失突变(84 0delT)来自母方 ,导致其编码的氨基酸序列移码突变 ,在下游 31个氨基酸残基后提前出现终止密码子 ,导致蛋白质被截短 4 3个氨基酸残基。蛋白质三维结构预测结果显示 84 0delT截短突变蛋白质与野生型蛋白质相比 ,从信号肽至第一个结构域 (IGFBP)起始的 2 4个氨基酸残基区域由一个单一环变成两个小的交叉环 ,而且伴C末端明显缩短 ,而Ser334Pro蛋白质仅有C末端的延伸方向与野生型蛋白质相反 ,其余?
- 彭依群廖二元顾慧敏魏启幼周厚德李剑谢辉翟木绪谭利华罗湘杭伍贤平胡平安倪江东苏欣蒋谊戴如春郭丽娟袁凌青王敏王平芳刘石平杨雅王成隋国良方团育
- 关键词：关节软骨晚发型分子病因脊柱骨骺发育不良杂合性
- PTH/PTHrP对骨代谢调节机制的研究进展被引量：11
- 2004年
- PTH/PTHrP在骨代谢中具有促进骨形成和骨吸收的双重作用 ,这两种作用主要由PKA和PKC信号传导通路介导 ,并通过对成骨细胞和破骨细胞的功能调节来实现。开发新型的具有骨合成效应的单功能PTH/PTHrP片段或类似物 。
- 李剑魏启幼
- 关键词：甲状旁腺激素甲状旁腺激素相关蛋白骨代谢
- 微波抗原修复中防脱片的技术改进被引量：4
- 2005年
- 为应对微波加热处理组织切片中常发生的脱片现象 ,作者通过技术改进较好地防止了脱片现象的发生。本文设对照组进行比较 ,结果表明 ,经防脱片技术改进可明显降低脱片量。
- 袁凌青蒋谊李剑魏启幼
- 关键词：脱片组织切片
- 基质金属蛋白酶与骨的发育和重建被引量：2
- 2003年
- 基质金属蛋白酶通过启动骨吸收、重塑细胞外胶原基质等方式在骨发育和骨重建中发挥着重要的作用,并与代谢性骨病的发病密切相关。深入研究基质金属蛋白酶及其抑制因子的作用机制,有助于对骨发育和骨重建这一复杂过程的深入理解和认识。
- 李剑魏启幼
- 关键词：骨发育骨重建基质金属蛋白酶
- 扁桃体黏液腺癌1例
- 2004年
- 郑薇薇黄瑞生魏启幼李剑
- 关键词：扁桃体黏液腺癌鼻咽部查体压痛糜烂
- 不脱钙骨组织免疫组织化学与原位杂交的方法研究被引量：5
- 2003年
- 目的 :探讨在低温塑料包埋制备的不脱钙骨切片上运用免疫组化和原位杂交技术的可行性。方法 :采用改进的甲基丙稀酸甲酯低温塑料包埋法包埋SD大鼠胫骨近端 ,制备不脱钙的骨组织切片。切片行Goldner′s三色法染色观察骨小梁结构 ;采用免疫组化SABC法和原位杂交技术检测骨组织细胞中胰岛素样生长因子 1(IGF 1)mRNA和蛋白表达。结果 :三色法染色示骨小梁结构完整 ,部分骨小梁边缘可见红染的类骨质 ,成骨细胞与破骨细胞清晰可见。免疫组化和原位杂交示IGF 1mRNA和蛋白表达于成骨细胞 骺板软骨细胞及骨髓腔中部分单核细胞的胞浆中。此外 ,在骨小梁基质中也可见IGF 1蛋白的阳性表达。结论 :利用低温塑料包埋制备的不脱钙骨切片可同时进行免疫组化和原位杂交检测观察 ,该方法为骨质疏松等代谢性骨病的分子病理学研究提供了有效的技术平台。
- 李剑廖二元魏启幼戴如春蒋谊
- 关键词：免疫组织化学原位杂交
- SEDT-PA患者关节软骨细胞生物学特性及基因表达谱的改变被引量：4
- 2005年
- 目的 研究晚发型脊柱骨骺发育不良伴进行性骨关节病 (SEDT PA)患者关节软骨细胞生物学特性及基因表达谱的改变。方法 从 1例SEDT PA患者及正常同龄个体的关节软骨分离软骨细胞进行体外培养 ,对培养的软骨细胞进行生长曲线、细胞增殖、细胞周期测定及基因表达谱分析 ,RT PCR、Westernblot及免疫组化分别从转录与翻译水平对基因表达谱分析进行验证。结果 SEDT PA软骨细胞体积增大 ,增殖速度加快 ,增殖指数及DNA合成增多 ;处于DNA合成及有丝分裂期的细胞比例增加。软骨细胞外基质的主要降解酶系基质金属蛋白酶 (MMP) 1、MMP 3、MMP 13等的mRNA表达显著下调 ,而其细胞内的相应蛋白却明显增多 ,同时促进细胞生长、增殖与细胞周期演进的部分基因mRNA转录明显上调 ,而细胞外胶原、非胶原蛋白及部分蛋白多糖的表达改变并不一致 ,大部分mRNA转录明显下调 ,少部分如细胞外基质蛋白 1、ⅩⅤ型胶原蛋白α1等的mRNA表达增高 ,同时伴细胞骨架蛋白的相应变化。结论 SEDT PA患者软骨细胞生长及增殖速度加快 ,软骨细胞凋亡减少。软骨细胞外主要MMP系的出胞障碍 ,以及胶原、非胶原蛋白和蛋白多糖表达的不均一性改变是SEDT PA发病的细胞生物学基础。
- 周后德彭依群谷卫李剑谢辉刘敏罗湘杭黄秋霞郭丽娟袁凌青倪江东张湘生廖二元
- 关键词：关节软骨细胞基因表达谱PAMRNA转录非胶原蛋白有丝分裂
