李文荣
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
- 供职机构：广东医学院基础医学院更多>>
- 发文基金：东莞市科技计划项目湛江市科技攻关计划项目教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 利用植物生物反应器生产药用蛋白质被引量：1
- 2012年
- 植物生物反应器是一种安全、环保、廉价的生产系统。它已成为生产药用蛋白质的理想载体并受到广泛的关注。目前,生物反应器通过靶向表达来提高外源蛋白质产量取得了一定的效果。本文简要介绍了生物反应器的选择,并着重阐述了通过在空间上的定位表达和时间上的诱导表达来提高药用蛋白质产量方面的最新研究进展,同时展望了未来的发展前景。
- 李文荣郑克勤
- 关键词：植物生物反应器药用蛋白叶绿体油体内质网
- 大豆油体与EGF融合基因的克隆及其在红花种子中的表达被引量：4
- 2014年
- 目的:旨在建立一种在红花油体中表达EGF的转基因植物的方法。方法:通过PCR技术把大豆油体基因(DDoil)与EGF构建成融合基因,克隆至植物表达载体pCAMBIA1390R中,构建成植物表达载体p1390Do-EGF,然后转化进农杆菌LBA4404中用于侵染红花外植体,通过甘露糖筛选培养基培养可获得红花转化苗。通过PCR、实时荧光相对定量RT-PCR、SDS-PAGE和Western blot分析目的基因的表达情况,通过MTT法检测EGF的促细胞增殖活性。结果:PCR结果显示,红花叶片中能检测到EGF基因;实时荧光相对定量RT-PCR结果显示,在红花种子中EGF能成功实现转录;SDS-PAGE和Western blot检测证明,在转基因红花种子中能有效表达出EGF,并具有其原有的免疫原性,MTT法实验结果表明EGF具有促进balb/c 3T3细胞增殖的生物活性。结论:大豆油体和EGF融合基因已经成功转化进红花细胞的基因组中,并实现了EGF外源蛋白在红花种子油体中的表达,为EGF蛋白的产业化生产探讨了一种新的生产途径。
- 庞实锋姜潮李文荣冯治国刘敏楚生辉李校堃郑克勤
- 关键词：油体表皮生长因子融合基因
- 人核迁移蛋白shRNA慢病毒载体的构建及转导
- 2012年
- 目的:通过绿色荧光蛋白(GFP)标记,构建可示踪的人核迁移蛋白(hNUDC)慢病毒RNA干扰载体,并实现其对靶细胞的转导。方法:通过分子克隆技术将人核迁移蛋白的发夹RNA(shNUDC-F)克隆至慢病毒表达载体中,构建成靶向针对hNUDC的RNA干扰载体,通过磷酸钙转染法,将获得的慢病毒高纯度质粒转染进低次代293T细胞中进行包装,通过高速离心收获慢病毒颗粒,经滴度测定后,对Dami巨核细胞进行转导实验。用显微镜观察转导效率,用Westernblot检测RNA干扰效果。结果:慢病毒携带的shNUDC-F片段对Dami巨核细胞能高效转导,并使其内源hNUDC基因发生基因沉默,干扰效果较好。结论:成功构建出慢病毒hNDUC RNA干扰载体,并在293T细胞中实现包装并成功转入Dami细胞。
- 庞实锋廖霞郑克勤周汝滨梁朋曹定国张国平李文荣
- 关键词：慢病毒RNA干扰发夹RNA巨核细胞
