李晓青
- 作品数：8 被引量：11H指数：2
- 供职机构：中山大学肿瘤防治中心华南肿瘤学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- IFN-γ基因修饰的骨髓基质细胞体外抗白血病作用的实验研究被引量：1
- 2005年
- 目的研究重组人IFNγ腺病毒(Ad/hIFNγ)在CML病人骨髓基质细胞(BMSCs)中的转染效率、IFNγ表达,并进一步观察转染Ad/hIFNγ的骨髓基质细胞体外抗白血病细胞株K562增殖和诱导K562细胞凋亡的作用。方法以Ad/hIFNγ重组腺病毒按感染复数(MOI)为50转染CML病人骨髓基质细胞,RTPCR、ELISA及Westernblot分别检测转染Ad/hIFNγ的人骨髓基质细胞(BMSCs)中IFNγmRNA和IFNγ的表达;转染Ad/hIFNγ的骨髓基质细胞与K562细胞共培养,通过绘制K562细胞生长曲线分析其对K562细胞增殖的影响;并进一步通过流式细胞学分析其对K562细胞周期的影响和诱导凋亡的作用。结果RTPCR、Westernblot及ELISA方法都分别检测到转染Ad/hIFNγ的人骨髓基质细胞(BMSCs)中IFNγmRNA和IFNγ的表达;与对照组相比,转染Ad/hIFNγ的人骨髓基质细胞的实验组具有明显的抑制K562细胞增殖的作用(P=0.000),在细胞周期G1期的K562细胞比例明显增加,而S期K562细胞比例显著下降(P<0.01),并显著诱导K562细胞的凋亡(P<0.01)。结论Ad/hIFNγ转染人骨髓基质细胞后可获得IFNγ有效的表达,并在体外能有效地发挥抗白血病细胞作用。
- 李晓青黄文林徐海鹏陈晓勤耿其容吕跃
- 关键词：骨髓基质细胞IFN-Γ
- 重组人γ-干扰素腺病毒转染的人BMSCs体外抗白血病作用研究
- 本文介绍了Ⅰ型干扰素(IFN-α和IFN-β)通常比Ⅱ型干扰素(IFN-γ)有更好的临床效应，IFN-γ在治疗多种实体瘤和一些血液肿瘤的临床试验结果也令人失望，但是慢性粒细胞白血病对IFN-γ的治疗反应良好，肿瘤消退显著...
- 李晓青
- 关键词：白血病骨髓基质细胞干扰素腺病毒转染
- 文献传递
- 骨髓基质细胞与白血病的关系及其在基因治疗中的研究进展被引量：4
- 2005年
- 骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)具有多向分化的干细胞特征,体外易于分离和扩增,回输体内后可归巢于骨髓并通过自我更新而长期存活。骨髓基质细胞可以从多个方面影响白血病细胞的生物学特性,参与白血病的发病过程和病理过程。功能正常的骨髓基质细胞对白血病细胞具有直接的抗瘤效应。骨髓基质细胞具有显著的免疫调节功能。基因修饰的骨髓基质细胞回输体内后可在一定时期表达多种治疗性的外源目的基因蛋白。因此,骨髓基质细胞被认为是一种理想的治疗性细胞载体和白血病基因治疗中的靶细胞。干扰素是能够产生多向性生物学效应的细胞因子家族,在毛细胞白血病、慢性髓细胞性白血病治疗中疗效显著。本文就干扰素基因修饰的骨髓基质细胞对白血病的分子靶向治疗的可能性及前景作一简要综述。
- 李晓青吕跃
- 关键词：骨髓基质细胞白血病基因治疗干扰素
- Ad/IFNγ转染的骨髓基质细胞的体内抗白血病作用被引量：1
- 2006年
- 目的观察Ad/IFNγ转染的骨髓基质细胞在小鼠体内表达IFNγ的特征及规律,并观察其抗白血病作用。方法Ad/IFNγ(MOI=50,MOI感染复数)体外转染骨髓基质细胞,并通过RT-PCR,ELISA检测骨髓基质细胞表达IFNγ;将K562细胞成瘤的裸鼠随机分为3组,分别给予静脉回输Ad/IFNγ转染的骨髓基质细胞、Ad/LacZ转染的骨髓基质细胞以及未转染的骨髓基质细胞,每只裸鼠的回输量为2×106个细胞,以RT-PCR,ELISA检测IFNγ在裸鼠体内表达的规律并观察其抑瘤效应及生存期。结果RT-PCR,ELISA于体外均能检测到IFNγ的表达。体内研究发现,Ad/IFNγ-骨髓基质细胞组在体内检测到的IFNγ主要分布在肝、脾、骨髓和肿瘤中,但在血液中未能检测到IFNγ的表达。并且,Ad/IFNγ-骨髓基质细胞于体内有明显的抑瘤效应,并能够延长其生存期。结论骨髓基质细胞能够将外源性IFNγ基因携带至肝、脾、骨髓等造血组织,也能携带至肿瘤组织,基因修饰的骨髓基质细胞为我们提供了治疗白血病的新的前景。
- 徐海鹏吕跃李晓青谭银多耿其荣陈晓勤
- 关键词：骨髓基质细胞基因治疗白血病
- Ad／IFN γ转染的骨髓基质细胞的体内抗白血病作用
- 目的:观察Ad／IFN γ转染的骨髓基质细胞在小鼠体内表达IFN γ的特征及规律,并观察其抗白血病作用。方法:Ad／IFN γ（MOI=50,MOI感染复数）体外转染骨髓基质细胞,并通过RT—PCR、ELISA检测骨髓基...
- 徐海鹏吕跃李晓青谭银多耿其荣陈晓勤
- 关键词：骨髓基质细胞基因治疗白血病
- 文献传递
- IFN-γ基因修饰的骨髓基质细胞体外抗白血病作用的实验研究
- 目的:研究重组人IFN—γ腺病毒（Ad／hIFN—γ） 在CML病人骨髓基质细胞（BMSCs）中的转染效率、IFN—γ表达,并进一步观察转染Ad／hlFN—γ的骨髓基质细胞体外抗白血病细胞株K562增殖和诱导K562细胞...
- 吕跃李晓青
- 关键词：骨髓基质细胞IFN-Γ
- 文献传递
- 自体白血病树突状细胞疫苗体内回输安全性和增强免疫功能作用研究被引量：4
- 2006年
- 目的:观察体外诱导的自体白血病树突状细胞(dendriticcell,DC)疫苗体内回输的安全性,及对体内免疫状态的影响。方法:20例白血病患者接受体外诱导的自体白血病树突状细胞疫苗的静脉回输。留取患者血清及外周血细胞分别行流式小球微阵列术(cytokinebeadarray,CBA)分析血清Th1/Th2因子IFNγ、IL2、IL4、IL6、IL10和TNFα浓度,流式细胞学(flowcytometricmethod,FCM)分析外周血T细胞亚群表达变化。结果:体外诱导的自体白血病DC疫苗回输后,临床未观察到明显的不良反应。第一次DC疫苗回输前及回输后24h比较,血清Th1/Th2因子浓度均升高,其中IL2、IL4、IL6和IFNγ升高显著,t值分别为2.576、2.033、2.777和2.053,P值分别为0.01、0.042、0.005和0.040。T亚群分析显示,CD4/CD8比值及NK比率升高,t值为2.040和1.988,P值为0.041和0.043。结论:自体白血病DC疫苗静脉回输安全可行,并可刺激患者体内的免疫反应,增强患者的免疫功能。
- 耿其荣吕跃夏建川樊慧杰徐海鹏蒋湘俐李晓青谭银多陈晓勤
- 关键词：白血病树突状细胞免疫治疗细胞因子
- Tet-off系统调控人IFNγ基因在小鼠骨髓基质细胞中的表达被引量：1
- 2006年
- 背景与目的:Tet-off系统是一个高效、低毒、具有严密开关功能的基因调控系统,本研究构建质粒pTre-IFNγ,初步探讨Tet-off系统调控人干扰素γ(interferon-gamma,IFNγ)基因在小鼠骨髓基质细胞中的表达。方法:SacⅡ、XbaⅠ双酶切载体pTre及目的基因,T4连接酶连接,重组体经双酶切、测序鉴定;脂质体介导pTet-off及pTre-IFNγ共转染小鼠骨髓基质细胞;RT-PCR法检测IFNγmRNA,ELISA法检测分泌到培养液中的IFNγ蛋白,分析共转染后IFNγ的分泌规律、共转染后48h中不同浓度盐酸四环素对IFNγ蛋白分泌的影响及在共转染后第48h加入盐酸四环素在不同时间阶段对IFNγ蛋白分泌的影响。结果:双酶切及测序证实质粒pTre-IFNγ构建成功;共转染后48hRT-PCR检测到IFNγmRNA表达;ELISA法示IFNγ蛋白分泌持续6天,第3天的分泌高峰为每1×106个细胞(720.09±241.51)pg;共转染后48h中蛋白分泌量随四环素浓度增加逐渐减少,10～100ng/ml四环素存在时蛋白分泌接近零;第48h时添加盐酸四环素后8h即能明显抑制IFNγ蛋白表达,延长作用时间,抑制效应加重。结论:Tet-off系统能迅速而高效地下调人IFNγ基因在小鼠骨髓基质细胞中的表达。
- 谭银多吕跃徐海鹏陈晓勤李晓青
- 关键词：小鼠骨髓基质细胞
