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rhIL-13在毕氏酵母中的表达及生物学活性研究被引量：4: 2001年; 目的　在甲醇营养型毕氏酵母蛋白质表达系统中高效表达重组人白介素 - 13(rhIL - 13) ,便于进一步研究开发。方法　根据酵母对密码子的偏爱性设计并人工合成了人IL - 13编码基因片段 ,经T4DNA连接酶、PCR技术连接形成IL - 13cDNA全长序列 ;将其插入 pPICZαA质粒中 ,构建成 pPICZαA -IL - 13表达载体 ;该载体经SacI线形化后以电转化法导入GS115酵母菌株中 ,经YPD平板Zeocine抗性筛选获得IL - 13表达阳性菌株 ;用WesternBlotting和ELISA检测发酵上清中IL - 13的抗原性和表达量 ,B9-11细胞株分析其生物学活性。结果　15 %SDS -PAGE显示重组人IL - 13分子量约 13kd ,Western -blotting证实为人IL - 13,ELISA测定在摇瓶培养上清表达量达 15 μg/ml,其生物学活性同标准品一样具有剂量依赖性的刺激B9-11细胞株增殖的作用。结论　成功获得IL - 13人工基因和稳定分泌蛋白的基因工程菌株 ,该重组蛋白的生物学活性达到标准品的要求。; 江阳黄伟达时宏珍张维延周璇张学光; 关键词：毕氏酵母生物学活性基因表达

人重组白介素13在毕氏酵母中的表达及其体外诱导DC分化作用的研究: 白细胞介素13是在1993年被命名的一种由活化T/_H2细胞分泌的细胞因子。其生物学活性与白细胞介素4有许多相似之处，可抑制单核细胞释放炎症因子；促进B细胞繁殖和转化；抑制...; 江阳; 关键词：毕氏酵母; 文献传递

人重组白细胞介素-13在毕氏酵母中的表达及其体外诱导DC分化作用的研究被引量：1: 2003年; 目的:在毕氏酵母中表达重组人IL-13并探讨其对DC的诱导作用。方法:用基因工程的方法人工合成IL-13的全长片段,并转化至毕氏酵母菌株GS115中,筛选后获得表达量相对较高且分泌稳定的rhIL-13基因工程菌株,用rhIL-13来替代IL-4体外诱导DC。结果:得到表达量达25 mg/L且分泌稳定的rhIL-13基因工程菌株;rhIL-13具有rhIL-4同样的体外诱导外周血单核细胞向DC增殖分化的作用,MHCII、CD1α、CD80、CD83、CD86等DC表型分析和混合淋巴细胞反应刺激T细胞增殖的作用与IL-4诱导得到的成熟DC并无显著差别,其所诱导的未成熟DC具有很强的摄取抗原能力。结论:获得表达量相对较高且分泌稳定的rhIL-13基因工程菌株,rhIL-13在体外可有效地诱导外周血单核细胞向DC分化。; 江阳时宏珍黄伟达谢炜赵文宝张学光; 关键词：毕氏酵母外周血单核细胞基因工程

毕氏酵母KM71和GS115发酵工艺的比较被引量：4: 2001年; 目的　探讨毕氏酵母菌KM71和GS1 1 5表达人可溶性FLt3配体、CD40L、IL - 1 3、IL -1 1及TNFα等外源蛋白的发酵工艺。方法　挑取KM71或GS1 1 5单个菌落在BMGY培养基中初步培养 ,在其A60 0 值达 2～ 6时 ,转入发酵罐中行高密度发酵。结果　KM71诱导表达时 ,对甲醇的需求较低 ,故添加甲醇速度应较慢 ,并应提高菌的接种浓度 ;而GS1 1 5菌株生长速度较快 ,代谢甲醇的能力较强 ,表达量相对较高。结论　KM71和GS1 1 5可用于不同性质外源蛋白的表达 ,表达量较高 ,是一种理想的表达系统。; 张维延江阳许志祥时宏珍李新燕强亦忠张学光; 关键词：毕氏酵母高密度发酵蛋白质表达

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江阳