张维延
- 作品数：14 被引量：36H指数：4
- 供职机构：苏州大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省科委自然科学基金江苏省社会发展科技计划更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学经济管理更多>>
- 大学生毕业实习中的问题与思考——基于苏州大学2014届毕业生的调查被引量：2
- 2014年
- 高校大学毕业生实习可以让大学生获得实践经验、增加就业能力,也可以使用人单位优先深入了解、选拔人才,减少招聘、培训成本,录用适合招聘岗位的合格人才,实现大学毕业生、用人单位"双赢"。在当前严峻的就业形势下,实习对大学生就业显得尤为重要。本文针对毕业生的实习情况、意向设计调研问卷,掌握当前大学生对就业形势及所学专业、职业规划的了解程度,掌握学生的实习意向的目标,从而有针对性地组织、推进大学毕业生实习,提升大学生就业竞争力,培养符合社会需求的创新实践技能型人才。
- 张维延
- 关键词：高校毕业生教学实习带薪实习就业能力就业指导
- 重组人IL-8在大肠杆菌中的表达及纯化工艺的优化
- 2005年
- 目的优化重组人IL-8(rhIL-8)大肠杆菌表达及纯化工艺,以便获得高纯度的重组蛋白。方法将已构建好的表达载体转化大肠杆菌HB101,经3-吲哚丙烯酸诱导,在发酵罐中进行表达,比较不同诱导剂浓度、温度、pH值及时间,以获得最佳表达工艺参数。离心收集菌体,超声破壁,收集包涵体和胞浆,其中包涵体经变性、复性处理,与包浆部分合并,经肝素亲和层析柱、阳离子交换柱和凝胶层析柱分离纯化,比较不同的洗脱条件,得到纯品,并对重组蛋白的纯度和生物学活性进行鉴定。结果用大肠杆菌HB101在发酵罐中表达rhIL-8,在30℃、pH为7.0的条件下加入50 mmol/L 3-吲哚丙烯酸,诱导28 h,得到约为100 mg/ml的高表达,其分泌的重组蛋白以包涵体和胞浆的形式存在,经三步层析纯化后,得到高纯度的rhIL-8(纯度>95%),经中性粒细胞趋化实验证实,所获IL-8具有良好的趋化白细胞迁移的作用。结论建立高效表达rhIL-8的原核表达和纯化工艺,所获的纯化IL-8具有良好的生物学活性。
- 张维延马泓冰徐颖张学光
- 关键词：白细胞介素-8大肠杆菌纯化
- 建立线粒体DNA中A3243G突变检测方法
- 2006年
- 目的建立正常人血线粒体DNA中A3243G突变的检测方法。方法采集正常人血液标本,抽提DNA,设计两对启动-关闭引物,采用聚合酶链反应(PCR)扩增mtDNA的高变区I(HVI)3221-3524bp片段。结果正常人血DNA中检出A3243G突变。结论该方法可在正常人血DNA中检出A3243G突变,可作为一种临床检测方法用于人群早期检查。
- 张维延
- 关键词：DNA线粒体突变聚合酶链反应
- 毕氏酵母KM71和GS115发酵工艺的比较被引量：4
- 2001年
- 目的 探讨毕氏酵母菌KM71和GS1 1 5表达人可溶性FLt3配体、CD40L、IL - 1 3、IL -1 1及TNFα等外源蛋白的发酵工艺。方法 挑取KM71或GS1 1 5单个菌落在BMGY培养基中初步培养 ,在其A60 0 值达 2～ 6时 ,转入发酵罐中行高密度发酵。结果 KM71诱导表达时 ,对甲醇的需求较低 ,故添加甲醇速度应较慢 ,并应提高菌的接种浓度 ;而GS1 1 5菌株生长速度较快 ,代谢甲醇的能力较强 ,表达量相对较高。结论 KM71和GS1 1 5可用于不同性质外源蛋白的表达 ,表达量较高 ,是一种理想的表达系统。
- 张维延江阳许志祥时宏珍李新燕强亦忠张学光
- 关键词：毕氏酵母高密度发酵蛋白质表达
- rhIL-13在毕氏酵母中的表达及生物学活性研究被引量：4
- 2001年
- 目的 在甲醇营养型毕氏酵母蛋白质表达系统中高效表达重组人白介素 - 13(rhIL - 13) ,便于进一步研究开发。方法 根据酵母对密码子的偏爱性设计并人工合成了人IL - 13编码基因片段 ,经T4DNA连接酶、PCR技术连接形成IL - 13cDNA全长序列 ;将其插入 pPICZαA质粒中 ,构建成 pPICZαA -IL - 13表达载体 ;该载体经SacI线形化后以电转化法导入GS115酵母菌株中 ,经YPD平板Zeocine抗性筛选获得IL - 13表达阳性菌株 ;用WesternBlotting和ELISA检测发酵上清中IL - 13的抗原性和表达量 ,B9-11细胞株分析其生物学活性。结果 15 %SDS -PAGE显示重组人IL - 13分子量约 13kd ,Western -blotting证实为人IL - 13,ELISA测定在摇瓶培养上清表达量达 15 μg/ml,其生物学活性同标准品一样具有剂量依赖性的刺激B9-11细胞株增殖的作用。结论 成功获得IL - 13人工基因和稳定分泌蛋白的基因工程菌株 ,该重组蛋白的生物学活性达到标准品的要求。
- 江阳黄伟达时宏珍张维延周璇张学光
- 关键词：毕氏酵母生物学活性基因表达
- 带薪实习创新应用型本科人才培养机制——以苏州大学为例
- 2015年
- "校企合作带薪实习项目"(英文简称S-UIPP),以企业需求为导向,以提升大学生就业技能为主旨,采用多种培训方式,全方位培养理论与实践并举的职场达人。不断增强学校与企业合作,推动学习与工作结合,促进学校与社会教育融合,创新地方综合性大学应用型本科人才培养机制。
- 张维延王清
- 关键词：带薪实习本科生
- 内皮抑制素抑制TNFα和IL-8介导的血管内皮细胞增殖及其表面粘附分子的表达被引量：2
- 2001年
- 目的：探讨重组人内皮抑制素对 ＴＮＦα和ＩＬ－８介导的人血管内皮细胞株（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌ ｏｆ ｖｅｓｓｅｌｓ，ＥＣＶ）细胞增殖的抑制作用，并观察内皮抑制素对ＥＣＶ表面粘附分子表达的影响。方法：用ＭＴＴ法测定ＥＣＶ的增殖；用间接免疫荧光法，在流式细胞仪上测定 ＥＣＶ表面粘附分子的表达。结果：内皮抑制素浓度在 １００～１００００ ｎｇ／ｍｌ时，能显著抑制ＥＣＶ的增殖（Ｐ＜０．０１），并抑制ＩＬ－８和ＴＮＦα介导的ＥＣＶ增殖，且呈剂量依赖性关系。内皮抑制素在 １００～１０００ ｎｇ／ｍｌ时可抑制内皮细胞表面ＣＤ６２Ｅ、ＣＤ４０等粘附分子的表达。结论：内皮抑制素不但可抑制血管内皮细胞的增殖，控制肿瘤新生血管的形成，而且可抑制血管内皮细胞表面粘附分子的表达，对肿瘤的转移亦可能起抑制作用。
- 徐颖许志祥朱剑昆於葛华张维延周照华刘继明蒋令瑜张学光
- 关键词：内皮抑制素内皮细胞细胞粘附分子TNFΑIL-8细胞增殖
- 4-1BBL在人高转移性肺癌细胞株95D的表达及其生物学作用
- 2008年
- 目的探讨共刺激分子4-1BBL在人高转移性肺癌细胞株95D细胞的表达并在体外分析4-1BBL逆向信号对95D细胞的功能影响。方法采用免疫荧光和流式细胞术及RT-PCR检测4-1BBL分子在95D细胞中的表达,进而在体外采用可溶性4-1BB-Ig融合蛋白激发4-1BBL逆向信号,分析95D表达膜型负性免疫调节分子CD95L、PD-L1和B7-H3的变化。结果95D细胞表达4-1BBL,4-1BB激发的逆向信号可上调95D细胞表达膜型CD95L、PD-L1和B7-H3。结论体外研究结果提示共刺激分子4-1BBL表达于肿瘤细胞,4-1BBL逆向信号可能通过上调表达肿瘤细胞表面的负性免疫分子,参与肿瘤细胞的免疫逃逸机制。
- 顾德学王萃张维延
- 关键词：4-1BBL肺癌逆向信号共刺激分子
- 大肠杆菌表达重组人IL-8分离纯化工艺的建立被引量：5
- 2000年
- 目的 建立重组人IL - 8(rhIL - 8)大肠杆菌表达后的高效分离纯化工艺 ,以便获得高纯度的重组蛋白。方法 将已构建好的表达载体转化大肠杆菌HB10 1,经IPTG诱导进行高效表达。将离心收集到的菌体用超声破壁分离 ,收集包涵体和胞浆 ,其中包涵体部分经变性和复性处理后 ,与胞浆部分合并 ,进行肝素亲和层析柱分离 ,再经离子交换柱和凝胶层析柱过滤 ,得到最终纯品。蛋白纯度用SDS -PAGE鉴定 ,ELISA法检测重组IL - 8含量。检测纯化后重组蛋白的生物学活性和热源质。结果 用大肠杆菌HB10 1表达重组人IL - 8,具有较高的表达量 (2 5mg/ml) ,其分泌的重组蛋白以包涵体和胞浆的形式存在。经多步柱层析纯化后 ,可获得高纯度的重组IL- 8蛋白 (纯度 >95 % )。该蛋白在体外具有趋化中性粒细胞游走的作用 ,兔温法检测热源质含量符合要求。结论 大肠杆菌可高效表达rhIL - 8,该工艺流程可从大肠杆菌载体中获得具有生物学活性的高纯度rhIL - 8。
- 刘继明张学光施勤张毅朱华亭徐影张维延强亦忠
- 关键词：大肠杆菌纯化
- 可溶性gp130酶联检测试剂盒的研制及其运用被引量：11
- 2002年
- 目的 :建立灵敏、特异、稳定和简便的人可溶性gp130 (sgp130 )酶标检测试剂盒。方法 :采用本室制备的鼠抗人gp130单抗T2作为包被单抗 ,另一株识别不同抗原位点的单抗T12经生物素 (biotin)标记后作为检测抗体 ,建立双单抗夹心的人sgp130酶标检测方法 ,并分别测定了 40例健康供血员、40例甲亢及 47例慢性肾炎患者血清中sgp130的含量。结果 :成功地研制了人sgp130酶联检测试剂盒 ,其灵敏度为 10ng/ml。该试剂盒 4℃放置 3个月 ,离散度 (CV) <± 7 6 %,回收率为95 %～ 111%,提示检测方法具有良好的灵敏度、稳定性和准确性。用该试剂盒测得的血清中sgp130含量的 95 %正常值范围为5 36 92～ 2 87 88(ng/ml) ,甲亢及慢性肾炎患者血清中sgp130的含量分别为 937 16± 2 17 5 9和 80 6 4 5± 138 4 7(ng/ml) ,明显高于正常对照者 (P <0 0 1)。结论 :建立的人sgp130酶标检测试剂盒 ,能够对血清中sgp130进行准确定量 ,可为临床gp130相关性疾病的辅助诊断、疗效估价和判断预后提供有价值的生物学参数 ,具有良好的运用前景。
- 朱华亭邱玉华谢炜王金香张维延张学光
- 关键词：白细胞介素6可溶性GP130酶联免疫吸附试验白细胞介素6受体
