牟静
- 作品数：14 被引量：22H指数：3
- 供职机构：四川农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：长江学者和创新团队发展计划国家农业科技成果转化资金项目公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 动物脑多头蚴病研究进展被引量：13
- 2010年
- 脑多头蚴病是由多头绦虫的幼虫寄生于家畜所引起的疾病,人也可感染,但相对较少。该病通常对动物是致命的,给世界许多地区的养殖业造成了巨大的经济损失。论文主要介绍了不同药物对该病的疗效,以及脑多头蚴不同抗原成分免疫原性、分子分类和相关抗原基因的研究进展。
- 牟静杨应东韦雷飞杨光友
- 关键词：脑多头蚴诊治分子生物学免疫学
- 多头带绦虫Tm18抗原基因的克隆、表达与免疫原性分析被引量：1
- 2011年
- 目的为分析多头带绦虫Tm18重组蛋白的免疫原性。方法利用RT-PCR技术从激活的多头带绦虫六钩蚴中扩增Tm18基因,将扩增产物亚克隆入pGEX-4T-1载体中,构建pGEX-4T-rTm18表达载体,转化至大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导表达融合蛋白;表达产物进行SDS-PAGE和Western-blot分析后,将纯化的Tm18重组蛋白免疫小鼠,用ELISA检测其血清抗体。结果多头带绦虫Tm18基因序列长为552 bp,包括1个396 bp的开放性阅读框。表达的重组蛋白大小约为39.4 kDa,与脑包虫患羊血清的免疫印迹分析呈阳性反应;小鼠免疫1周后血清中即可检测到抗Tm18蛋白的特异性抗体,并于免疫后第5周达到高峰。结论 Tm18重组蛋白具有较好的免疫原性,可作为脑包虫疫苗的候选抗原。
- 王颖旺杨应东杨光友牟静安晓雪阳爱国古小彬王淑贤边尧
- 关键词：克隆原核表达
- 长毛兔和獭兔白细胞介素-2基因的克隆与真核表达被引量：2
- 2010年
- 采用RT-PCR法从ConA诱导培养的德系安哥拉长毛兔和白色獭兔外周血淋巴细胞总RNA中扩增得到白细胞介素-2基因(IL-2),经序列测定表明,长毛兔和獭兔IL-2基因大小均为462 bp,两序列碱基组成无差异,该基因编码一个由153个氨基酸组成的多肽,包括20个氨基酸残基的信号肽和133个氨基酸残基的成熟肽。德系安哥拉长毛兔和白色獭兔IL-2基因间同源性为100%,与欧洲野兔及中国白兔的IL-2基因同源性分别为99.4%和98.9%。与GenBank中报道的猿、人、猕猴、狒狒、猫、马、大熊猫、犬、猪、水牛、山羊和鼠的IL-2核苷酸同源性分别为86.9%、86.7%、86.2%、86.1%、84.3%、84.3%、82.8%、82.6%、81.4%、76.9%、76.7%、75.0%。进化树分析发现,兔和猿的IL-2亲缘关系最近。通过脂质体法转染COS-7细胞,获得具有一定生物学活性的IL-2蛋白。
- 郑晶杨光友赖松家张晓谦廖艳古小彬安晓雪牟静
- 关键词：长毛兔獭兔白细胞介素2克隆真核表达
- 多头带绦虫四川株的生物学特性被引量：6
- 2010年
- 通过对2只试验犬在人工感染脑多头蚴后节片排出情况和对随机选取的50个孕卵节片内虫卵数量与大小的观察,以及用终浓度为10g/L次氯酸钠溶液,在显微镜下对虫卵孵化过程的观察,期望能为动物脑包虫病预防措施的制定以及进一步开展该虫的相关研究奠定基础。结果显示,2只试验犬分别在感染后的第45、50d开始排出节片且试验犬体内孕卵节片排出的持续时间分别为142d和54d,每日排节片数最高可达64片;孕卵节片内虫卵数最少约为780枚,最多约为16 035枚,平均为5 278.800±3 696.769枚,虫卵数量主要集中在2 000～6 000范围内,共占总节片数的52%;虫卵大小为(33.74±2.71)μm×(32.33±2.09)μm;虫卵的整个孵化过程大致需要4～5min,且随着孵化时间的延长虫卵原有的外形和整个胚膜结构消失,可见透明的六钩蚴。
- 牟静杨应东杨光友王颖旺安晓雪古小彬边尧付彦王淑贤
- 关键词：脑多头蚴孵化
- 多头带绦虫45W基因的克隆与表达
- 采用RT-PCR方法从脑多头蚴的六钩蚴总RNA中首次扩增出了一条约800bp的目的片段,将目的片段经胶回收后插入pMD18-T载体,转化至大肠杆菌DH5α,经菌落PCR鉴定、序列测定及分析,结果显示成功克隆得到了多头带绦...
- 牟静杨光友
- 文献传递
- 多头带绦虫Tm16基因的克隆表达与免疫原性分析被引量：2
- 2010年
- 为分析多头带绦虫Tm16重组蛋白的免疫原性,利用RT-PCR技术从激活的多头带绦虫六钩蚴中扩增Tm16基因,将扩增产物亚克隆入pET32a(+)载体中,构建pET32a-Tm16表达载体,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达融合蛋白;表达产物进行SDS-PAGE和Western-blot分析后,将纯化的Tm16重组蛋白免疫小鼠,用ELISA检测其血清抗体。结果显示,多头带绦虫Tm16基因序列长569bp,包括1个399bp的开放阅读框,与已报道的Tm16基因(序列号:EF672036)的序列同源性为99.8%。表达的重组蛋白大小约为30.69ku,与脑多头蚴病羊血清的免疫印迹分析呈阳性反应;小鼠免疫1周后血清中即可检测到抗Tm16蛋白的特异性抗体,并于免疫后第5周达到高峰。结果表明Tm16重组蛋白具有较好的免疫原性,可作为脑多头蚴病疫苗的候选抗原。
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- 关键词：克隆免疫原性
- 多头带绦虫六钩蚴Tm45W基因的克隆表达与免疫原性分析被引量：1
- 2011年
- 为分析多头带绦虫Tm45W重组蛋白的免疫原性,利用RT-PCR技术首次从激活的多头带绦虫六钩蚴中扩增出多头带绦虫Tm45W基因。将扩增产物重组于原核表达载体pET32a(+)中,构建pET32a-Tm45W表达载体,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达融合蛋白;表达产物进行SDS-PAGE和Western-blot分析后,将纯化的Tm45W重组蛋白免疫小鼠,用ELISA检测其血清抗体。结果显示,Tm45W基因全长为813bp,其开放阅读框为765bp,编码255个氨基酸,与多头带绦虫新疆株多头蚴45m基因(序列号:EU326106)的部分序列同源性为90.60%;表达的重组蛋白大小为45ku,与脑多头蚴病羊血清的免疫印迹分析呈阳性反应;小鼠免疫后第1周血清中即可检测到抗Tm45W蛋白的特异性抗体,并于免疫后第35天达到高峰。结果表明Tm45W重组蛋白具有较好的反应活性,能引起机体较强的体液免疫反应。
- 牟静杨应东杨光友王颖旺安晓雪阳爱国古小彬韦雷飞文建国王淑贤边尧
- 关键词：六钩蚴克隆原核表达免疫原性
- 多头带绦虫四川株六钩蚴Tm45W基因的克隆与原核表达
- 脑多头蚴病是由多头带绦虫的幼虫寄生于家畜所引起的疾病，该病是一种动物传染性疾病，人也有感染，但相对较少。该病给全世界许多地区的养羊业造成了巨大的经济损失。目前对该病的防治主要是以药物为主，但是随着分子生物学技术的不断发展...
- 牟静
- 关键词：六钩蚴原核表达BALB/C小鼠体液免疫
- 多头带绦虫45W基因的克隆与表达
- 牟静杨光友
- 多头带绦虫Tm7基因的表达及间接ELISA检测方法的建立被引量：4
- 2011年
- 以多头带绦虫Tm7重组蛋白为抗原,建立动物多头蚴病早期诊断方法。本研究从羊脑多头蚴原头节提取总RNA,采用RT-PCR技术首次扩增出Tm7基因的全序列,该基因的开放阅读框为207bp,编码68个氨基酸。将此基因克隆到pET-32a(+)载体,构建重组表达质粒pET-32a-Tm7,经转化大肠杆菌BL21(DE3)后IPTG诱导表达,用SDS-PAGE和Western blot检测表达产物。以纯化后的表达蛋白作为抗原,建立检测羊脑多头蚴病抗体的重组蛋白间接ELISA方法。研究结果表明,Tm7基因在大肠杆菌中成功表达,表达产物为约27ku的融合表达蛋白,该蛋白能识别羊脑多头蚴病阳性血清。建立的间接ELISA方法,检测敏感性可达93.3%,特异性达94.1%,研究结果表明Tm7重组蛋白可作为脑多头蚴病的诊断抗原。
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- 关键词：脑多头蚴重组抗原间接ELISA
