王中梅
- 作品数：19 被引量：65H指数：5
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- KIRs在HLA全相合造血干细胞移植供患者NK细胞上的分布被引量：1
- 2017年
- 目的研究杀伤细胞免疫球蛋白样受体(killer cell immnoglobulin-like receptors,KIRs)在无关人白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)全相合造血干细胞移植供患者的NK细胞上的分布差异。方法用第一代测序(sequenced-base typing,SBT)的方法对造血干细胞移植的供患者进行HLA分型,用序列特异性引物聚合酶链反应(SSP-PCR)对46组HLA全相合的供、患者进行KIR分型。结果 KIR基因型在46对供患者中都存在,16个基因型的分布频率在供患者分布无显著差异,KIR单体型中,AA的频率是29.34%,AB的频率是23.91%,BB的频率是46.75%,在供患者间的分布亦无差异。KIR-HLA错配11例,占24%。结论 KIR基因型在供患者中的分布频率无显著差异,在HLA全相合造血干细胞供患者间的KIR-HLA错配几率低。
- 王东梅王中梅李冬妹敬媛媛王洁倪蕾单晓燕
- 关键词：杀伤细胞免疫球蛋白样受体造血干细胞移植人类白细胞抗原
- Procleix TIGRIS核酸分析系统分析性能及操作性能确认研究被引量：10
- 2014年
- 目的在Procleix TIGRIS核酸分析系统（以下简称TIGRIS系统）正式用于血液筛查之前，验证其分析性能及操作性能，确认其在实验室的适用性，确保系统正式运行后得到有效使用，检测过程得到有效控制。方法本研究包含TIGRIS系统分析性能、操作性能的确认与验证。采用HIV-1、HCV、HBV的WHO标准株验证TIGRIS系统的分析灵敏度；采用低浓度HIV、HCV、HBV的溶血（FHb为5000mg／L）、乳糜血液（甘油三酯为5．61mmol／L）样本，评估TIGRIS系统的抗噪能力；采用高浓度阳性样本（〉10^6IU／mL）评估检测系统的抗交叉污染能力；从通量和压力测试、无效工作列表和无效检测、试剂稳定性等方面对检测系统的操作性能进行分析；采用PT血清盘对不同检测系统进行性能比对。结果采用TIGRIS系统，Procleix Ultrio分析试剂，本实验室对WHO的HIV-1、HCV、HBV3种标准病毒株的95％检出限分别为18．1IU／mL[（12．2～36．9）IU／mL]、7．4IU／mL[（4．7—15．2）IU／mL]、11．7IU／mL[（7．6～22．5）IU／mL]，Procleix Ultrio Discriminatory Assay分析试剂对HIV-1、HCV、HBV3种病毒的95％检出限分别为16．3IU／mL[（10．0—47．10）IU／mL]、5．8IU／mL[（3．5—14．2）IU／mL]、23．8IU／mL[（13．0—61．6）IU／mL]。符合试剂厂商对分析灵敏度的要求。采用Procleix Ultrio分析试剂进行核酸检测时，血红蛋白含量为5000mg/L的溶血血浆及乳糜（甘油三酯为5．61mmol／L）对低浓度HIV-1（浓度为40IU／mL）、HCV（10IU／mL）、HBV（20IU／mL）标本的分析性能没有显著影响。检测样本中高浓度阳性样本（〉10^6IU／mL）的比率为10％及以下时，使用TIGRIS系统进行检测不存在交叉污染现象。而在阳性标本比率增加到20％及50％时，会出现气溶胶所致的假阳性结果，但不会造成真正的样本污染。Procleix TIGRIS系统操作性能稳定，且不同设备之间性能的
- 姚凤兰汪德海查祎冷婵王中梅杨海平郑静白和谦葛红卫
- 关键词：SYSTEM核酸检测溶血乳糜血交叉污染
- 血站核酸检测实验室风险识别、评估及控制方法探讨被引量：13
- 2011年
- 《实验室-生物安全通用要求》（GB19489-2008）（以下简称《通用要求》）中指出实验室风险识别、评估及控制是实验室生物安全管理的重要部分[1]。血站核酸检测（NAT）实验室作为具有特殊安全要求的工作场所,在实验室生物安全管理体系建立过程中,需要采用一套系统的方法来识别、
- 冷婵王中梅于磊姚凤兰汪德海葛红卫
- 关键词：核酸检测风险评估
- 25个HLA-A*、B*、C*、DRB1*新等位基因
- 张志欣单小燕刘娜王丽君李伟何晓玫王中梅倪雷王琳崔爽邱艳高国静赵波涛龚志尹
- 该项目属于基础医学血液、移植免疫学范畴，主要内容是对70000多份样品进行了大量的筛选和鉴定，利用测序、分子克隆、流式分型、血清学和家系调查等等，共发现HLA-A*位点新等位基因5个：A*0128、A*0299、A*03...
- 关键词：
- 关键词：HLA等位基因移植免疫学多态性
- 新等位基因HLA-B^＊5812的认定
- 2007年
- 应用流式反向PCR-SSO和PCR-SSP基因分型技术发现可能的HLA新等位基因,对PCR产物进行HLA基因分型、DNA序列分析及克隆测序。发现一个样本的HLA-B位点结果异常,其核苷酸序列与已知所有HLA-B位点等位基因序列均不一致,与同源性最高的等位基因B*5801的差异在于第2外显子区域中的第69位碱基发生了G→T的替换,即"GCA→TCA",结果改变了第24位密码子编码的氨基酸,即"丙氨酸→丝氨酸"。判断该等位基因为HLA-B位点的一个新等位基因,已于2006年4月被WHOHLA因子命名委员会正式命名为HLA-B*5812。
- 何晓玫单小燕高新强李伟刘娜王丽君王中梅王琳倪蕾赵波涛龚治尹张志欣
- 关键词：PCR-SSP
- 人类白细胞抗原HLA-A／C座位间基因重组的发现被引量：2
- 2014年
- 目的：发现并证实两例人类白细胞抗原（human leukocyte antigen，HLA）复合体 HLA-A/C座位间的基因重组。方法采集拟进行 HLA-I，II类 A，B和DRB1位点进行低分辨分型的两个家系共计12人的外周血标本，采用聚合酶链反应-序列特异寡核苷酸探针技术（PCR-SSO）和聚合酶链反应-序列特异性引物技术（PCR-SSP）进行 HLA低分辨分型，然后用基于测序的分型方法（SBT）进行高分辨基因分型，再根据结果进行遗传家系分析研究，确定 HLA基因重组相关位点。结果通过 HLA低、高分辨基因分型的结果进行家系分析，其中一个家系 A＊30∶01/32∶01-C＊06∶02间发生了重组，另一个家系是 A＊11∶01/26∶01-C＊07∶06间发生了重组，两个家系均是在染色单体减数分裂时 HLA-A和-C基因座位间发生了重组，均是父亲的2条染色单体间发生了交换，重组后产生的新的单倍型又完整的遗传给了下一代。结论发现并证实两例中国汉族人群 HLA-A/C基因座位间的基因重组家系，为更深入研究 HLA重组机制奠定了坚实的基础。
- 王中梅刘娜龚治尹王丽君李伟单小燕
- 关键词：人类白细胞抗原基因重组
- 新等位基因HLA-B＊4060的认定
- 2007年
- 应用PCR-SSO基因分型技术发现可能的HLA新等位基因,对PCR产物进行测序及克隆测序,确认与最同源HLA等位基因序列的差异。发现一个样本的HLA-B位点结果异常,其核苷酸序列与已知所有HLA-B位点等位基因序列均不一致,与同源性最高的等位基因B*400102在第三外显子区域有7个碱基的差异。判断该等位基因为HLA-B位点的一个新等位基因,于2005年7月被WHOHLA因子命名委员会正式命名为HLA-B*4060。
- 何晓玫单小燕高新强李伟刘娜王丽君王中梅王琳倪蕾赵波涛龚治尹张志欣
- 关键词：等位基因HLA
- 新等位基因HLA-A*240212的认定被引量：1
- 2007年
- 目的发现和认定1个HLA新等位基因。方法应用PCR-SSO基因分型技术筛选可能的HLA新等位基因,PCR产物测序,确认与最同源HLA等位基因序列的差异。结果发现一个样品的HLA-A位点结果异常。其序列与已知所有HLA-A等位基因序列不一致,与同源性最高等位基因A*24020101的差异只是在第2外显子区域中的230位碱基发生了C→T碱基的替换,但并未改变第77密码子编码的氨基酸。结论该等位基因为HLA-A位点的1个新等位基因,已被WHO HLA因子命名委员会于2006年8月23日正式命名为HLA-A*240212。
- 刘娜单小燕李伟王丽君何小玫王中梅倪雷崔爽王琳张志欣
- 关键词：HLAPCR-SSO
- HLA新等位基因HLA-A*1127认定被引量：1
- 2009年
- 目的发现和认定HLA新等位基因HLA-A*1127。方法应用PCR-SSO基因分型技术筛选可能的HLA新等位基因,采用分子克隆和PCR产物直接测序方法得到核苷酸序列,通过软件分析基因序列及其与最同源HLA等位基因序列的差异。结果发现1个样品的HLA-A位点结果异常。其序列与已知所有HLA-A等位基因序列不一致,与同源性最高的等位基因A*1104的差异是在第三外显子区域的570位碱基发生G→C的替换,并导致了相应的166密码子由GAG→GAC,编码的氨基酸由谷氨酸(Glu)变成天冬氨酸(Asp);571位碱基发生T→G的替换,并导致相应的167密码子由TGG→GGG,编码的氨基酸由色氨酸(Trp)变成甘氨酸(Gly)。结论该等位基因为HLA新的等位基因,被WHOHLA因子命名委员会正式命名为HLA-A*1127。
- 王中梅王丽君何小枚倪蕾崔爽王琳李伟刘娜赵波涛龚治尹单小燕张志欣
- 关键词：基因克隆
- MICA多态性与白血病易感性的关联研究被引量：1
- 2021年
- 目的采用直接测序法对主要组织相容性复合物Ⅰ类链相关A基因(major histocompatibility complex classichain-related A,MICA)进行分型,了解MICA等位基因在正常人群、急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia,ALL)、急性髓性白血病(acute myeloid leukemia,AML)、骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)患者中分布的差异。方法选取2016年北京市红十字血液中心167份白血病患者DNA样本(病例组)和224份正常人样本(正常对照组),对MICA基因2~6外显子进行测序分型,并判读结果。分析MICA等位基因频率,跨膜区GCT重复次数,MICA-129Met/Val在正常对照组和病例组间的差异。结果发现19个MICA等位基因,与正常对照组比较,大多数MICA等位基因在各组间频率的差异无统计学意义。但MDS组的MICA*010:01频率明显低于正常对照组(P<0.01),而MDS组的MICA*019:01频率明显高于正常对照组、ALL组和AML组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论MICA*010:01和MICA*019:01的分布在MDS患者和正常人群间不同,提示这两个等位基因可能与MDS的易感性相关。
- 刘娜王东梅王洁李冬妹王中梅范成艳单小燕
- 关键词：多态性测序
