石萌
- 作品数：5 被引量：15H指数：2
- 供职机构：新疆大学生命科学与技术学院生物资源基因工程重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金新疆生物资源基因工程重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 应用RNA干扰技术对黄粉虫抗冻蛋白基因功能的研究
- 抗冻蛋白（antifreeze protein，AFP）是昆虫安全过冬的重要抗冻保护物质之一。然而，近年研究发现，荒漠拟步甲科昆虫抗冻蛋白基因在夏季也有表达，并且低温、高温、干旱等非生物胁迫均能诱导抗冻蛋白基因的表达。体...
- 石萌
- 关键词：黄粉虫抗冻蛋白RNA干扰非生物胁迫蛋白功能
- 文献传递
- 温度胁迫对荒漠昆虫小胸鳖甲(鞘翅目:拟步甲科)幼虫热激蛋白基因hsp70表达的影响被引量：4
- 2014年
- 热激蛋白在昆虫响应环境胁迫中发挥作用,然而在准噶尔盆地的拟步甲科特有种小胸鳖甲Microdera punctipennis幼虫对环境的适应过程中热激蛋白如何发挥作用尚不清楚。本研究利用实时荧光定量PCR(qRTPCR)技术测定了高低温处理后小胸鳖甲各龄幼虫热激蛋白hsp70基因的表达变化,以探讨小胸鳖甲幼虫hsp70对温度胁迫的响应方式。结果显示,在6-7龄幼虫中hsp70基因的表达水平是5龄之前幼虫的3-5倍,表明hsp70具有发育阶段性差异表达;各龄幼虫经42℃高温处理1 h后hsp70基因的表达量都迅速增加并达到高峰,其中2-5龄的响应非常强烈,可达对照的一千至数千倍;冷驯化低温5℃和10℃对不同龄期幼虫hsp70表达的影响有所不同,其中1龄和4龄幼虫对5℃和10℃均有上调响应,且1龄的响应程度远高于4龄;而7龄幼虫的hsp70表达则受5℃抑制,在10℃短时间内受到诱导,长时间则受到抑制;耐寒性测定结果显示,1龄和7龄幼虫无冷驯化现象,而4龄幼虫经过5℃或10℃冷驯化2 h可使其在-10℃的存活率提高25%,表明hsp70基因表达与小胸鳖甲耐寒性无直接相关性。本研究结果将有助于全面认识HSP70在荒漠昆虫环境适应性中的作用机制。
- 石萌刘晓静刘小宁马纪
- 关键词：幼虫温度胁迫HSP70基因
- 小胸鳖甲各龄期幼虫过冷却点的测定被引量：7
- 2012年
- 【目的】了解新疆荒漠甲虫准噶尔小胸鳖甲幼虫耐寒性的发育阶段性变化。【方法】对新疆荒漠甲虫准噶尔小胸鳖甲各龄期幼虫的过冷却点进行测定。【结果】同一虫期个体间的过冷却点出现不同程度的变异,但均服从正态分布。不同虫期的过冷却点差异显著,其中1龄的过冷却点最低(-19.4～-24.1℃),且个体差异不大。老熟幼虫的过冷却点个体差异较大,其中7龄幼虫中过冷却点在个体间差异达到15.7℃(-5.6～-21.3℃)。【结论】老龄幼虫最有可能是该虫在荒漠环境地区越冬的虫态。
- 刘晓静石萌马纪
- 关键词：幼虫过冷却点越冬耐寒性
- 温度对荒漠昆虫小胸鳖甲幼虫肌动蛋白基因表达的影响被引量：1
- 2014年
- 【目的】肌动蛋白β-actin是应用实时荧光定量PCR检测基因表达的常用内参基因,测定和分析荒漠昆虫小胸鳖甲幼虫中β-actin基因表达的稳定性,判断其是否可作为内参基因。【方法】选取不同龄期的小胸鳖甲幼虫经过42、5、10和15℃处理不同时间后,利用实时荧光定量PCR检测β-actin基因的表达,以基因绝对拷贝数的对数进行单因素方差分析。【结果】小胸鳖甲幼虫在不同龄期β-actin的表达有显著差异;1龄幼虫在不同温度处理后,β-actin的表达都有显著升高;4龄幼虫在不同温度处理后β-actin的表达基本上没有变化;7龄幼虫在10、15和42℃条件下β-actin的表达都显著升高,但5℃处理没有影响。【结论】小胸鳖甲幼虫的β-actin基因具有发育阶段性差异性表达特点,温度对不同龄期幼虫的β-actin基因表达的影响不同,β-actin基因可能不适合在小胸鳖甲幼虫基因表达分析中作为内参基因。
- 肖荣刘小静石萌马纪
- 关键词：荧光定量PCRΒ-ACTIN基因表达温度处理
- 利用细菌表达dsRNA介导黄粉虫抗冻蛋白基因的RNA干扰被引量：2
- 2014年
- RNA干扰(RNA interference,RNAi)是研究基因功能的一种重要工具。为了利用RNAi技术对黄粉虫抗冻蛋白(Antifreeze protein,AFP)基因的非抗冻功能进行验证,将黄粉虫抗冻蛋白基因Tmafp433的相应干扰片段构建至L4440干扰载体并转化大肠杆菌HT115(DE3)菌株,利用IPTG诱导表达特异的afp基因相应dsRNA,纯化后注射黄粉虫幼虫,通过实时荧光定量PCR检测afp基因在mRNA水平的变化。结果显示含有L4440-Tmafp重组质粒的HT115菌株可以表达干扰afp基因的dsRNA,命名为Tmafp-dsRNA。用Tmafp-dsRNA注射黄粉虫24 h后,Tmafps的表达受到显著抑制,相比对照下降了60.8%。本研究表明通过注射dsRNA可有效抑制黄粉虫afp基因的表达。
- 石萌刘小宁马纪
- 关键词：黄粉虫抗冻蛋白基因RNA干扰双链RNA
