祝仰廷
- 作品数：3 被引量：7H指数：1
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- PTD-Cyclin D1融合蛋白的原核表达及纯化
- 2004年
- 目的 :构建融合重组表达载体并对其进行诱导表达和蛋白纯化以获得大量重组融合蛋白 .方法 :通过PCR方法扩增出CyclinD1基因 ,克隆入 pMD 18T载体 ,进行测序分析 ,将该基因亚克隆入原核表达载体pET 16b中PTD的下游构建重组质粒pET16b PTD CCND1,转化感受态细胞BL2 1(DE3) ,经IPTG诱导表达重组融合蛋白 ,对表达产物进行SDS PAGE电泳和Westernblot检测分析 .结果 :构建了重组融合表达质粒 pET16b PTD CCND1,表达的融合蛋白经SDS PAGE分析 ,在约Mr38× 10 3 处出现了一条新生的蛋白条带 ,经灰度扫描检测 ,表达量约占菌体总蛋白的 2 2 % ,纯化后得到了目的蛋白 .结论 :成功地克隆了小鼠的CyclinD1基因并纯化了融合基因PTD CCND1的原核表达产物 .
- 祝仰廷邹练梁英民韩骅
- 关键词：细胞周期蛋白D1基因克隆蛋白纯化
- KyoT2与PIAS1体内外相互作用的研究及体外SUMO化系统的建立
- Notch蛋白是进化上非常保守的Notch信号途径的受体,通过与相邻细胞上表达的配体相互作用控制着细胞的分化和增生。当配体结合到Notch受体的胞外区时引起信号的激活,引发一系列的蛋白裂解反应,从胞膜上释放Notch的胞...
- 祝仰廷
- 关键词：NOTCH信号途径RBP-J泛素化
- 文献传递
- 肝癌组织、外周血细胞磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 mRNA表达的意义被引量：7
- 2006年
- 目的探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)mRNA表达对肝细胞肝癌(HCC)及其血液微转移的诊断价值。方法参照甲胎蛋白(AFP)mRNA,半定量与巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测41例HCC、41例癌旁组织、52例非瘤肝组织(41例远离癌灶组织与11例正常肝组织)及67例外周血的GPC3表达。结果半定量PCR显示组织与外周血细胞全部存在GPC3 mRNA表达,HCC、癌旁、非瘤肝组织的表达量分别为78.9±35.5、30.6±21.6、23.8±15.5;而AFP mRNA的表达量依次为61.2±32.6、31.5±23.6、21.2±15.9。各基因在HCC与其他组织中的表达量差异具有统计学意义(P<0.01),以各基因在非瘤肝的相对表达量上限(x-+1.96s)为界,HCC中GPC3 mRNA和AFP mRNA的高表达分别占80.5%与63.4%;至少一个基因高表达HCC达总数的92.7%,与AFPmRNA单独检测差异有统计学意义(P<0.01)。临床病理特征分析发现AFP mRNA与HCC分级及血清AFP浓度有关,GPC3 mRNA表达与HCC分级及侵袭性有关。67例外周血GPC3 mRNA的表达量为15.9±9.0,各类组织中GPC3 mRNA表达均强于相应的外周血表达(P<0.01)。外周血GPC3mRNA表达量在HCC组、非HCC组分别为16.1±8.3、15.6±10.2,组间差异无统计学意义;在HCC转移组、HCC无转移组的表达量各为16.0±9.0、16.3±7.7,组间差异无统计学意义。巢式PCR显示,AFP mRNA表达比率在HCC组与非HCC组各为56.1%、23.1%,组间差异有统计学意义(P=0.011);HCC转移组与无明显转移组各为80.9%、30.0%,组间差异有统计学意义(P=0.002)。结论GPC3 mRNA是潜在的HCC组织诊断指标,与AFP mRNA有明显的互补作用,两者联合检测可提高HCC的阳性检出率;外周血存在GPC3 mRNA的广泛表达,但其与HCC的转移复发无关,不能用于HCC微转移的检测。
- 李宝定赵青川祝仰廷张福琴窦科峰
- 关键词：核糖核酸肿瘤转移磷脂酰肌醇蛋白聚糖3甲胎蛋白
