索剑飞
- 作品数:5 被引量:3H指数:1
- 供职机构:河南科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金:河南省基础与前沿技术研究计划项目河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域:生物学农业科学医药卫生更多>>
- 人类胰岛素基因的克隆及其真核表达载体的构建被引量:1
- 2010年
- 从胎儿胰腺细胞中提取出总RNA作为模板,用特异性引物和RT-PCR法扩增INS基因的cDNA,PCR产物T-A克隆到T载体构建中间重组体pUC57-INS,其测序结果和Genbank公布的序列一致。HindIII和BamHI双酶切pUC57-INS后,将INS基因亚克隆到真核表达载体pEGFP-N1中,经PCR扩增、酶切分析和序列测定后证实了重组表达质粒pEGFP-N1-INS构建成功。这将为转人类胰岛素基因动物模型的建立及人类糖尿病的基因治疗奠定必要的基础。
- 索剑飞雷雪芹徐廷生赵绍杰韦光辉
- 关键词:克隆真核表达载体增强型绿色荧光蛋白
- 转人类胰岛素基因鸡的研究
- 糖尿病是由于体内胰岛素相对或绝对不足造成的一种常见的内分泌代谢疾病。目前糖尿病已经成为继心脑血管和肿瘤之后第三位严重危害人类健康的疾病。随着人类社会的发展,营养性肥胖、缺乏运动、老龄化等问题越来越严重,这将大大提高糖尿病...
- 索剑飞
- 关键词:克隆真核表达载体转基因鸡
- 文献传递
- 牛生长激素BGH基因的克隆及其真核表达载体pEGFP-N1-BGH的构建被引量:1
- 2010年
- 采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从11月龄的牛脑垂体组织中扩增出BGH基因片段,通过DNA重组技术将该基因片段重组于pEGFP-N1真核表达载体上,构建pEGFP-N1-BGH重组质粒。通过PCR扩增、酶切电泳分析和测序的方法对重组DNA进行鉴定,结果表明,成功构建了pEGFP-N1-BGH真核表达载体。
- 韦光辉徐廷生雷雪芹索剑飞
- 关键词:克隆
- 一种转人类肿瘤抑制基因绿色荧光蛋白载体的培植方法
- 一种转人类肿瘤抑制基因绿色荧光蛋白载体的培植方法,在GENBANK上参照人抗癌基因序列设计引物,采集肺癌早期病人外周血提取总RNA,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增P53片段,将该基因片段定向克隆到pMD18...
- 雷雪芹徐廷生李振红张静韦光辉索剑飞张广平席守平
- 文献传递
- 早期肺癌病人血液中p53的克隆及其pEGFP-N1-p53的构建被引量:1
- 2011年
- 首先用RT-PCR方法从早期肺癌病人的外周血中克隆出人抗癌基因p53,经测序确认为野生型后,通过酶切、连接、转化构建出扩增质粒pMD18-T-p53,然后构建出含增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的真核表达质粒pEGFP-N1-p53。pEGFP-N1-P53经限制性内切酶Hind III和BamH I酶切,酶切产物电泳结果显示的两个片段(1 188 bp和4 695 bp)和实验预期相符,测序结果表明:获得野生型人抗癌基因p53并构建了真核表达载体pEGFP-N1-p53。
- 李振红雷雪芹徐廷生张广平韦光辉索剑飞
- 关键词:克隆增强型绿色荧光蛋白