聂明非
- 作品数：3 被引量：13H指数：2
- 供职机构：东北农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 牛病毒性腹泻病毒E2蛋白和NS3蛋白单克隆抗体的制备及鉴定
- 牛病毒性腹泻病（Bovine viral diarrhea，BVD），是由牛病毒性腹泻病毒（Bovine viral diarrhea virus，BVDV）引起的一种疾病，症状主要表现为腹泻，急、慢性黏膜病，持续性感染...
- 聂明非
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒E2单克隆抗体NS3
- 文献传递
- 牛病毒性腹泻病毒NS3基因的序列分析、表达与抗原性鉴定被引量：8
- 2010年
- 本研究应用套式RT-PCR方法扩增出牛病毒性腹泻病毒VEDEVAC株编码NS3蛋白的基因,克隆至表达载体pET-30a(+),并进行测序。对瘟病毒属病毒NS3基因进行氨基酸差异性分析,显示平均P-distance为0.07,系统进化树分析表明VEDEVAC株隶属于BVDV1型。将构建成功的重组质粒转化大肠埃希氏菌Rosetta(DE3),在IPTG诱导下表达NS3重组蛋白,经Ni-NTA亲和层析纯化和尿素梯度透析后进行反应原性鉴定。Western blotting结果显示表达的重组蛋白可以与牛病毒性腹泻病毒阳性血清反应,并与猪瘟阳性血清有交叉反应,ELISA结果显示该重组蛋白具有良好的反应原性。所获得的蛋白为建立针对NS3抗体的ELISA检测方法奠定了基础。
- 李岩聂明非魏伟温凯贾莹霍慧王君伟
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒NS3蛋白进化树抗原性
- 牛病毒性腹泻病毒E2蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：3
- 2010年
- 为制备牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的特异性单克隆抗体(MAb),用含有BVDV E2基因的真核表达质粒pcDNA-E2免疫4周龄～6周龄BALB/c鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,以BVDV作为抗原建立间接ELISA筛选及4次连续克隆获得3株能稳定分泌抗E2MAb的杂交瘤细胞系,分别命名为2E2、3D12、4D6。MAb亚类鉴定表明,2E2和4D6为IgM类,3D12为IgG2a亚类,轻链均为κ链。经western blot和间接免疫荧光检测证明3株MAb针对E2的构象表位,并且3D12株MAb能与BVDV及猪瘟病毒(CSFV)结合,2E2和4D6MAb只能与BVDV结合。
- 聂明非李岩温凯贾莹王君伟
- 关键词：BVDVE2单克隆抗体CSFV
