覃红斌
- 作品数：29 被引量：180H指数：6
- 供职机构：湖北民族学院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金湖北省教育厅资助项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学理学更多>>
- shRNA抑制SGK1基因表达对人乳腺癌细胞系生物学特性的影响被引量：1
- 2012年
- 目的建立稳定抑制血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1(SGK1)表达的人乳腺癌细胞系MDA-MB-231,观察SGK1基因沉默对人乳腺癌细胞生物学特性的影响。方法构建针对SGK1的shRNA干扰质粒pGen-3-siSGK1和阴性对照质粒pGen-3-control。转染人乳腺癌细胞系MDA-MB-231,经G418筛选得到稳定抑制SGK1表达的乳腺癌细胞模型;实时定量PCR、免疫荧光以及Western blotting检测shRNA干扰组、阴性对照组及未转染组细胞中SGK1的表达;四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞体外生长能力;体外浸润实验、细胞迁移实验检测各组癌细胞的侵袭和转移。结果成功构建针对SGK1基因的shRNA干扰质粒,建立了稳定抑制SGK1表达的乳腺癌细胞模型;与阴性对照组和未转染组相比,肿瘤细胞中SGK1的表达水平显著降低(P<0.01);SGK1基因沉默后,人乳腺癌细胞的生长能力、浸润和迁移能力均明显降低(P<0.05)。实验中还发现抑制SGK1基因表达之后,β-catenin的含量也出现明显下降。结论抑制SGK1基因的表达可以显著抑制人乳腺癌细胞MDA-MB-231的生长,并降低其侵袭转移的能力,其中β-catenin参与了SGK1基因的抑制功能。
- 覃红斌张玲魏蕾张京伟
- 关键词：乳腺癌RNA干扰免疫印迹法
- SGK1基因沉默对人乳腺癌细胞生长抑制作用被引量：1
- 2013年
- 目的观察血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1(SGK1)基因沉默对人乳腺癌细胞生长抑制作用,为探讨乳腺癌治疗靶点提供实验依据。方法采用RNA干扰技术,以pGenesil 3为载体,建立针对SGK1的短发卡RNAC(shRNA)干扰质粒pGen-3-siSGK1和阴性对照质粒pGen-3-control,转染人乳腺癌细胞系MDA-MB-231,经筛选得到稳定SGK1基因沉默的乳腺癌细胞模型;采用实时定量PCR法、免疫荧光法以及蛋白免疫印迹法,检测shR-NA干扰组、阴性对照组及未转染组细胞中SGK1的表达;采用体外浸润实验、细胞迁移实验检测各组细胞的侵袭和转移能力,噻唑蓝比色法检测细胞体外生长能力。结果成功构建针对SGK1基因的shRNA干扰质粒,建立稳定的SGK1基因沉默乳腺癌细胞模型;模型细胞中SGK1蛋白表达量与对照组相比下降了60%(P<0.01);β-catenin与SGK1表达条带亮度均明显下降;PGen-3-siSGK1组SGK1 mRNA相对含量(RQ)为0.35,低于其他2组(分别为0.96、1.00),与pGen-3-control组相比下降了65.5%,差异有统计学意义(P<0.05),高倍显微镜视野下,pGen-3-siSGK1组的穿膜细胞数为22个/HPF,其他2组分别为66、62个/HPF;pGen-3-siSGK1组的细胞迁移率为17.01%,其他2组分别为72.22%、68.47%;凝血酶不同浓度下pGen-3-siSGK1组细胞生长均受到抑制,生长速度缓慢,其中0.1、1.0 U/mL浓度下,细胞含量(吸光度)分别为0.10、0.05,远低于其他2组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 SGK1基因沉默可抑制SGK1基因表达,可使人乳腺癌细胞MDA-MB-231株的浸润能力、迁移能力下降,抑制乳腺癌细胞生长。
- 覃红斌陈显兵甘华文张洁张玲
- 关键词：RNA干扰基因沉默乳腺癌
- 火棘对D-半乳糖致衰老小鼠抗氧化作用的实验研究被引量：1
- 2011年
- 目的研究火棘对D-半乳糖致衰老小鼠的抗氧化的作用。方法将小鼠随机分为生理盐水对照组(简称生理盐水组),AD模型组(简称模型组),药物(低、高剂量)组,每组10只,共40只。连续胃饲小鼠8周后取血液、肝脏,并将小鼠断头处死,制作海马10%组织匀浆,分别取血液、肝脏、脑,测定超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活力、丙二醛含量及单胺氧化酶活力。结果与对照组比较,药物显著增加血液和肝脏中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活力,显著降低丙二醛含量;显著降低脑中丙二醛含量,显著降低脑中单胺氧化酶活力;单胺氧化酶活力未见显著差异。结论火棘能增加血液和肝脏中超氧化物歧化酶活力,能降低血液、肝脏和脑组织中丙二醛活性,具有一定的抗氧化作用。
- 覃红斌魏蕾
- 关键词：火棘AD模型小鼠抗氧化
- 糖尿病足溃疡坏死组织修复临床分析被引量：3
- 2007年
- 覃红斌
- 关键词：溃疡糖尿病足胰岛素
- 银杏叶提取物提高老年大鼠免疫功能及抗衰老的实验研究被引量：14
- 2007年
- 目的:研究银杏叶提取物(GBE)对老年大鼠免疫功能及抗衰老的作用。方法:GBE连续胃饲老年大鼠7天后(0.4mg日/),检测T淋巴细胞增殖水平,NK细胞活性,抗体形成细胞分泌抗体的能力及血清IL-6水平;30天后取血液、肝脏、脑,测定超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力、丙二醛(MDA)含量及单胺氧化酶(MAO)活力。结果:与对照组比较,T淋巴细胞增殖水平,NK细胞活性,抗体形成细胞分泌抗体的能力及血清IL-6水平显著增加;同时显著增高血液和肝脏中SOD、GSH-Px活力,显著降低MDA含量。MAO活力未见显著差异;显著降低脑中MDA含量,显著降低脑中MAO活力。结论:GBE具有增强老年大鼠的免疫调节功能和抗衰老的作用。
- 覃红斌
- 关键词：银杏叶提取物老年大鼠免疫功能抗衰老
- 阿尔茨海默病大鼠海马胆固醇水平升高对tau蛋白磷酸化程度增加的影响被引量：3
- 2012年
- 目的观察海马胆固醇含量升高后tau蛋白磷酸化程度的变化,探讨其在阿尔茨海默病(AD)中可能的作用。方法水迷宫训练大鼠7 d筛选合格大鼠后,海马直接注射不同剂量胆固醇,72 h后水迷宫检测行为学变化,并以免疫印迹和免疫组织化学方法检测大鼠海马tau蛋白磷酸化水平。结果注射胆固醇后72 h,中高剂量组大鼠水迷宫潜伏期明显延长(P<0.01),tau蛋白PHF-1位点磷酸化水平明显增高(P<0.01),tau-1明显降低(P<0.01),总tau蛋白(R134d)无明显变化。结论海马胆固醇水平升高可导致tau蛋白磷酸化程度增加,可能参与AD的形成。
- 覃红斌魏蕾张京伟唐军民
- 关键词：AD胆固醇水平神经退行性变
- 银杏叶提取物对家兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用被引量：5
- 2008年
- 湖北民族学院医学院(恩施445000)目的:探讨银杏叶提取物(GBE)对家兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法:将30只家兔随机分为3组:即非缺血对照组(Ⅰ组)、缺血再灌注组(Ⅱ组)及缺血再灌注GBE治疗组(Ⅲ组),每组10只。观察缺血30 min和再灌注60 min丙二醛MDA、超氧化物歧化酶SOD、肌酸磷酸肌酶CPK、肌酸磷酸肌酶同工酶CK-MB的影响。结果:Ⅲ组家兔血清CPK、CK-MB、MDA值明显低于Ⅱ组,有极显著性差异P<0.01,心肌组织的SOD活性明显高于Ⅱ组,有极显著性差异P<0.01。结论:GBE能抑制脂质过氧化反应,保护抗氧化酶活力,减少心肌酶的释放,保护心肌细胞膜,减轻心肌缺血再灌注损伤。
- 覃红斌魏蕾
- 趋化因子UCK-1对小鼠骨骼肌趋化活性的研究
- 2001年
- 目的 研究趋化因子UCK - 1对小鼠骨骼肌的趋化活性、生物学效应及其作用机制。方法 将小鼠分为实验组、实验对照组和正常组 ,实验组又分为UCK - 1直接肌内注射于小鼠骨骼肌组 (肌注组 )、电针刺激加UCK - 1肌内注射组 (针刺组 ) ;实验对照组以肌内注射生理盐水替代UCK - 1 ,分别做镜下观察及部分酶染色分析。结果 正常组及实验对照组的小鼠骨骼肌细胞的形态及酸性磷酸酶 (AcP)、三磷酸腺苷酶 (ATPase)未见明显改变 ,而实验组的则有显著改变 ,尤以注射后第 1 0天最为显著 ,同时伴随着明显的单核 /巨噬细胞、肥大细胞等免疫细胞的浸润。结论 UCK -
- 覃红斌唐军民段先宇杨艺
- 关键词：骨骼肌趋化活性趋化因子动物实验细胞生物学
- 小鼠骨骼肌细胞分离培养的研究被引量：3
- 2001年
- 目的 完善骨骼肌细胞的分离培养方法 ,为有关实验提供足量的细胞。方法 通过改进骨骼肌细胞的取材、分离、消化、培养等技术 ,从细胞形态学及细胞计数观察细胞培养情况。结果 用改良的方法分离、培养的小鼠骨骼肌细胞 ,使原代培养的细胞成功率在 85 %以上 ,传代细胞的成功率在 95 %以上。结论 这种分离培养具有方法简便、成功率高、稳定性强。
- 覃红斌唐岩李银生唐军民
- 关键词：骨骼肌细胞细胞培养小鼠
- 中药提取物大黄素对人胃癌BGC-823细胞生物学表现的影响被引量：2
- 2010年
- 杜田锴覃红斌魏蕾
- 关键词：BGC-823细胞中药提取物细胞生物学抑制率
