许文玉 作品数:14 被引量:107 H指数:7 供职机构: 北京中医药大学 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 “重大新药创制”科技重大专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
心肌缺血血瘀证小型猪模型差异蛋白质组学研究 被引量:11 2009年 目的:利用基于荧光差异凝胶电泳(DIGE)技术的差异蛋白质组学的方法筛选心肌缺血血瘀证小型猪血浆差异表达的蛋白,以期发现心肌缺血血瘀证特征性的差异蛋白质或蛋白质群。方法:对模型动物施行冠脉Ameroid环缩术,通过动态观察,综合评价,明确术后4周动物表现为冠心病(心肌缺血)血瘀证稳定的时间点。4周时前腔静脉取血,枸橼酸钠抗凝并加入蛋白酶抑制剂,血样处理后进行荧光双向差异凝胶电泳(2D-DIGE),运用Decyder软件分析得到差异蛋白点,进行MALDI-TOF/TOF分析,获取蛋白样品的肽质量指纹图。结果:共筛选出31个差异表达蛋白质点,其中17个蛋白质点在4周模型组中下调,14个蛋白点上调。对其中15个蛋白点采用质谱技术成功鉴定。白蛋白、血红素蛋白、烟酸受体在4周模型组中低表达,CH4 and secrete domain of Swine IgM、mutated immunoglobulin heavy chain、肌球蛋白、磷脂酶C、白细胞抗原相关酪蛋白磷酸酶相关蛋白、磷酸核糖焦磷酸相关蛋白-1、Ig gamma4 chain constant region在4周模型组中高表达。结论:初步发现白蛋白、碱性磷酸酶、肌球蛋白、白细胞抗原相关酪蛋白磷酸酶相关蛋白、磷酸核糖焦磷酸合成酶相关蛋白1、血红素蛋白、烟酸受体、CH4 and secrete domain of Swine IgM、mutated immunoglobulin heavy chain、磷脂酶C可能与心肌缺血血瘀证相关,有待于进一步的验证及机制研究。 刘蕾 王伟 宋剑南 郭淑贞 马雅銮 陈冰 许文玉关键词:心肌缺血 血瘀证 蛋白质组学 气虚血瘀证大鼠模型缺血心肌蛋白质组学研究 被引量:15 2010年 目的:筛选气虚血瘀证特征性的差异蛋白质或蛋白质群。方法:采用左冠状动脉前降支结扎法制作气虚血瘀证模型,术后32d,取出气虚血瘀证组和假手术组心肌组织,进行双相电泳,并对差异蛋白进行质谱分析。结果:气虚血瘀证组与假手术组相比,有18个差异蛋白,其中4个表达上调,14个表达下调,对其中差异最显著的10个蛋白进行了肽质指纹图谱分析,其中8个与NCBInr数据库中相应的蛋白质覆盖率高,下调的为Malate Dehydrogenase 1,NAD(苹果酸脱氢酶)、NADH dehydrogenase Fe-S protein 8(NADH脱氢酶,铁硫蛋白)、myosin,light polypeptide 3(肌浆球蛋白轻链)、Cu-Zn superoxide dismutase(铜锌超氧化物歧化酶)、Gpx1 protein(谷胱甘肽过氧化物酶);上调的为alpha B-crystallin(αB-晶状体蛋白)、Protease(prosome,macropain)28subunit(蛋白酶前体或α亚基)、Tpi1 protein(磷酸丙糖异构酶)。结论:气虚血瘀证实质可能与能量代谢障碍、氧化损伤和应激反应有关。 刘涛 徐秋玲 王伟 赵明镜 于永新 许文玉 郭淑贞 刘蕾关键词:气虚血瘀 蛋白质组学 血瘀证的动物模型与生物学基础研究 王伟 赵和平 郭淑贞 赵慧辉 宋剑南 陈建新 张文生 王硕仁 赵明镜 刘蕾 仇琪 刘涛 许文玉 童元元 于永新 李宏 其其格 解华 李春 王勇 啜文静 该研究来源于国家“973计划”课题“血瘀证的蛋白质组学与家系研究”,编号为2003CB517105。主要技术要点为:(1)以中医四诊信息的临床意义为依据,创立了小型猪的宏观表征采集表及相应操作规范,修订、完善了大鼠宏观表...关键词:关键词:血瘀证 中医药 动物实验 心肌缺血血瘀证小型猪模型四诊信息采集的方法探索 目的探讨中华实验小型猪心肌缺血,血瘀证模型构建方法以及探讨其四诊信息采集方法。方法采用中国农业大学育种健康中华小型猪,体重25±4kg,月龄6~10个月,雌雄不限,动物在麻醉、无菌条件下开胸,分离前降支,在第一对角支远端... 王伟 刘蕾 郭淑贞 许文玉关键词:小型猪 慢性心肌缺血模型 四诊信息 文献传递 慢性心肌缺血血瘀证模型小型猪血栓素B_2、6-酮-前列腺素F_(1α)与心功能的变化及其相关性研究 被引量:6 2007年 目的:探讨慢性心肌缺血血瘀证模型小型猪血中血栓素B2、6-酮-前列腺素F1α、TNF-α浓度与心功能等指标的变化及其相关性。方法:采用病证结合的方法即动物左冠状动脉前降支第一间隔支起始部远端放置Ameroid缩窄环的方法复制慢性心肌缺血血瘀证模型。小型猪随机分为假手术组、模型组。应用心脏超声心动图测定心功能和心室重构;应用放免法测定血中血栓素B2(ThromboxaneB2,TXB2)、6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α,6-K-PGF1α)和TNF-α的浓度。结果:小型猪慢性心肌缺血后,血中TXB2、6-K-PGF1α、TNF-α浓度与假手术组相比都发生了明显变化。结论:TXB2与EDV呈负相关、与TNF-α呈正相关,TNF-α表达水平与EDV、ESV均呈负相关,随心功能的恶化,其表达量增高。说明血小板的激活程度与心功能有关,心功能越差,血小板的活性越高,血栓形成的危险性就越大,尤其易造成微血栓。 许文玉 王伟 刘蕾 于永新关键词:心肌缺血 血瘀证 血栓素B2 6-酮-前列腺素F1Α 复方养心滴丸对犬急性心肌缺血模型的影响 被引量:1 2005年 目的观察复方养心滴丸对犬急性心肌缺血模型的影响。方法采用结扎犬冠状动脉前降支法复制心肌缺血模型。经十二指肠给药,对照组给予同剂量蒸馏水。结果复方养心滴丸高剂量组、中剂量组心肌缺血区心外膜心电图ST段升高明显低于对照组。心肌缺血范围与对照组比较也有显著差异(P<005)。结论复方养心滴丸对梗塞心肌能起到保护作用。 欧喜燕 许文玉 张永和关键词:心肌缺血 麝鼠香对血瘀大鼠血液流变学的影响 被引量:6 2005年 许文玉 欧喜燕 张永和关键词:血液流变学 血瘀 慢性心肌缺血血瘀证模型小型猪TXB_2、6-K-PGF_(1α)与心功能的变化及其相关性研究 被引量:12 2008年 目的:探讨慢性心肌缺血血瘀证模型小型猪血中血栓素B2(Thromboxane B2,TXB2)、6-酮-前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α,6-K-PGF1α)、肿瘤坏死因子-a(TNF-α)浓度与心功能等指标的变化及其相关性。方法:采用病证结合的方法即动物左冠状动脉前降支第一间隔支起始部远端放置Ameroid缩窄环的方法复制慢性心肌缺血血瘀证模型。小型猪随机分为假手术组、模型组。应用心脏超声心动图测定心功能和心室重构;应用放免法测定血中血栓素TXB2、6-K-PGF1和TNF-α的浓度。结果:小型猪慢性心肌缺血后,血中TXB2、6-K-PGF1α、TNF-α浓度与假手术组相比都发生了明显变化。结论:TXB2与EDV呈负相关、与TNF-α呈正相关,TNF-α表达水平与EDV、ESV均呈负相关,随心功能的恶化,其表达量增高。说明血小板的激活程度与心功能有关,心功能越差,血小板的活性越高,血栓形成的危险性就越大,尤其易造成微血栓。 许文玉 王伟 刘蕾 于永新关键词:心肌缺血 血瘀证 血栓素B2 6-酮-前列腺素F1Α 小型猪冠心病(心肌缺血)血瘀证模型血液流变学及超声评价 被引量:34 2007年 目的:观察小型猪冠心病(心肌缺血)血瘀证模型血液流变学及心脏超声的变化,初步探讨其作为该类模型诊断参考因素的可能性。方法:①中华小型猪前降支放置Ameroid缩窄环造成慢性心肌缺血模型,通过动态观察,参考1986年中国中西医结合学会活血化瘀专业委员会制订的血瘀证诊断标准进行诊断,确定动物表现为冠心病(心肌缺血)血瘀证的时间点作为后续的观察时间窗。②分别在小型猪术前及术后4周,前腔静脉采血5m l,分析血液流变学的变化,包括150、38、10、5 s-1切变率下的全血黏度、血浆黏度、压积测定值、聚集指数、聚集指数积分面积、变形指数、变形指数积分面积等。③分别在小型猪术前及术后4周进行心脏超声检查。评价采用动态图像观测与瞬时停祯结合的方法,检查二维、M型及多普勒超声心动图。采用左室舒张末内径(LVEDd),左室收缩末内径(LVED s),室间隔厚度,左室前壁厚度(二尖瓣、乳头肌、心尖部3个水平),左室舒张末容积(EDV),左室收缩末容积(ESV),二尖瓣E峰,A峰等指标,并计算出E/A,射血分数(EF),短轴缩短率(FS),每搏输出量(SV),收缩期室壁增厚率(△T%)等值,以评价心肌整体与局部的收缩、舒张功能。结果:①动物在术后4周可诊断为冠心病(心肌缺血)血瘀证。②动物在术后4周,不同切变率150、38、10 s-1下,与正常组相比,全血黏度均显著增高(P<0.05),同时,压积测定值差异极显著(P<0.01)。③与正常组相比,模型组动物左室前壁乳头肌水平、心尖水平收缩末及舒张末厚度均显著变薄(P<0.01),同时△T%显著减小,在乳头肌水平表现为运动减弱,在心尖水平则表现为运动消失,伴有室壁膨出。前室间隔、左室前壁二尖瓣水平收缩末及舒张末室壁厚度及△T%无明显变化。模型组动物LVEDd、EDV、LVED s、ESV均显著增大(P<0.05),其中ESV的变化最为明显(P<0.01);模型组左室射血分� 郭淑贞 王伟 刘涛 刘蕾 童元元 许文玉 于永新 赵慧辉 李宏关键词:冠心病 心肌缺血 血瘀证 血液流变学 超声 慢性心肌缺血模型小型猪的证候特点及左室重构的机制研究 被引量:1 2008年 目的探讨慢性心肌缺血模型小型猪的舌象特点及心脏的结构和功能变化。方法采用动物左冠状动脉前降支第一间隔支起始部远端放置Ameroid缩窄环的方法复制慢性心肌缺血模型。小型猪随机分为假手术组和模型组。术后4周、8周从动物的一般状态、舌象等方面观察中医证候的特点,应用心脏超声心动图测定心功能,用放免法测定血中TNF-α的浓度,免疫印迹法观察MMP-2、TIMP-2蛋白的表达变化。结果小型猪慢性心肌缺血后,血中TNF-α浓度,心肌组织MMP-2、TIMP-2蛋白表达水平与同期假手术组相比都发生了明显变化。结论术后4~8周为该疾病模型动物出现血瘀证的时间点,其病理学表现为心肌间质胶原网络被破坏、心脏结构发生改变,但未影响到心脏的功能。 许文玉 王伟 刘蕾 于永新关键词:心肌缺血 MMP-2 TIMP-2