刘蕾 作品数:20 被引量:239 H指数:11 供职机构: 北京中医药大学 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 “重大新药创制”科技重大专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
大鼠宏观体征采集探讨证候的方法学评述 被引量:15 2009年 从三个方面探讨大鼠宏观体征采集的内容和方法。首先是从外观表征入手,通过研究者直接观察获得模型动物的四诊信息,如形体、活动、皮毛色泽、眼睛、尾部、爪甲、唇、二便等;其次通过借助仪器获得某方面的数值或图像等变化来反映动物宏观体征,如测定体温、心电图、电生理等;最后从方法学角度来评价大鼠宏观体征,具体分为定量方法和半定量方法。通过对宏观体征的观察采集,探索出一套利用动物模型自身的宏观体征来评定其证候属性的思路和方法。 刘蕾 郭淑贞 陈建新 仇琪 李春 王伟关键词:四诊信息 心肌缺血血瘀证小型猪模型差异蛋白质组学研究 被引量:11 2009年 目的:利用基于荧光差异凝胶电泳(DIGE)技术的差异蛋白质组学的方法筛选心肌缺血血瘀证小型猪血浆差异表达的蛋白,以期发现心肌缺血血瘀证特征性的差异蛋白质或蛋白质群。方法:对模型动物施行冠脉Ameroid环缩术,通过动态观察,综合评价,明确术后4周动物表现为冠心病(心肌缺血)血瘀证稳定的时间点。4周时前腔静脉取血,枸橼酸钠抗凝并加入蛋白酶抑制剂,血样处理后进行荧光双向差异凝胶电泳(2D-DIGE),运用Decyder软件分析得到差异蛋白点,进行MALDI-TOF/TOF分析,获取蛋白样品的肽质量指纹图。结果:共筛选出31个差异表达蛋白质点,其中17个蛋白质点在4周模型组中下调,14个蛋白点上调。对其中15个蛋白点采用质谱技术成功鉴定。白蛋白、血红素蛋白、烟酸受体在4周模型组中低表达,CH4 and secrete domain of Swine IgM、mutated immunoglobulin heavy chain、肌球蛋白、磷脂酶C、白细胞抗原相关酪蛋白磷酸酶相关蛋白、磷酸核糖焦磷酸相关蛋白-1、Ig gamma4 chain constant region在4周模型组中高表达。结论:初步发现白蛋白、碱性磷酸酶、肌球蛋白、白细胞抗原相关酪蛋白磷酸酶相关蛋白、磷酸核糖焦磷酸合成酶相关蛋白1、血红素蛋白、烟酸受体、CH4 and secrete domain of Swine IgM、mutated immunoglobulin heavy chain、磷脂酶C可能与心肌缺血血瘀证相关,有待于进一步的验证及机制研究。 刘蕾 王伟 宋剑南 郭淑贞 马雅銮 陈冰 许文玉关键词:心肌缺血 血瘀证 蛋白质组学 熏烟叠加气管内滴注脂多糖致慢性阻塞性肺病大鼠动物模型基本证候判定 被引量:5 2011年 目的:对熏烟叠加气管内滴注脂多糖(LPS)所致慢性阻塞性肺病(COPD)急性期大鼠模型进行中医基本证候的判定。方法:通过动态采集模型动物呼吸、活动、皮毛、二便等宏观体征;运用病理形态学观察模型动物肺及支气管组织的微观变化。以临床证候诊断标准为依据,根据动物宏观体征、病理学变化等信息,通过与临床COPD各证候诊断标准进行同质性比较与鉴别,进而对动物模型进行证候属性的判定。结果:模型动物出现呼吸喘促,咳嗽,口鼻气管内分泌物明显增多,大便干结,小便颜色由淡黄色变为亮黄色,被毛灰黄无光泽,头部毛发脱落稀疏,饮食明显减少,体重增长明显减慢,舌体及爪甲颜色均较对照组深。结论:通过致病之因、模型动物的证候体征特点以及与临床各证型的比较与鉴别可知采用熏烟叠加气管内滴注LPS复合法构建COPD急性期模型与临床上COPD"痰热壅肺证"证候特点最为接近。 刘蕾 李宇航 刘妙 贾旭 孙燕 全贞雪 马小鑫 刘晓辉 王蔚 周晓卫关键词:慢性阻塞性肺病 动物模型 证候 气虚血瘀证大鼠模型缺血心肌蛋白质组学研究 被引量:15 2010年 目的:筛选气虚血瘀证特征性的差异蛋白质或蛋白质群。方法:采用左冠状动脉前降支结扎法制作气虚血瘀证模型,术后32d,取出气虚血瘀证组和假手术组心肌组织,进行双相电泳,并对差异蛋白进行质谱分析。结果:气虚血瘀证组与假手术组相比,有18个差异蛋白,其中4个表达上调,14个表达下调,对其中差异最显著的10个蛋白进行了肽质指纹图谱分析,其中8个与NCBInr数据库中相应的蛋白质覆盖率高,下调的为Malate Dehydrogenase 1,NAD(苹果酸脱氢酶)、NADH dehydrogenase Fe-S protein 8(NADH脱氢酶,铁硫蛋白)、myosin,light polypeptide 3(肌浆球蛋白轻链)、Cu-Zn superoxide dismutase(铜锌超氧化物歧化酶)、Gpx1 protein(谷胱甘肽过氧化物酶);上调的为alpha B-crystallin(αB-晶状体蛋白)、Protease(prosome,macropain)28subunit(蛋白酶前体或α亚基)、Tpi1 protein(磷酸丙糖异构酶)。结论:气虚血瘀证实质可能与能量代谢障碍、氧化损伤和应激反应有关。 刘涛 徐秋玲 王伟 赵明镜 于永新 许文玉 郭淑贞 刘蕾关键词:气虚血瘀 蛋白质组学 慢性心肌缺血血瘀证模型小型猪血栓素B_2、6-酮-前列腺素F_(1α)与心功能的变化及其相关性研究 被引量:6 2007年 目的:探讨慢性心肌缺血血瘀证模型小型猪血中血栓素B2、6-酮-前列腺素F1α、TNF-α浓度与心功能等指标的变化及其相关性。方法:采用病证结合的方法即动物左冠状动脉前降支第一间隔支起始部远端放置Ameroid缩窄环的方法复制慢性心肌缺血血瘀证模型。小型猪随机分为假手术组、模型组。应用心脏超声心动图测定心功能和心室重构;应用放免法测定血中血栓素B2(ThromboxaneB2,TXB2)、6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α,6-K-PGF1α)和TNF-α的浓度。结果:小型猪慢性心肌缺血后,血中TXB2、6-K-PGF1α、TNF-α浓度与假手术组相比都发生了明显变化。结论:TXB2与EDV呈负相关、与TNF-α呈正相关,TNF-α表达水平与EDV、ESV均呈负相关,随心功能的恶化,其表达量增高。说明血小板的激活程度与心功能有关,心功能越差,血小板的活性越高,血栓形成的危险性就越大,尤其易造成微血栓。 许文玉 王伟 刘蕾 于永新关键词:心肌缺血 血瘀证 血栓素B2 6-酮-前列腺素F1Α 小型猪冠心病(心肌缺血)血瘀证模型血液流变学及超声评价 被引量:34 2007年 目的:观察小型猪冠心病(心肌缺血)血瘀证模型血液流变学及心脏超声的变化,初步探讨其作为该类模型诊断参考因素的可能性。方法:①中华小型猪前降支放置Ameroid缩窄环造成慢性心肌缺血模型,通过动态观察,参考1986年中国中西医结合学会活血化瘀专业委员会制订的血瘀证诊断标准进行诊断,确定动物表现为冠心病(心肌缺血)血瘀证的时间点作为后续的观察时间窗。②分别在小型猪术前及术后4周,前腔静脉采血5m l,分析血液流变学的变化,包括150、38、10、5 s-1切变率下的全血黏度、血浆黏度、压积测定值、聚集指数、聚集指数积分面积、变形指数、变形指数积分面积等。③分别在小型猪术前及术后4周进行心脏超声检查。评价采用动态图像观测与瞬时停祯结合的方法,检查二维、M型及多普勒超声心动图。采用左室舒张末内径(LVEDd),左室收缩末内径(LVED s),室间隔厚度,左室前壁厚度(二尖瓣、乳头肌、心尖部3个水平),左室舒张末容积(EDV),左室收缩末容积(ESV),二尖瓣E峰,A峰等指标,并计算出E/A,射血分数(EF),短轴缩短率(FS),每搏输出量(SV),收缩期室壁增厚率(△T%)等值,以评价心肌整体与局部的收缩、舒张功能。结果:①动物在术后4周可诊断为冠心病(心肌缺血)血瘀证。②动物在术后4周,不同切变率150、38、10 s-1下,与正常组相比,全血黏度均显著增高(P<0.05),同时,压积测定值差异极显著(P<0.01)。③与正常组相比,模型组动物左室前壁乳头肌水平、心尖水平收缩末及舒张末厚度均显著变薄(P<0.01),同时△T%显著减小,在乳头肌水平表现为运动减弱,在心尖水平则表现为运动消失,伴有室壁膨出。前室间隔、左室前壁二尖瓣水平收缩末及舒张末室壁厚度及△T%无明显变化。模型组动物LVEDd、EDV、LVED s、ESV均显著增大(P<0.05),其中ESV的变化最为明显(P<0.01);模型组左室射血分� 郭淑贞 王伟 刘涛 刘蕾 童元元 许文玉 于永新 赵慧辉 李宏关键词:冠心病 心肌缺血 血瘀证 血液流变学 超声 慢性心肌缺血血瘀证模型小型猪TXB_2、6-K-PGF_(1α)与心功能的变化及其相关性研究 被引量:12 2008年 目的:探讨慢性心肌缺血血瘀证模型小型猪血中血栓素B2(Thromboxane B2,TXB2)、6-酮-前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α,6-K-PGF1α)、肿瘤坏死因子-a(TNF-α)浓度与心功能等指标的变化及其相关性。方法:采用病证结合的方法即动物左冠状动脉前降支第一间隔支起始部远端放置Ameroid缩窄环的方法复制慢性心肌缺血血瘀证模型。小型猪随机分为假手术组、模型组。应用心脏超声心动图测定心功能和心室重构;应用放免法测定血中血栓素TXB2、6-K-PGF1和TNF-α的浓度。结果:小型猪慢性心肌缺血后,血中TXB2、6-K-PGF1α、TNF-α浓度与假手术组相比都发生了明显变化。结论:TXB2与EDV呈负相关、与TNF-α呈正相关,TNF-α表达水平与EDV、ESV均呈负相关,随心功能的恶化,其表达量增高。说明血小板的激活程度与心功能有关,心功能越差,血小板的活性越高,血栓形成的危险性就越大,尤其易造成微血栓。 许文玉 王伟 刘蕾 于永新关键词:心肌缺血 血瘀证 血栓素B2 6-酮-前列腺素F1Α “通利大肠”对COPD大鼠气道重构的影响 被引量:14 2012年 目的:观察"通利大肠"对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠肺组织的基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、转化生长因子-β(TGF-β)蛋白表达和细胞信号转导分子Smad3mRNA,Smad7mRNA基因水平变化,从气道重构角度探讨COPD"从肠论治"的效应机制。方法:用气管注射脂多糖加熏香烟联合造模方法建立COPD大鼠模型,随机分为正常组、模型组、治肠组、治肺组及肺肠同治组。正常组、模型组灌胃10 mL.kg-1纯净水,各给药组灌胃相应中药(治肠组、治肺组、肺肠同治组的药量分别为1.50,4.25,5.75 g.kg-1),连续14 d。用免疫组化法测量肺组织中MMP-9,TGF-β蛋白阳性表达面积比率,用实时荧光定量PCR法测定肺组织Smad3和Smad7的mRNA水平。结果:①与正常组比较,模型组大鼠肺组织MMP-9和TGF-β表达增强,蛋白阳性面积比率值分别为1.231%和3.002%,Smad3mRNA水平升高至14.804,Smad7mRNA水平降低至0.2(P<0.01)。②与模型组比较,治肠组肺组织MMP-9,TGF-β分别为0.944%和1.989%,二者表达减少,Smad3mRNA水平降低,Smad7mRNA水平升高(P<0.05或P<0.01)。③与治肺组比较,肺肠同治组的肺组织TGF-β表达和Smad3mRNA水平减少,而Smad7mRNA水平升高至0.784(P<0.01),MMP-9的表达则有减少的趋势。结论:通利大肠或在治肺的基础上增加通利大肠,能抑制慢性阻塞性肺疾病模型大鼠的气道重构,从而减轻气道阻塞,改善通气障碍及肺功能,这可能是COPD"从肠论治"效应产生的作用环节之一。 全贞雪 钟相根 李宇航 张前 贾旭 解华 周晓卫 马小鑫 刘晓辉 田彦 王蔚 刘蕾 刘妙 王毅 徐云 田浩君关键词:慢性阻塞性肺疾病 宣白承气汤 气道重构 基于功能蛋白质组学技术筛选心肌缺血血瘀证小型猪血浆差异蛋白质群 目的:本研究利用基于荧光差异凝胶电泳(DIGE)技术的差异蛋白质组学的方法筛选心肌缺血血瘀证小型猪血浆差异表达的蛋白,以期发现心肌缺血血瘀证特征性的差异蛋白质或蛋白质群.方法:对模型动物施行冠脉Ameroid环缩术,通过... 刘蕾关键词:血瘀证 动物试验 蛋白质组学 基于Shannon熵互信息的冠心病证候相关理化指标文献研究 被引量:13 2009年 目的:通过对冠心病中医证候的相关理化指标有关文献的系统评价研究,为中医证候的诊断客观化与生物学基础的进一步研究提供依据。方法:对现有冠心病证候相关理化指标文献进行检索,采用基于Shannon熵互信息的数据挖掘方法,对冠心病证候与理化指标的复杂相关性进行分析。结果:文献中提到的13个证候要素中,有相关理化指标研究的证候要素包括气虚、血瘀、痰浊、阴虚、寒凝、阳虚、气滞等7个,涉及理化指标134个,经过分析计算,得到与各证候要素相关性排名前10位的理化指标。结论:中医证候和理化指标间存在复杂的联系,基于Shannon熵互信息数据挖掘技术可以揭示这种复杂关系。 仇琪 郭淑贞 陈建新 赵慧辉 刘蕾 陈婵 王娟 王伟关键词:冠心病 证候 互信息 数据挖掘