贾雪
- 作品数：7 被引量：26H指数：2
- 供职机构：北京协和医院更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- WU多瘤病毒衣壳蛋白原核表达及初步分析
- 2011年
- 目的获得WU多瘤病毒重组衣壳蛋白，分析其抗原性，筛选具有诊断价值的抗原。方法采用PCR技术扩增WU多瘤病毒衣壳蛋白VP1、VP2和VP3的基因片段，并将目的基因插入PGEX-20T表达载体，转化大肠杆菌B121（DE3）后诱导表达。用免疫印迹法对表达蛋白进行鉴定和分析并用临床样本进行初步验证。结果重组质粒在BL21（DE3）菌株中经IPTG诱导、SDS—PAGE和免疫印迹鉴定显示在相对分子质量（Mr）69×10^3、63×10^3和56×10^3处出现清晰条带，重组质粒经双酶切鉴定，表达产物经GST标签鉴定均正确。16份呼吸道分泌物WU多瘤病毒核酸阳性血清标本和70份阴性标本免疫印迹分析表明，重组蛋白具有良好的抗原性。结论成功构建了WU多瘤病毒衣壳蛋白VP1、VP2和VP3的表达载体，表达的重组蛋白具有良好的抗原性，为进一步研究提供了资料。
- 张银辉王琼贾雪林广裕黄烈刘建陆学东
- 关键词：WU多瘤病毒衣壳蛋白原核表达
- 新型人冠状病毒NL63在急性呼吸道感染婴幼儿中的检出及鉴定被引量：2
- 2010年
- 目的了解深圳和汕头地区婴幼儿急性呼吸道感染病原体中新型人冠状病毒NL63(HCoV NL63)的存在状况,初步探讨其流行规律及其所致疾病的临床特征。方法收集急性呼吸道感染婴幼儿呼吸道分泌物标本690份。应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测HCoV-NL63的1b基因,筛选出的阳性标本再进行HCoV-NL63的1a基因检测,未检测出HCoV-NL631a基因的阳性标本再进行核苷酸测序鉴定。同时,在所有HCoV-NL63阳性标本中检测流感病毒A、B型,副流感病毒1、3型,呼吸道合胞病毒、鼻病毒、人偏肺病毒、腺病毒和人博卡病毒。结果 690份标本中,共检出HCoV-NL63阳性7份,阳性率为1.0%(7/690),均为单一病毒感染。7份HCoV-NL63阳性产物的核苷酸序列同源性为86.0%～97.4%,分属两种不同的基因簇。婴幼儿感染者可表现为上呼吸道或下呼吸道感染症状;感染高峰期在夏、秋季节,以10月感染率最高(3.8%)。结论深圳、汕头地区婴幼儿急性呼吸道感染病原体中存在HCoV-NL63。
- 刘玢王琼林广裕吴意胡叶养贾雪刘爱玲陆学东
- 关键词：呼吸道感染逆转录聚合酶链反应
- 人偏肺病毒亚克隆的构建与鉴定被引量：1
- 2012年
- 目的从临床标本中扩增人偏肺病毒（hMPV）基因片段进行亚克隆，为进一步全面深入地研究人偏肺病毒奠定基础。方法根据GenBank中已知的hMPV全基因序列设计引物。收集呼吸道感染住院患儿鼻咽抽吸物697例，提取病毒核酸，运用长片段RT-PCR技术扩增目的片段，切割舍目的条带的凝胶进行纯化，并将目的片段连接到PJET1．2／blunt克隆载体，转化感受态细胞TOP10，经含氨苄青霉素的抗生素平板筛选，得到阳性克隆，提取质粒，最后对重组质粒进行PCR鉴定和测序鉴定。结果随机选取5例所获的阳性条带经PCR和测序鉴定，证实确为hMPV基因片段。结论成功构建了hMPV基因组亚克隆，可用于后续的实验研究。
- 刘爱玲陆学东吴润香贾雪
- 关键词：人偏肺病毒亚克隆重组质粒
- 儿童呼吸道感染常见病毒的检测分析被引量：14
- 2009年
- 呼吸道感染是临床常见病症，可由多种病原体引起。目前已证明，急性呼吸道感染90％以上是非细菌性的，其中大部分由病毒引起，许多病毒具有感染力强、传播快、潜伏期短、发病急、病后免疫力不能持久等特点，常导致较高的发病率和死亡率，造成疾病的大流行[1]。
- 曾凡胜陆学东王琼黄烈吴润香胡琴罗小芳贾雪
- 关键词：儿童呼吸道感染急性呼吸道感染常见病症非细菌性潜伏期短发病率
- 广东地区首例WU多瘤病毒的检出与鉴定被引量：6
- 2009年
- WU多瘤病毒（WU Polyomavirus，WUPyv）是新近发现的与人类疾病相关的多瘤病毒，由美国和澳大利亚学者Gaynor等于2007年从小而下呼吸道感染分泌物中发现，属于多瘤病毒。在发现该病毒不到2年的时间里，世界上已经有美国、韩国、加拿大等十几个国家报道从呼吸道感染患者标本中检出WU Pyv。我国浙江、北京学者也相继有报道从急性呼吸道感染婴幼儿标本中检测出该病毒，但华南地区至今未见报道。
- 贾雪陆学东王琼曾凡胜陈群
- 关键词：多瘤病毒WU下呼吸道感染急性呼吸道感染疾病相关
- WU多瘤病毒的研究进展被引量：2
- 2009年
- 下呼吸道感染是全世界范围内造成5岁以下儿童死亡的主要疾病,每年约有250万病人[10]。尽管病毒感染是小儿下呼吸道感染的重要原因,但是据世界卫生组织统计,目前约有10%～39%小儿下呼吸道感染的病因未明[13],因此,呼吸道病原学的研究对于医学界仍是一个巨大的挑战。WU多瘤病毒(WU Polyomavirus,WUPyv)是新近发现的一种人类相关多瘤病毒,由于该病毒与儿童及婴幼儿的下呼吸道感染关系密切,虽然发现不久,却引起了各国研究者的注意。
- 贾雪陆学东陈群
- 关键词：WU多瘤病毒流行病学
- 人偏肺病毒N蛋白的原核表达及抗原活性的初步研究被引量：2
- 2013年
- 目的构建人偏肺病毒(hMPV)N蛋白(hMPV-N蛋白)的原核表达载体,研究其表达效果,为临床抗体检测及预防提供基础资料。方法根据hMPV-N基因的全序列设计引物,扩增目的基因片段,连接质粒载体RSET-A,转化大肠埃希菌BL21,IPTG诱导以his为标签的目的蛋白表达,并用人血清进行检测。结果重组质粒转化诱导后,出现了与预期分子量相符的蛋白条带;采用Western blot方法,检测了102份呼吸道感染住院患儿血清标本中的抗hMPV-N蛋白IgG抗体,阳性率为53.9%。结论成功获得了hMPV-N蛋白的表达,为临床血清学检测奠定基础。
- 刘爱玲陆学东王琼贾雪
- 关键词：人偏肺病毒N蛋白原核表达免疫印迹
