闫海涛
- 作品数：21 被引量：13H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院毒物药物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- shRNA干扰HERG钾通道治疗裸鼠皮下人成神经细胞移植瘤
- 2007年
- 目的:探讨发卡结构小片段RNA(small hairpin interfering RNA,shRNA)干扰人ERG(human ether-α-go-go-related gene,HERG)钾通道治疗裸鼠皮下人成神经细胞移植瘤的疗效和作用机制。方法:用真核转录载体mU6pro构建针对herg基因的发卡状RNA干扰质粒(shRNA-herg)。18只BALB/c裸小鼠皮下接种成神经细胞瘤SH-SY5Y细胞,建立裸鼠皮下人成神经细胞移植瘤模型,当瘤体积达到100mm3时随机分成3组,分别为生理盐水组(Ⅰ)、对照质粒组(Ⅱ)、干扰质粒组(Ⅲ)。各组瘤内分别注射生理盐水、对照质粒、干扰质粒,以后每7d注射1次,连续15d。观察各组肿瘤生长情况,RT-PCR测定肿瘤组织herg基因mRNA含量变化,免疫组化检测肿瘤组织中HERG钾通道蛋白变化。结果:经治疗后,第Ⅲ组肿瘤生长受到明显抑制,Ⅱ、Ⅲ组抑瘤率分别为3.04%和29.78%(P<0.05)。肿瘤组织内herg基因mRNA含量、HERG钾通道蛋白,Ⅲ组较Ⅰ、Ⅱ组表达减弱。结论:构建的shRNA干扰质粒可通过靶向性抑制herg基因及其编码的HERG钾通道蛋白的表达,有效地抑制人成神经细胞瘤的生长。
- 贾勇圣赵杰魏晓莉靳庆娥郑建全李昕闫海涛
- 关键词：HERG钾通道成神经细胞瘤
- 从噬菌体十二肽库中筛选NF-κB p65亚基亲和肽的研究
- 核因子-κB/(nuclear factor-κB,NF-κB/)是一种重要的核转录因子,可被多种刺激因素激活,并易位至细胞核,与相应的靶基因结合,启动基因转录。NF-κB的靶基因包括编码细胞因子、粘附分子、诱导型一氧化...
- 闫海涛
- 文献传递
- 酶联免疫吸附分析法测定血清中醋酸亮丙瑞林含量被引量：2
- 2006年
- 目的:建立一种检测微量醋酸亮丙瑞林的方法。方法:使用酶联免疫吸附分析法(ELISA),测定样品中醋酸亮丙瑞林含量。结果:自制的兔抗亮丙瑞林抗血清具有良好的特异性。使用 ELISA 测定醋酸亮内瑞林的最低检出限为0.025ng·mL^(-1),精密度(日内 RSD<23.5%,日间 RSD<22.4%)良好。不同浓度醋酸亮丙瑞林的平均回收率为97.3%。含样品血清冷冻(-20℃)保存30d 内,醋酸亮丙瑞林的检测结果稳定,重复性好。结论:本实验研究建立了一种操作简单、快速,特异性好、灵密度高的醋酸亮丙瑞林检测方法。
- 董泗建郑建全池木根王丽韫闫海涛邓祥惠张振清梁远军刘克良
- 关键词：醋酸亮丙瑞林抗血清
- 重组人核因子κB亚基p65在大肠杆菌中的可溶性表达及纯化
- 2005年
- 将扩增得到的核因子(NF)κB亚基p65基因片段克隆至测序载体pGEM-T,测序验证该序列为预期目的片段后,再将该基因片段克隆至表达载体pGEX-4T2中,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,用GST蛋白亲和柱纯化融合蛋白p65/GST,Western印迹验证该蛋白具有NF-κB抗原活性。结果表明,构建了NF-κBp65/GST融合表达载体,并表达和纯化了NF-κBp65/GST融合蛋白,为进一步研究NF-κB的功能和筛选NF-κB拮抗分子奠定了基础。
- 闫海涛马晓芸董泗建郑建全丁日高
- 关键词：核因子GST
- 光诱导CRISPR/Cas9系统在基因表达调控中的研究进展
- 2017年
- Cas9是CRISPR/Cas9系统中RNA引导的可切割双链DNA的核酸酶,野生型Cas9可通过基因剪切直接导致目的基因表达沉默。将Cas9蛋白D10A和H840A位点突变,可获得失去切割活性但仍保留与DNA结合能力的dCas9,其与转录激活因子连接后结合到DNA特定位点可实现转录激活;若dCas9直接与靶基因特定位点结合则可阻碍目的基因的转录。将光可调节物质引入CRISPR/Cas9可设计成光诱导CRISPR/Cas9系统。此系统在蓝光(470 nm)诱导下作用于靶DNA可实现人为可控的基因表达激活和抑制。本文主要介绍了光诱导CRISPR/Cas9系统的特性及其在基因表达调控中的运用。
- 蓝丽婷魏晓莉闫海涛苏瑞斌
- 关键词：转录激活转录抑制
- 不同发育期大鼠海马N-甲基-D-天冬氨酸受体3A亚基的表达及其抗缺血缺氧能力
- 目的观察不同发育时期海马神经元N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体3A亚基(NR3A)的表达及其抗缺血缺氧能力与其NR3A表达量的关系。方法取鼠龄1,5,10,15,20,30和90 d大鼠海马,采用Western印迹...
- 王卉闫海涛郑建全
- 关键词：N-甲基-D-天冬氨酸受体
- 文献传递
- ZC88阻断HERG钾通道抑制肿瘤细胞增殖
- 目的:深入研究ZC88对HERG钾离子通道的阻断作用,评价其在体内体外的抗肿瘤活性,并对其抗肿瘤机制开展研究。方法:用双电极电压钳和QPatch全自动膜片钳记录HERG钾通道电流,SRB法测定细胞活力,裸鼠皮下移植瘤模型...
- 魏晓莉孙洪良华南张诚闫海涛郑建全
- 关键词：HERG钾通道肿瘤
- 文献传递
- 能拮抗促肾上腺皮质激素释放因子受体1的多肽及其用途
- 本发明涉及能拮抗促肾上腺皮质激素释放因子受体1的多肽及其用途。本发明的多肽具有如下氨基酸序列：WLPVDWH、NPAFELM、FWGDDGY、LLWLDWH、YLDAWENEVINF、DGYNGEPWIWQQ或YAGDF...
- 郑建全马晓芸于金梅闫海涛魏晓莉
- 文献传递
- 氯吡格雷在化学诱导小鼠结肠炎相关肿瘤发生中的作用（英文）被引量：1
- 2016年
- 目的探究血小板聚集抑制剂氯吡格雷(Clog)对结肠炎相关结肠癌(CAC)形成过程的影响及其作用机制。方法雄性BALB/c小鼠分为5组,正常对照组,模型组,Clog 12.5,25.0和50.0 mg·kg^(-1)组。CAC模型组首先1次ip给予氧化偶氮甲烷(AOM)10 mg·kg^(-1),1周后,每天饮用〔2.5%葡聚糖硫酸钠(DSS)1周+生理盐水2周〕3个周期建立CAC模型。自给予2.5%DSS饮用水起,Clog 12.5,25.0和50.0 mg·kg^(-1)每天ig给药1次至模型建立结束。记录小鼠的体质量,临床症状,小鼠结肠肿瘤的数目和大小,HE染色评价肿瘤的异型性。在CAC小鼠早期炎症阶段,测量小鼠的结肠长度,HE染色和Ki67染色分别评价结肠组织病理变化和结肠组织上皮细胞的增殖水平。在肿瘤形成与发展阶段,Ki67染色评价结肠组织上皮细胞增殖水平,实时荧光定量PCR法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)m RNA的表达,PCR和免疫组化法检测趋化因子(C-X-C结构域)配体2(CXCL2)及其受体CXCR2的表达。结果与模型组相比,Clog 12.5 mg·kg^(-1)可缓解小鼠的临床症状,减小结肠肿瘤平均直径(P<0.05),降低肿瘤异型性(P<0.05)。在CAC早期炎症阶段,Clog 12.5 mg·kg^(-1)可缓解小鼠临床症状(P<0.05)和体质量下降(P<0.01),增加结肠长度(P<0.01),减轻结肠组织炎症损伤(P<0.05),降低上皮细胞增殖水平(P<0.05);在CAC肿瘤形成与发展阶段,Clog 12.5 mg·kg^(-1)可降低结肠组织上皮细胞增殖水平(P<0.05),减少结肠组织TNF-αm RNA水平、CXCL2和CXCR2 m RNA及蛋白表达水平(P<0.05)。结论 Clog可缓解CAC早期炎症阶段的炎症发展,抑制结肠肿瘤的形成。其抗肿瘤作用可能与减少CXCL2与CXCR2的表达有关。
- 杨晓雯王士奇宋觉敏卢学春刘晓燕张树卓闫海涛马晓芸郑建全魏晓莉
- 关键词：氯吡格雷结肠炎炎性肠病血小板
- 不同发育期大鼠海马N-甲基-D-天冬氨酸受体3A亚基的表达及其抗缺血缺氧能力被引量：4
- 2012年
- 目的观察不同发育时期海马神经元N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体3A亚基(NR3A)的表达及其抗缺血缺氧能力与其NR3A表达量的关系。方法取鼠龄1,5,10,15,20,30和90 d大鼠海马,采用Western印迹法检测海马神经元NR3A表达;制备鼠龄10,15,20和30 d大鼠海马切片,免疫组化法检测NR3A表达。取鼠龄10,15,20和30 d海马脑片,体外制备氧糖剥夺损伤模型(OGD),采用PI染料标记和荧光方法检测观察神经元坏死情况。结果 Western印迹和免疫组化结果显示,大鼠海马NR3A亚基的表达以10 d鼠龄时最高,此后逐渐下降,直至成年都一直维持较低的水平。对海马脑片进行OGD处理后,鼠龄10 d的海马脑片受损细胞数明显少于其他组,5 d,20 d组PI阳性细胞数多于10 d,鼠龄30 d的海马脑片损伤细胞数最多。结论 鼠出生后海马神经元NR3A亚基表达呈现先高后低的状态,成年鼠NR3A亚基的表达量维持在较低水平。NR3A亚基的高表达有利于神经元对抗OGD造成的损伤。
- 王卉闫海涛郑建全
- 关键词：N-甲基-D-天冬氨酸受体
