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隋志芳: 作品数：14 被引量：44H指数：3; 供职机构：天津医科大学第二医院泌尿外科研究所更多>>; 发文基金：天津市自然科学基金天津市科委资助项目国家自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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人尿路变移上皮种子细胞的体外培养与鉴定被引量：1: 2010年; 目的对人尿路变移上皮细胞进行原代和传代培养,探讨并建立细胞的培养体系,用于泌尿系统组织工程种子细胞的相关研究。方法采集人肾脏手术标本的肾盂、输尿管正常上皮组织利用组织块法,使用添加附加表皮生长因子(EGF)及牛垂体提取物(BPE)成分的角朊细胞无血清培养液(KSFM)进行细胞原代培养,用含EGF及BPE的KSFM进行传代培养。观察培养细胞的形态和增殖情况,经HE染色和免疫细胞化学SP法染色进行鉴定。结果培养制备的人尿路上皮细胞呈现典型的变移上皮细胞形态特征,原代培养9-12d时细胞汇合可达80%。免疫细胞化学染色显示细胞角蛋白(CKAE1/AE3)阳性。分离培养的为单一的人尿路变移上皮细胞,无成纤维细胞混杂。结论采用组织块法分离培养的人尿路变移上皮细胞在添加EGF及BPE的KSFM培养液中可维持良好的生物学特性,并具有一定的增殖传代能力。该培养体系所获得的细胞可用于人泌尿系统的基础研究及组织工程的进一步研究。; 谷超李静隋志芳畅继武; 关键词：细胞培养

神经生长因子对胰淀素所致大鼠胰岛细胞功能障碍的保护作用被引量：2: 2010年; 目的:评价神经生长因子(NGF)对高浓度胰淀素所致大鼠胰岛细胞活力和胰岛素分泌功能损伤的修复作用。方法:以不同浓度胰淀素(1、5、10μmol/L)孵育原代培养的大鼠胰岛β细胞,制备功能减退的细胞模型,再以不同浓度的NGF(50、100、200μg/L)孵育高浓度胰淀素(10μmol/L)作用过的胰岛细胞,分别设立空白对照组,比较各组细胞对四甲基偶氮唑盐(MTT)还原能力和胰岛素的分泌能力。结果:高浓度胰淀素(10μmol/L)作用后胰岛细胞对MTT还原能力以及基础糖(5mmol/L)和高糖状态(16.7mmol/L)下胰岛素分泌量的影响与对照组相比均明显下降,差异具有统计学意义(P<0.01),细胞模型制备成功。用不同浓度NGF孵育24h后,随着NGF剂量的增加,此受损胰岛细胞胰岛素分泌量(即24h胰岛素分泌量)、高糖(16.7mmol/L)刺激下胰岛素分泌量均明显增加,受损胰岛细胞对MTT还原能力亦逐步增强。结论:NGF可减轻高浓度胰淀素对胰岛细胞活力的抑制作用,并促进胰岛β细胞分泌功能的恢复。; 崔巧丽隋志芳王银霞朱铁虹; 关键词：神经生长因子胰岛Β细胞胰岛素胰淀素

c-Ha-ras癌基因反义RNA抑制膀胱癌细胞生长及粘附的研究被引量：3: 2000年; 目的　研究降低c Ha ras癌基因表达对膀胱癌细胞生长和粘附的影响。方法　将反义c Ha ras基因导入膀胱癌细胞系TBC 1细胞株 ,筛选阳性细胞克隆。Southern杂交鉴定外源基因整合情况 ,荧光分光光度法检测c Ha ras表达 ,绘制生长曲线 ,体外检测细胞粘附率。结果　筛选出细胞克隆TBC neo和TBC antiras ,放射自显影显示只有TBC antiras有外源性c Ha ras杂交带 ,亲本细胞TBC 1和对照细胞TBC neo只有内源性杂交带 ,与TBC 1(39.7± 6 .2 ,32 .8% )和TBC neo(43.2±5 .7,35 .7% )相比TBC antiras细胞的c Ha ras蛋白水平 (2 5 .6± 4.2 )及粘附率 (16 .4% )明显降低 (P<0 .0 5 )。生长曲线显示TBC antiras生长受到抑制。结论　降低c Ha ras癌基因表达抑制膀胱癌细胞生长和粘附 ,针对ras癌基因或癌蛋白的药物可为膀胱癌的临床治疗提供新途径。; 汤洋隋志芳畅继武马腾骧; 关键词：膀胱癌反义RNA C-HA-RAS基因

尿毒症患者T淋巴细胞功能的变化被引量：1: 1992年; 采用~3H-TdR掺入法测定了35例尿毒症患者的T淋巴细胞转化功能,与正常对照组比较,发现透析和未透析尿毒症患者的T淋巴细胞转化功能明显下降。尿毒症患者经慢性维持性血透治疗后,T淋巴细胞转化功能有一定提高。锌元素与T淋巴细胞转化功能存在相关关系。锌是影响T淋巴细胞转化的重要因素。为提高尿毒症患者的T淋巴细胞功能,要加强规律性血透治疗和补充锌元素。; 于文慧马腾骧张璐仁隋志芳王锦韩玉植; 关键词：尿毒症血液透析 T细胞

葡萄糖、胰岛素调节（G1RE）3BP-1启动子活性的体外研究: 2008年; 目的探讨葡萄糖、胰岛素对（G1RE）3BP-1启动子活性的影响及意义。方法采用脂质体转染法将含有（G1RE）3BP-1启动子的真核表达质粒p（G1RE）3BP-1Luc转染至人肝癌细胞系-HepG-2细胞中,6 h后分别加入不同浓度的葡萄糖、胰岛素,孵育48 h后,分别检测其报告基因荧虫素酶的活性。结果荧虫素酶的活性随着培养基中葡萄糖的浓度增高而增加,随着培养基中胰岛素浓度的增多而减少。结论（G1RE）3BP-1启动子在肝细胞中受葡萄糖的正调控、受胰岛素的负调控,若用于调控胰岛素基因的表达,将使糖尿病的基因治疗更安全更可行。; 侍晓云畅继武邱明才隋志芳马富玲; 关键词：HEPG-2细胞基因调控葡萄糖胰岛素

大鼠胰岛细胞单层培养模型的建立和应用被引量：11: 1998年; 目前用于体外胰岛功能研究的细胞模型系统有两大类,一是从正常动物胰腺组织分离的胰岛,二是由胰岛素瘤细胞克隆产生胰岛素的胰岛细胞系。在研究葡萄糖对胰岛分泌功能的影响时,使用从正常胰腺组织所分离的胰岛较为理想,但可获得的组织量过少,而从瘤组织克隆的细胞系虽可获得大量同源细胞成分,但该类细胞对刺激反应常弱化,不能如实地反应生物体的正常功能。有鉴于此,本实验采用正常大鼠胰岛细胞单层培养技术,获得了具有良好功能和形态的胰岛细胞,结果报告如下。; 朱铁虹畅继武尹潍隋志芳; 关键词：胰岛细胞

膀胱移行上皮癌发生发展的分子病理学研究被引量：12: 1994年; 研究４９例复发性膀胱移行上皮癌的临床病理资料，将膀胱移行上皮癌分成两大类。Ⅰ类癌始于非典型增生，经早期乳头状非浸润癌发展成典型的Ⅰ、Ⅱ级乳头状移行上皮癌，该类癌多以固有膜上浸润为主。Ⅱ类癌始于结构不良，经原位癌发展成浸润癌。为了解两类癌的发生发展实质，从中选出七种病变经免疫组化ＡＢＣ法检测，ｒａｓＰ２１、Ｐ５３、Ｒｂ、Ｃ－ｅｒｂＢ－２、ＥＧＦＲ的基因表达产物。结果表明：在Ⅰ类癌发生的早期以ｒａｓＰ２１和Ｒｂ表达，ＥＧＦＲ和Ｃ－ｅｒｂＢ－２弱表达为主。在Ⅱ类癌发生发展过程中以Ｐ５３突变、Ｒｂ转阴Ｃ－ｅｒｂＢ－２和ＥＧＦＲ过表达为主。结果表明癌基因的激活多造成细胞的增生为主，而抑癌基因的丢失、突变、灭活或重排等多引起细胞的突出间变，两者的协同则造成肿瘤的浸润和转移。; 畅继武马腾骧张淑敏隋志芳张新姚庆祥孙光董克权王文成王锦刘淑贤; 关键词：膀胱肿瘤基因生物学

逆转录病毒介导的牛生长激素基因转染NIH3T3细胞和人胚肺成纤维细胞: 2002年; 目的:以牛生长激素(bGH)为模型,建立逆转录病毒载体转移系统,体外转染鼠成纤维细胞株NIH3T3和人胚肺成纤维细胞2BS,以获得bGH表达。方法:将PCR扩增的bGH基因片段插入逆转录病毒载体pSXLG-MDR相应酶切位点,获得的重组逆转录病毒质粒。应用脂质体方法转染重组质粒进入包装细胞PA317,筛选长春新碱抗性克隆株,收集上清液感染NIH3T3细胞和人胚肺成纤维细胞2BS,筛选携带bGH基因的成纤维细胞的克隆株3T3/bGH和2BS/bGH。结果:RT-PCR分析表明基因转染组的3T3/bGH细胞和2BS/bGH细胞在相当于680bp处有一清晰的条带,而空质粒对照组无相应条带出现。RIA分析表明转染基因细胞的培养液及胞浆蛋白有bGH蛋白表达,而作为对照的3T3/mdr细胞和NIH/3T3细胞均无此蛋白表达。结论:应用逆转录病毒IRBS载体系统转染bGH基因进入成纤维细胞,该系统易筛选,转染效率较高。; 宋诗铎郑东钧祁伟隋志芳李为方晖何屏魏殿军; 关键词：生长激素成纤维细胞基因转染 NIH3T3细胞

MRP1/CD9在膀胱癌组织中的表达及意义被引量：3: 2006年; 目的探讨M RP 1/CD 9在膀胱癌组织的表达及其临床意义。方法用免疫组化SP法检测M RP 1/CD 9在膀胱癌组织和正常膀胱黏膜组织中的表达。结果正常膀胱组织中M RP 1/CD 9均为阳性。膀胱癌组织中M RP 1/CD 9表达降低,且与病理分期呈负相关,与临床分期无相关性。结论在膀胱癌组织中M RP 1/CD 9表达降低,可能与膀胱癌的发展有关。其降低程度可以作为评估膀胱癌恶性程度的一个重要指标。; 张一兵牛海涛隋志芳畅继武; 关键词：膀胱肿瘤

胰岛素基因在HepG-2细胞系中的调节表达: 2008年; 用脂质体介导法将质粒p(GIRE),BP-11×Furin转染至HepG-2细胞。培养该细胞,以不同浓度的葡萄糖或胰岛素加入培养基。结果显示,葡萄糖和胰岛素均能浓度依赖地分别刺激和抑制胰岛素基因的表达。; 侍晓云畅继武邱明才隋志芳马富玲; 关键词：胰岛素基因 HEPG-2细胞葡萄糖胰岛素

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