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国内实验室参加NRL血液筛查核酸检测室间质评数据分析: 目的分析2012-2015年国内实验室参加NRL血液筛查核酸检测(NAT)EQAS数据,评估参评实验室常用NAT筛查试剂对低浓度和极低浓度核酸阳性样品的检测能力.方法收集国内参评实验室2012-2015年12次(3次...; 伍晓菲贾尧张博莫琴黄宇闻王迅; 关键词：血液筛查核酸检测输血感染实验室

血浆及血细胞制品中巨细胞病毒(HCMV)的灭活: 陆萍凌冰季育华莫琴黄宇闻彭奕冰钱开诚; 1.实验室病毒株HCMV-AD169体外感染与检测模型的建立　　CMV严格的种族特异性很大程度上限制了有关的研究，是目前唯一公认可行的CMV体外培养的成人纤维细胞。本项研究成功地培养了可以繁殖CMV病毒的HELF细胞及C...; 关键词：; 关键词：血浆病毒灭活巨细胞病毒

应用实时荧光定量PCR方法检测血小板制品细菌污染被引量：7: 2007年; 目的应用实时荧光定量PCR方法检测血小板制品中细菌的探讨。方法选取金黄色葡萄球菌及大肠埃希氏杆菌,用改良的Chelex-100法抽提细菌基因组DNA,进行荧光定量PCR检测。并应用过滤法去除反应体系中潜在的细菌及其基因组DNA污染。结果针对16srRNA基因保守序列进行扩增的荧光定量PCR方法具有较高的特异性和灵敏度,与人类淋巴细胞及病毒等的基因组无交叉反应。在金黄色葡萄球菌检测中,应用过滤法后最低含菌量组与阴性对照组Ct值有极显著差异(P<0.001)。该方法对金黄色葡萄球菌的最低检出量为0.3CFUs/PCR,与阴性对照Ct值有显著差异(P<0.01),在大肠埃希氏杆菌中该法可检测出0.1CFUs/PCR,与阴性对照Ct值有显著性差异(P<0.01)。结论改良Chelex-100法抽提细菌基因组及后续的荧光定量PCR分析用于检测血小板制品中的细菌污染,检测实验缩短到3-4h,操作简单,灵敏性高,特异性好,为在临床标本大规模检测中的应用提供理论基础和实验数据。; 马敏刘晓颖徐忠王迅黄宇闻莫琴林俊杰邱颖捷钱开诚; 关键词：血小板制品实时荧光定量PCR 细菌污染

亚甲蓝光化学灭活对血浆丙型肝炎病毒基因组核酸降解的研究被引量：8: 2006年; 目的研究丙型肝炎病毒(HCV)基因组核酸在亚甲蓝光化学法(methelene blue photochemistry,MB-P)灭活病毒前后的变化,在全基因组水平分析MB-P对基因组各结构区段的降解作用。方法含HCV的血浆中加入终浓度为1.0μmol/L的MB,经约30000Lux强度的荧光照射后,在不同作用时间点取样;将HCV全基因组序列分为互相重叠的8个区段,分别进行RT-PCR,分析基因组核酸的完整性;同时运用实时定量PCR(real time-PCR,RT-PCR)技术观察核酸降解的动力学变化。结果基因组各区段RT-PCR结果发现,经过不同的光照时间,HCV基因组各区段的稳定性不同,第2、4、5、6区段对MB-P作用较敏感,基因组5’端区段和3’端区段经MB-P作用后的稳定性高于基因组其它区段;RT-PCR结果显示,随着光照时间延长,可被检测到的病毒核酸拷贝数逐渐下降。结论MB-P灭活过程中HCV基因组核酸被降解,而且基因组不同区段对光化学作用的反应性不同,提示RNA降解可能是病毒灭活的重要机制;检测病毒核酸稳定性以监测病毒灭活具有一定临床实用价值。; 郑岚黄宇闻曹文俊倪小菊莫琴王迅钱开诚; 关键词：RT-PCR

S/D法对临床用血浆进行病毒灭活研究进展: 1998年; S/D方法(有机溶剂/清洁剂法)在凝血因子制品中早已被公认为是有效的病毒灭活方法,但该法用于临床用血浆的病毒灭活则是近几年的事。S/D法被证明同样有效地灭活新鲜血浆中的病毒,对血浆中主要蛋白成份没有影响。临床试用研究证明S/D血浆具有与普通血浆相同的治疗效果,无毒副反应且不会传播病毒。; 程庆文黄宇闻; 关键词：有机溶剂血浆病毒灭活

核黄素光化学作用灭活大肠杆菌的研究被引量：4: 2009年; 目的研究核黄素光化学反应对细菌的灭活作用,探讨分析核黄素光化学灭活病原体的机理。方法将含有细菌的培养液4.950ml注入5ml血袋中,再加入10mmol/L的核黄素溶液50μl使其终浓度为100μmol/L,将血袋置控温光照仪中接受400—500nm波段可见光双侧照射[剂量(8.0—32.0)J/cm2],照射时温度为(4±2)℃;照射后标本通过细菌培养,透射电镜影像、核酸检测(LacZ基因片段)等方法观察核黄素光化学作用灭活大肠杆菌的效果。结果400—500nm可见光激发的核黄素光化学作用可以有效灭活大肠杆菌达6log;透射电镜影像示经核黄素光化学处理的大肠杆菌其拟核所在区域出现多个空泡;PCR显示经核黄素光化学处理的大肠杆菌其LacZ基因片段的复制被完全阻止。结论可见光激发的核黄素光化学作用可以有效灭活大肠杆菌,核酸是核黄素光化学产生病原体灭活作用的主要靶点。; 黄宇闻莫琴崔振玲钱开诚; 关键词：核黄素光化学大肠杆菌病原体灭活透射电镜

用短波段紫外线消毒时血浆保护剂的研究被引量：1: 1998年; 短波段紫外线（２５４ｎｍ，１０Ｊ／ｃｍ２）照射１０ｍｉｎ，可使血浆中辛德比斯病毒与水泡性口炎病毒滴度下降６ｌｇＴＣＩＤ５０，但可将凝血因子Ⅷ与纤维蛋白原分别破坏５７％与８０％以上。向血浆中加１％丹参作保护剂，可使两者破坏率＜１３％，且不影响对病毒的灭活。加０５ｍｍｏｌ／Ｌ芦丁的保护作用不如丹参。２％维生素Ｃ影响紫外线对病毒的灭活。; 程庆文莫琴黄宇闻谢如锋高峰; 关键词：血浆消毒紫外线

核酸扩增技术(NAT)在上海血液筛检中的应用被引量：2: 2001年; 王迅郑岚张晰凌冰许莉萍黄宇闻陆萍莫琴高峰方强宗; 关键词：筛检化验室 NAT 核酸扩增血液

国内实验室参加NRL血液筛查核酸检测室间质评数据分析被引量：4: 2016年; 目的分析2012-2015年国内实验室参加NRL血液筛查核酸检测(NAT)EQAS数据,评估参评实验室常用NAT筛查试剂对低浓度和极低浓度核酸阳性样品的检测能力。方法收集国内参评实验室2012-2015年12次(3次/年)NRL血液筛查NAT EQAS数据,对不正常结果及其原因进行统计分析。利用所有NRL参评实验室的数据,分析中国市场上常见的NAT筛查试剂对低浓度和极低浓度HBV DNA、HCV RNA和/或HIV-1阳性样品的检出率。结果 2012-2015年国内共有37家实验室参加了质评项目,其中70.27%(26/37)来自血液中心,18.92%(7/37)来自中心血站和10.81%(4/37)来自公司。12次质评共有305家(次)实验室提交了319个试剂检测结果,其中45.77%(146/319)采用Procleix TM TMA检测,25.39%(81/319)采用cobas Taq Screen MPX或MPX v.2.0检测,其余28.84%(92/319)为3种国产试剂检测。90.49%(276/305)参评实验室报告血清盘结果正确;6.89%(21/305)参评实验室出现了不正常结果,包括假反应性结果(2.62%,8/305)、假阴性结果(3.28%,10/305)和数据输入错误(1.64%,5/305)。10家(次)参评实验室共出现了11个假阴性结果,均来自于低浓度病毒载量样品HBV(40-400)IU/m L、HCV40 IU/m L或HIV-1 250 IU/m L。常用NAT筛查试剂对低浓度病毒载量样品的检出率为97.96%-100.00%,对极低浓度病毒载量样品HBV(A)0.4 IU/m L和HCV(1b)IIU/m L的检出率分别为8.82%-89.19%和6.25%-34.27%。结论国内NAT血液筛查实验室仍存在少数漏检和假反应性的问题。NAT筛查试剂能有效检出低浓度病毒载量样品,部分试剂还能正确检测极低浓度病毒载量样品。参评实验室通过参加EQAS活动,可以发现自身实验室可能存在的问题、获得更多试剂信息,有助于进一步提高实验室的检测能力和检测结果的可靠性。; 伍晓菲贾尧张博莫琴黄宇闻王迅; 关键词：血液筛查核酸检测输血感染实验室

亚甲蓝光化学病毒灭活效果质量评价方法及其质控品: 本发明涉及血液病毒灭活效果质量评价领域。本发明解决了现有技术中MB－P灭活效果质量评价方法价格贵，周期长，不适合在常规工作中开展的问题，公开了一种新的亚甲蓝光化学病毒灭活效果质量评价检测方法，包括以下步骤：在对血液或血液...; 郑岚王迅黄宇闻莫琴刘晓颖钱开诚; 文献传递

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黄宇闻

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