丁文勇 作品数:12 被引量:22 H指数:3 供职机构: 大连医科大学 更多>> 发文基金: 辽宁省自然科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 农业科学 更多>>
一种以血液中GALNT9为标志物诊断帕金森病试剂盒 本发明公开一种以血液中GALNT9为标志物诊断帕金森病试剂盒,含有定量检测人血液中GALNT9的PCR引物。通过发现了帕金森病患者血液中GALNT9表达水平显著降低,以容易获得的、无创的、信息丰富的患者血液样品为生物样本... 张文利 马莉 丁文勇 彭圆雯异搏定对小鼠肝癌腹水瘤细胞钙调素含量的影响 2000年 小鼠肝癌腹水瘤细胞HCa/A2 -P用含与不含异搏定的培养基体外培养 96h ,利用钙调素对环核苷酸磷酸二酯酶的激活作用测定胞液钙调素含量 ,用药组钙调素平均浓度为 19 1μg/mg蛋白 (n1=6 ) ,对照组为 2 5 6 μg/mg蛋白 (n2 =6 ) ,用药组胞液钙调素含量明显降低 (P <0 0 0 5) ,提示异搏定可能通过影响Ca2 + /钙调素信号途径来影响此肿瘤细胞的生理过程。 丁文勇 任凤 赵宝昌关键词:异博定 钙调素 钙通道 Balb/C小鼠金属硫蛋白-1 cDNA的克隆及序列分析 被引量:1 2001年 以 RNA一步提取法 ,采用 RT-PCR技术成功地将 Balb/ C小鼠金属硫蛋白 -1 c DNA基因片段克隆于质粒 p UC-1 9上 ,并对克隆片段 c 林琳 丁文勇 赵宝昌关键词:BALB/C小鼠 基因克隆 核苷酸 RT-PCR技术 大连刺参体腔液甘露糖结合凝集素序列的鉴定及分析 被引量:1 2011年 根据NCBI提交的刺参体腔液(Apostichopus japonicus)甘露糖结合凝集素(Mannan-binding lectins,MBLs)序列(AY625513)设计引物,抽取刺参体腔液进行总RNA提取,采用RT-PCR技术,获得498 bp目的片段。通过克隆、测序确定得到刺参MBLs序列。将得到序列进行核苷酸和氨基酸序列比对,鉴定了大连刺参MBLs序列,并为我国不同区域刺参的进一步分类提供了科学的分子水平依据。 谢广成 李丹彤 丁文勇 刘洋 林琳 梁莎关键词:刺参 甘露糖结合凝集素 烟草凝聚物对人正常支气管上皮细胞中ΔNp63α表达的影响 2012年 [目的]探讨ΔNp63α与吸烟型肺癌发生的关系。[方法]用烟草凝聚物处理体外培养正常支气管上皮细胞HBE,并分别用Realtime PCR和Western blot检测其ΔNp63αmRNA和蛋白的表达。同时构建ΔNp63α的基因组启动子载体,利用荧光素酶分析烟草凝聚物对其转录活性的影响。[结果]烟草凝聚物处理后,HBE细胞中ΔNp63αmRNA和蛋白的表达明显增多,且具有剂量依赖性,以50μg/mL浓度诱导效应最明显,mRNA和蛋白表达分别升高93%和311%。烟草凝聚物能够显著增强ΔNp63α启动子的转录活性,同样表现出剂量依赖性,50μg/mL的诱导效应最明显,转录活性升高140%。[结论]烟草凝聚物能够通过增强ΔNp63α启动子的转录活性而诱导ΔNp63α的表达,说明ΔNp63α可能与吸烟导致的肺癌发生相关。 赵艳红 丁文勇 吴军兵 王春仁关键词:肺癌 钙调素依赖性的环核苷酸磷酸二酯酶的制备 被引量:2 1999年 通过两次离子交换柱层析, 从牛脑中制备钙调素依赖性的环核苷酸磷酸二酯酶. 所得酶不含内源性钙调素, 能被足量外加的钙调素激活 14 倍, 丁文勇 任凤 赵宝昌关键词:环核苷酸 磷酸二酯酶 钙调素 PDE 金属硫蛋白与人类疾病 被引量:1 2002年 金属硫蛋白(MT)是一种低分子量,富含半胱氨酸可结合重金属的蛋白质。从微生物到脊椎动物由Cd、Zn、Cu、Ag、激素及各种应急诱导产生金属硫蛋白。金属硫蛋白主要参与重金属解毒及氧化损伤解毒,储存金属,调节Zn及Cu的代谢,清除自由基。金属硫蛋白基因的表达调控是在转录水平上进行的,通过与金属,糖皮质激素及血反应元素顺式作用,及与DNA-结合蛋白,金属调节蛋白的反式作用达到调节的作用。众所周知,MT与一些疾病的发病过程密切相关。科学研究广泛地探索了心脏MT的抗氧化功能。最近采用心脏定位的MT-表达过量的转基因小鼠模型研究结果强力支持MT的这一生理作用。在急性及慢性刺激下如用阿霉素处理、局部缺血-再灌注损伤、食物中铜的限制,MT-表达过量的转基因小鼠心脏显示了对损伤的显著抗性。实验结果表明MT调节免疫系统,但MT的主要功能还不清楚。 林琳 丁文勇 任凤 赵宝昌关键词:金属硫蛋白 人类疾病 钙调素的环核苷酸磷酸二酯酶检测法 被引量:7 1999年 从牛脑中提取钙调素依赖性的环核苷酸磷酸二酯酶和钙调素,利用钙调素对磷酸二酯酶的激活作用和孔雀石绿定磷法测定生物样品中具有生理活性的钙调素含量,灵敏度达到20ng,检测范围20~40ng。此法操作简便,不需特殊仪器,较适合一般研究室使用。 丁文勇 赵宝昌 韩旭关键词:钙调素 磷酸二酯酶 孔雀石绿 PDE 免疫检测 金属硫蛋白融合蛋白的分离纯化 被引量:3 2003年 采用IPTG诱导新 1 #菌BL2 1 (DE3) (pET2 1a MT)高效表达Balb/C小鼠金属硫蛋白融合蛋白 ,并采用包涵体分离纯化方法及SephadexG 75柱层析得到SDS 林琳 丁文勇 任凤 赵宝昌关键词:BALB/C小鼠 纯化 刺参甘露糖结合凝集素的原核表达、纯化及生物活性分析 被引量:4 2011年 为进一步研究刺参甘露糖结合凝集素(AJ-MBL)的功能及提高刺参自身免疫力,对AJ-MBL基因的CDS区进行原核表达、纯化并初步鉴定其生物学活性。采用RT-PCR法扩增AJ-MBL基因编码区,经酶切鉴定、序列分析后,将其CDS区498 bp片段克隆至原核表达载体pET28a中,得到重组质粒pET-AJ-MBL。重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞并经IPTG诱导表达出分子量约17 ku的融合蛋白。该蛋白以包涵体形式存在,用Ni2+离子亲和柱纯化。结果显示,获得高表达量的重组纯化蛋白。纯化的17 ku AJ-MBL进行红细胞凝集试验检测其生物学活性。凝集试验结果显示,AJ-MBL凝集最小浓度为10μg/mL。本实验成功构建了AJ-MBL原核表达质粒,并在大肠杆菌中高效表达了17 ku AJ-MBL蛋白,该蛋白具有良好的生物学活性。 李丹彤 谢广成 丁文勇 王秀利 刘洋 徐文琦 张永攀关键词:刺参 甘露糖结合凝集素 原核表达 蛋白纯化