谢广成
- 作品数：39 被引量：132H指数：7
- 供职机构：承德医学院更多>>
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- 大连刺参甘露糖结合凝集素序列鉴定及分析
- 根据NCBI提交的刺参甘露糖结合凝集素(Mannan-binding lectins,MBLs)序列(AY625513)设计引物,抽取刺参体腔液进行总RNA提取,采用RT-PCR技术,获得498bp目的片段。通过克隆、测...
- 谢广成李丹彤
- 河北省野鼠立克次体感染调查被引量：2
- 2022年
- 目的调查河北省南部和东北部野鼠立克次体感染情况以及感染株的遗传进化特征。方法采用粘鼠板和鼠笼在河北南部邯郸市及北部承德市进行捕鼠,提取鼠脾脏DNA,采用半巢氏PCR扩增立克次体的16S rRNA、ompA、gltA基因,对扩增阳性产物进行测序,并对获得序列进行同源性比较和系统发生树分析。结果在邯郸市和承德市共捕获鼠100只,在这些鼠脾脏样本中有6份(6%)被PCR扩增阳性,其中邯郸市2份、承德市4份。PCR阳性产物测序后同源性分析,发现本研究中扩得的6株立克次体的3个目的基因序列均与劳氏立克次体相应基因序列的同源性最高,16S rRNA与gltA的同源性大于99.9%,ompA大于98.8%。基因序列系统发生树分析结果显示河北野鼠携带的立克次体菌株与我国其它地区检出的劳氏立克次体菌株有密切的亲源关系。结论河北省南部和东北部野鼠均存在劳氏立克次体的感染,野鼠生存地区可能为立克次体感染的自然疫源地,应加强当地人群立克次体感染的防控。
- 刁丹红王蒋丽郭文平李彩云杨欢欢李雁飞谢广成
- 关键词：野鼠遗传进化分析
- 氧压抑制霍乱弧菌毒力表达的机制研究被引量：1
- 2020年
- 目的外界环境因素会对霍乱弧菌的毒力表达产生影响,AphB作为霍乱弧菌毒力调控网络中的关键因子,受氧压抑制作用明显。本实验旨在研究氧压抑制AphB活性的关键位点及机制。方法利用诱变菌株XL1Red对aphB基因进行随机突变,获得突变子文库;将受到AphB调控的tcpP基因的启动子区域与lux报告基因相融合,获得检测用报告质粒;取含有aphB突变基因及报告质粒的菌株在有氧条件下进行培养,通过检测Lux值筛选目标突变株;利用细菌双杂交系统,进一步研究筛选到的突变位点感受氧压的机制。结果筛选到的突变株S267L、M113I和M244I在有氧条件下均表现出高转录调控活性,分别是WT(野生型)的22.8、173.3、30.2倍(P<0.001)。霍乱弧菌验证S267L、M113I是WT的8.2、13.3倍,M244I是WT的14.8倍(P<0.01)。细菌双杂交实验结果表明M113I通过改变蛋白聚合能力从而抵抗氧压的抑制作用。结论S267、M113和M244为氧压抑制AphB活性的关键位点。
- 苏萌谢广成王卉钟增涛杜娈英
- 关键词：霍乱弧菌突变株
- 大连刺参体腔液甘露糖结合凝集素序列的鉴定及分析被引量：1
- 2011年
- 根据NCBI提交的刺参体腔液(Apostichopus japonicus)甘露糖结合凝集素(Mannan-binding lectins,MBLs)序列(AY625513)设计引物,抽取刺参体腔液进行总RNA提取,采用RT-PCR技术,获得498 bp目的片段。通过克隆、测序确定得到刺参MBLs序列。将得到序列进行核苷酸和氨基酸序列比对,鉴定了大连刺参MBLs序列,并为我国不同区域刺参的进一步分类提供了科学的分子水平依据。
- 谢广成李丹彤丁文勇刘洋林琳梁莎
- 关键词：刺参甘露糖结合凝集素
- EV-A71感染小鼠巨噬细胞诱导促炎细胞因子和趋化因子反应被引量：3
- 2016年
- 为初步探索EV-A71在小鼠巨噬细胞中的复制情况和抗病毒的固有免疫应答,本文以小鼠巨噬细胞系RAW264.7为细胞模型,通过建立EV-A71绝对定量qPCR方法检测EV-A71病毒载量;EV-A71和紫外灭活的EV-A71感染RAW264.7,不同时间点提取总RNA,RT-qPCR检测促炎细胞因子、趋化因子和模式识别受体的mRNA表达变化水平。本研究成功建立了EV-A71的绝对定量qPCR检测方法,并发现EV-A71感染RAW264.7后随着感染时间的延长,EV-A71病毒载量呈递减趋势;EV-A71和紫外灭活的EV-A71可以引起IL-1β、IL-6、TNF-α促炎细胞因子和IP-10、MCP-1、MIP-1α趋化因子反应,上调TLR2、TLR1、TLR6、MDA5和RIG-I mRNA表达。研究结果显示,EV-A71在小鼠巨噬细胞中具有较低水平的复制,同时产生促炎细胞因子和趋化因子反应。
- 谢广成郭妮君王莹周永康李丹地靳淼庞立丽孙晓曼章青段招军
- 关键词：小鼠巨噬细胞促炎细胞因子趋化因子
- C组鼻病毒拮抗Ⅰ型干扰素产生的分子机制研究
- 鼻病毒(Human Rhinovirus,HRV)是引起普通感冒最主要的病原体,还会加重慢性阻塞性气管疾病、哮喘以及肺纤维化等疾病.C组鼻病毒感染与哮喘的发作关系密切,但是由于C组鼻病毒细胞培养困难,对C组鼻病毒致病机制...
- 庞立丽邵长胜谢广成李茂中段招军
- 关键词：天然免疫
- 环境水体中GⅡ型诺如病毒浓缩研究被引量：8
- 2011年
- 自行设计一种适合野外现场采样的病毒采集浓缩仪,采用一种新型阳离子膜NanoCeram,进行环境水体中GⅡ型诺如病毒浓缩研究。通过预实验,考察了预处理膜、不同的二次浓缩方法、不同洗脱液对病毒回收率的影响,随后优化整个浓缩过程并确定最佳的病毒浓缩方法。结果显示,预处理膜对病毒回收影响较大,PEG-NaCl沉淀、硅藻土吸附这两种二次浓缩方法的效果相当,选择0.15mol/L Na2HPO4作为硅藻土洗脱液。确定了NanoCeram阳离子膜的病毒回收率为3.02%。最后对北京市丰台区洋桥生活污水进行现场采样,成功检测到GⅡ型诺如病毒,证明该方法有效可行,适合于环境水体中诺如病毒的浓缩分离和检测。
- 梁莎谢广成徐子乾李金松李丹彤封少龙段招军
- 南京地区婴幼儿杯状病毒感染的分子流行病学研究被引量：4
- 2012年
- 目的了解南京地区婴幼儿杯状病毒腹泻的感染状况、临床表现以及分子流行病学特征。方法采集2010年7月至2011年6月南京医科大学附属南京儿童医院5岁以下腹泻患儿粪便标本及儿童保健中心健康婴幼儿粪便标本各428份。采用反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测杯状病毒，测序确定其基因型别。结果428份腹泻样本中有63份为杯状病毒阳性，检出率为14．72％。其中诺如病毒GⅡ型58例，未检出诺如病毒GI型，札如病毒5例，以诺如病毒GⅡ-42006b型为主要流行株。428份健康对照组标本杯状病毒检出19例，诺如病毒6例，札如病毒11例，2例为诺如病毒GⅡ型和札如病毒混合感染。结论南京地区婴幼儿中存在不同基因型杯状病毒感染，流行毒株以GⅡ-2006b为主。
- 李晓乐李丹地程卫霞谢广成高小倩孔桂平金玉段招军
- 关键词：腹泻
- 人鼻病毒1B感染致人肺支气管上皮细胞代谢组改变的研究被引量：2
- 2021年
- 目的探讨人鼻病毒1B(human rhinovirus 1B,HRV1B)感染对人肺支气管上皮细胞BEAS-2B代谢组改变的影响。方法HRV1B感染BEAS-2B细胞6 h和12 h后,采用非靶向代谢组学技术研究BEAS-2B细胞代谢组的改变情况。结果HRV1B感染BEAS-2B细胞6 h和12 h分别有93个差异显著代谢产物(differentially significant metabolites,DSMs)(上调47个DSMs、下调46个DSMs)和88个DSMs(上调37个DSMs、下调51个DSMs);HRV1B感染动力学(HRV1B 6 h∶12 h)过程中共鉴定到30个DSMs(上调12个DSMs、下调18个DSMs)。3组中未知DSMs占据比例均较大。脂肪酸、脂质、氨基酸、核苷酸和糖类的比例与HRV1B的感染时间呈现正相关,邻苯二甲酸二异壬酯等为HRV1B感染BEAS-2B细胞后的共同DSMs。结论HRV1B感染致BEAS-2B细胞的脂肪酸、脂质、氨基酸、核苷酸和糖类代谢物发生明显改变。
- 苏萌李丹孙萍萍王春阳王蒋丽王宏章青杜娈英谢广成
- 人博卡病毒2基因组扩增及序列分析被引量：2
- 2014年
- 为获得人博卡病毒2(Human bocavirus 2,HBoV2)基因组序列,以2010年HBoV2单阳粪便标本为材料,PCR方法扩增HBoV2基因组不同区域,经序列拼接后得到5444bp的全基因组序列(HBoV2-NC)。系统进化分析显示,HBoV2-NC与兰州株HBoV2亲缘关系最近;DINAMelt末端回文结构预测证实,HBoV2-NC 5′末端存在反向互补序列,具有典型的细小病毒末端的茎环样结构;接头法PCR扩增得到HBoV2-NC部分末端侧翼序列。
- 崔换弟金玉谢广成程卫霞段招军
- 关键词：进化分析
