吴锋
- 作品数：11 被引量：46H指数：3
- 供职机构：华南农业大学更多>>
- 发文基金：江西省教育厅科学技术研究项目国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- PEDV重组腺病毒疫苗的构建及小鼠免疫试验
- 猪流行性腹泻病毒(PEDV)是引起猪腹泻和死亡的重要病原之一。目前，虽然商品化PEDV疫苗已普遍使用，但该病在我国仍广泛流行，并引起严重的经济损失。因此，一种安全、有效新型疫苗的研制已成为必然趋势。
sM、M、S蛋...
- 吴锋
- 关键词：猪流行性腹泻重组腺病毒基因疫苗免疫试验
- O型口蹄疫病毒VP1基因在毕赤酵母中的表达及免疫原性分析被引量：7
- 2010年
- 利用毕赤酵母系统表达O型口蹄疫病毒VP1基因,并对表达的蛋白进行免疫原性鉴定。将VP1基因克隆入毕赤酵母分泌性表达载体pPICZα-C中,获得重组表达载体pPICZαC-VP1。将重组质粒pPICZαC-VP1线性化后,用电穿孔法转入酵母菌X-33,用Zeocin+YPDS平板筛选重组子,经甲醇诱导表达后,SDS-PAGE和Western blot分析表达产物,并用酵母表达的VP1蛋白免疫小鼠,然后通过ELISA检测抗体水平。结果表明,酵母所表达的VP1蛋白能诱导小鼠产生特异性体液免疫应答。
- 焦颖龚劲峰何校澎黄辉荣刘德辉张春红吴锋黄毓茂
- 关键词：口蹄疫病毒VP1毕赤酵母免疫原性
- 猪传染性胃肠炎疫苗的研究进展
- 猪传染性胃肠炎(Transmissible gastroenteritis,TGE)是由冠状病毒科冠状病毒属猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)引发的一种高度接触传染性的病毒性疾病。本文介绍了常规疫苗和基因工程疫苗等猪传染性胃...
- 吴锋黄毓茂
- 关键词：猪传染性胃肠炎常规疫苗基因工程疫苗
- 文献传递
- 蝉新型抗菌肽Cryptonin在毕赤酵母中的分泌表达及活性鉴定被引量：3
- 2010年
- 根据毕赤酵母(Pichia pastoris)密码子的偏嗜性,通过SOEing法合成改造后的Cryptonin基因片段。基因克隆到pPICZα-C质粒中,获得分泌型重组酵母表达载体pPICZα-C-Cryptonin。pPICZα-C-Cryptonin通过限制性内切酶SacⅠ酶切线性化后,经电穿孔法转入毕赤酵母细胞X-33内。PCR检测Cryptonin基因与毕赤酵母染色体稳定结合,Zeocin抗性筛选,得到高拷贝转化子。在AOX(醇氧化酶)启动子调控下,Cryptonin蛋白获得分泌表达,其相对分子质量约为2700。表达产物耐热性强,在100℃条件下10min内抗菌活性不变,煮沸30min以上仍具有活性。琼脂糖孔穴扩散法检测显示表达产物对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都具有很好的抑菌活性。
- 刘德辉焦颖徐蕙吴锋张春红黄毓茂
- 关键词：基因设计分泌表达抑菌活性
- 猪流行性腹泻病毒重组腺病毒疫苗的构建及小鼠免疫试验被引量：25
- 2012年
- 通过RT-PCR和重组PCR技术扩增出猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)疫苗株sM、M、S基因,构建重组腺病毒穿梭质粒。穿梭质粒与BJ5183细菌同源重组构建同源重组腺病毒质粒,同源重组腺病毒质粒经PacⅠ酶切后转染AD-293细胞,获得3个含有目的基因的重组腺病毒。将3个具有感染能力的复制缺陷性重组腺病毒共同感染Vero细胞,细胞上清液进行小鼠免疫特性研究。结果表明,共同感染Vero细胞所得蛋白能诱导小鼠产生特异性体液免疫应答。
- 焦茂兴吴锋刘德辉黄毓茂
- 关键词：猪流行性腹泻病毒重组腺病毒疫苗免疫
- 猪圆环病毒2型ORF2基因在巴斯德毕赤酵母中的表达
- 2015年
- 为探索猪圆环病毒2型ORF2基因(PCV2 ORF2)的高效表达,本实验将ORF2基因整合到酵母表达载体p GAPZαA中,构建重组质粒p GAPZαA-ORF2。通过AvrⅡ酶切线性化,经电穿孔法转到毕赤酵母菌X33中。经ZeocinTM抗性筛选得到转化子,在GAP强启动子调控下,通过SDS-PAGE分析和Western blotting鉴定,结果证实Cap蛋白在酵母载体p GAPZαA中得到成功分泌表达。
- 刘娜吴锋黄毓茂
- 关键词：猪圆环病毒巴斯德毕赤酵母ORF2分泌表达
- 重组猪圆环病毒2型Cap抗原的制备方法
- 本发明公开了一种重组猪圆环病毒2型Cap抗原的制备方法，是采用酵母表达系统，先扩增PCV2-ORF2基因，然后构建表达工程菌，即将扩增序列插入酵母表达载体，形成重组表达载体，线性化后转化毕赤酵母宿主细胞，构建表达工程菌，...
- 黄毓茂刘娜吴锋刘德辉
- 文献传递
- 重组猪圆环病毒2型Cap抗原的制备方法
- 本发明公开了一种重组猪圆环病毒2型Cap抗原的制备方法，是采用酵母表达系统，先扩增PCV2-ORF2基因，然后构建表达工程菌，即将扩增序列插入酵母表达载体，形成重组表达载体，线性化后转化毕赤酵母宿主细胞，构建表达工程菌，...
- 黄毓茂刘娜吴锋刘德辉
- 猪圆环病毒Ⅱ型ORF2基因在酵母中的表达被引量：3
- 2011年
- 为探索猪圆环病毒Ⅱ型(PCVⅡ)ORF2基因的高效表达,将ORF2基因整合到酵母表达载体pPICZαC中,构建重组质粒pPICZαC-ORF2,通过SacⅠ酶切线性化,经电穿孔法转到毕赤酵母菌SMD1168。经ZeocinTM抗性筛选得到转化子,通过SDS-PAGE分析和Western blotting鉴定,结果表明衣壳蛋白在酵母菌中成功分泌表达。
- 刘娜吴锋徐义兵王强郭春和黄毓茂
- 关键词：猪圆环病毒巴斯德毕赤酵母ORF2分泌表达
- 猪传染性胃肠炎疫苗的研究进展被引量：8
- 2009年
- 猪传染性胃肠炎是由猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)引起的一种以严重腹泻、呕吐和脱水为临床特征的高度接触性传染病。可侵害各年龄的猪,已成为猪的一种世界性疾病,给养猪业造成巨大经济损失,有效的疫苗接种是目前大多数国家控制本病流行的重要措施。在过去的十年中,人们重点构建基因工程疫苗,但效果不一。灭活苗或弱毒活苗虽然仍显示着良好的优势,但一种安全、有效新型疫苗的研制已成为必然趋势。
- 吴锋黄毓茂
- 关键词：猪传染性胃肠炎常用疫苗基因工程疫苗
