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孙金海: 作品数：96 被引量：134H指数：6; 供职机构：青岛农业大学动物科技学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金转基因生物新品种培育专项山东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生理学更多>>

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13/17罗伯逊易位猪NCOA1基因的多态性与产仔性状的相关分析: 2010年; 柏蒙蒙侯永刚孙泰雷吴明明孙金海; 关键词：候选基因产仔性状罗伯逊易位母猪多态性雌激素受体

ConA与PHA在猪染色体制备中的比较被引量：5: 2006年; 以13/17罗伯逊易位纯合子猪[2n=36,XY或XX,rob(13;17)]、杂合子猪[2n=37,XY或XX,rob(13;17)]、正常猪为实验材料,用刀豆素A(ConA)和植物血球凝集素(PHA)两种不同的刺激源刺激外周血淋巴细胞来制备染色体,并对两种刺激源的最佳使用浓度进行了研究:ConA的最佳浓度为:0.2 mg/ml,PHA的最佳浓度为:1 mg/ml,二者同样在最佳浓度时,ConA的制片效果显著优于PHA,t检验结果为:t0.05(18)=2.101; 耿克祥闫守庆李冰孙金海; 关键词：罗伯逊易位 CONA PHA 染色体

13/17罗伯逊易位猪POU1F1基因多态性与经济性状的相关分析被引量：2: 2008年; 利用外周血淋巴细胞培养制备染色体标本,对13/17罗伯逊易位猪的3种杂交组合的394头后代猪进行分群;应用PCR-RFLP技术在POU1 F1基因的扩增片段(1746 bp)中检测到1个RsaⅠ限制性内切酶的多态酶切位点A(3种基因型);应用PCR-SSCP技术检测1个POU1 F1基因第5内含子上的突变E(2种基因型),同时结合生长和胴体品质测定记录研究基因型对生产性状的遗传效应。结果表明,位点A的基因型对生长有显著影响(P<0.05),位点E基因型对生长和眼肌面积有显著影响(P<0.05)。研究结果初步揭示POU1 F1多态性与生长、眼肌面积等存在相关,推测POU1 F1多态性可作为罗伯逊易位杂合优势遗传机制的一种分子水平上的解释。; 姜丽花赵雯何晓波孙金海张廷荣杜方磊; 关键词：罗伯逊易位 POU1F1基因核型

转pGH基因猪阳性鉴定及外源基因在染色体上定位的研究: 为探讨睾丸注射法制备转基因猪的高效性，本试验应用PCR检测、Southern印迹杂交、荧光定量PCR分析等技术，检测通过睾丸注射法制备的第一代转pGH基因猪阳性率。利用FISH杂交技术研究外源基因在染色体上的具体整合情况...; 蒋亚军吴明明曹月胜刘剑飞孙静迟晓瑶孙金海; 关键词：转基因猪 PCR检测外源基因整合位点

红褐色乌苏里貉TYRP1基因的克隆及表达水平分析被引量：4: 2014年; 实验旨在探讨红褐色乌苏里貉和野生型乌苏里貉TYRP1基因的核酸序列以及表达水平差异。本实验克隆了红褐色和野生型乌苏里貉TYRP1基因CDS序列,并利用实时定量PCR技术对TYRP1基因在2种毛色貉中的mRNA表达水平进行了分析。结果表明:2种貉TYRP1基因CDS序列全长1 614 bp,包括完整的开放阅读框,共编码537个氨基酸;红褐色乌苏里貉TYRP1基因编码序列与狗、猪、绵羊、小鼠、人、牛、猫、马、虎鲸和黑猩猩核酸序列高度同源,同源性分别为99.07%、90.56%、89.64%、83.22%、88.90%、89.39%、90.87%、88.63%、90.25%和88.65%,与野生型乌苏里貉序列完全相同。利用SPSS软件进行独立样本t检验,结果表明TYRP1基因在2种貉皮肤组织中均可稳定表达,利用F=(1+E)-△△Ct计算可知TYRP1基因在红褐色乌苏里貉中的表达量是野生型乌苏里貉的0.93倍,但差异不显著(P>0.05)。该实验为TYRP1基因的功能分析及红褐色乌苏里貉毛色突变分子遗传机制的探讨提供了一定的理论基础。; 朱艳菲胡义洁吴明明李祯孙金海张廷荣; 关键词：克隆

睾丸注射转染外源DNA制备转基因猪的研究: 目前实验室制备转基因动物的常用方法仍然是原核显微注射法。但该方法需要使用昂贵的显微注射仪，技术要求较高，外源基因整合率低，整合有较大的随机性。为研究睾丸内注射外源DNA法生产转基因猪的可行性，以雄性动物为对象，运用雄性配...; 吴明明曹月胜蒋亚军刘剑飞孙金海; 关键词：转基因阳性率

严密型四环素调控系统转基因首建鼠的建立: 2008年; 目的制备ApoE-rtTA-tTS转基因小鼠1,为严密型四环素调控系统的体内研究提供调控部分的转基因小鼠,以便与反应部分小鼠交配得到双转基因小鼠。方法重组构建含目的基因的质粒pApoE-rtTA-tTS,应用显微注射法将其注入母鼠的受精卵,再植入代母输卵管,出生小鼠经PCR初步筛选出阳性,再经Southern杂交对阳性小鼠基因组DNA标本进一步鉴定。结果产生了2只整合ApoE-rtTA-tTS基因的首建鼠。结论成功制备了ApoE-rtTA-tTS转基因小鼠,为下一步建立严密型四环素调控系统的双转基因小鼠模型奠定了基础。; 帅丽芳张若霜邓新燕赵勇孙金海唐博恒陈系古; 关键词：显微注射

红褐色突变貉毛色基因MC1R的序列分析及其表达水平的研究: 本研究利用克隆测序技术，通过SNP检测，分析MC1R基因在不同毛色乌苏里貉以及银黑狐中的表达水平和毛色之间相关性以及与其他物种的同源性。根据Gengank已知序列设计引物获取MC1R基因，运用生物学软件进行同源性分析以及...; 孙静蒋亚军曹月胜刘剑飞迟晓瑶孙金海; 关键词：乌苏里貉黑色素 MC1R 实时荧光定量

猪NCOA1基因PCR-RFLP多态性分析(摘要)(英文): 2010年; [目的]研究猪NCOA1基因的PCR-RFLP多态性,为猪的分子育种和标记辅助选择提供理论依据。[方法]以81头山东寿光六和原种猪场的长白猪为研究对象,采取常规酚-氯仿抽提法从猪耳组织提取基因组DNA,以基因组DNA为模板进行PCR扩增获得440 bp的NCOA1基因目的片段,利用限制性内切酶RsaⅠ对PCR产物进行酶切和琼脂凝胶电泳检测,并计算各等位基因频率和基因型频率。[结果]琼脂糖电泳检测酶切产物出现3种基因型:AA型(1条带:440 bp)、AB型(3条带:440、282、158 bp)、BB型(2条带:282、158 bp);基因型频率分别为0.54、0.43和0.03;A和B 2个等位基因的基因频率分别为0.76和0.24。[结论]该研究猪群中,A为优势等位基因,AA基因型频率较高。; 侯永刚闫守庆何晓波柏蒙蒙孙泰雷吴明明孙金海; 关键词：NCOA1基因 PCR-RFLP 多态性