宋建领
- 作品数：138 被引量：404H指数：11
- 供职机构：云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室更多>>
- 发文基金：云南省科技攻关计划云南省中青年学术和技术带头人后备人才项目南省应用基础研究计划重点项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 云南边境禽流感病原监测及H5N1亚型病毒进化分析
- 1.前言禽流感是由A型流感病毒引起的一种禽类的感染和疾病综合征。高致病性禽流感是由部分禽流感H5、H7亚型病毒侵袭家禽、野禽,引起高发病率、高死亡率的烈性传染病,并可感染人、马、猪等哺乳动物。A型流感病毒为分节段的单股R...
- 张富强张文东宋建领齐绣花赵焕云吕粤岳亮张应国范泉水
- 文献传递
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒通用型实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用被引量：7
- 2012年
- 根据GenBank登录的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)北美型毒株和欧洲型毒株N蛋白基因保守序列,设计1对特异性引物和1条探针,以ABI公司PRRSV RNA为标准品,优化了PRRSV实时荧光定量RT-PCR检测方法,25μL反应体系引物prrsv-f/prrsv-r(20μmol/L)各0.5μL,探针prrsv-p(10μmol/L)0.5μL为反应最佳工作浓度,标准曲线Ct值和模板启始浓度的log值之间具有良好的线性相关性。特异性、敏感性和重复性检测结果显示,该方法能特异的检测PRRSV北美型毒株和欧洲型毒株,与其他主要猪病病原检测无交叉反应;针对PRRSV RNA标准品检测,灵敏度可以达到10拷贝;重复性检测Ct值变异系数为0.74%～1.52%。用建立的实时荧光定量RT-PCR检测方法,对40份临床样品检测,与商品化试剂盒检测结果完全一致。
- 宋建领高华峰信爱国李华春
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光定量RT-PCR
- 非洲猪瘟疫苗研制方向及进展被引量：3
- 2022年
- 非洲猪瘟(African swine fever,ASF)给全球养殖业造成了巨大的威胁和挑战。非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)具有比寻常病毒更加巨大的基因组、迅速的变异能力和更加复杂多变的免疫逃逸机制,目前市场上仍无有效预防疫苗。科研人员几十年来,从灭活疫苗、减毒活疫苗、亚单位疫苗、DNA疫苗及病毒载体疫苗等不同方向致力于ASF疫苗研发。ASFV灭活疫苗相对安全,但是提供的保护力偏低;DNA疫苗还无法解决虽能诱导产生细胞和体液免疫应答,但是对生猪不能起到免疫保护的难点;病毒载体疫苗需要精准定位ASFV的免疫原基因,只有这样才能获得理想的免疫保护效果;减毒活疫苗可以提供同源保护,是目前比较理想的ASFV疫苗研制途径,但是存在较大的生物安全隐患。本文对不同研制方向的ASF疫苗研究进展情况及难点进行综述,以期为ASFV疫苗研发提供新的认识和方向。
- 张振兴曾毅宋建领
- 关键词：非洲猪瘟疫苗研发疫苗种类
- 2013年云南省禽流感病毒H9N2亚型监测及其血凝素基因序列分析被引量：4
- 2015年
- 为了解H9N2亚型禽流感病毒（AⅣ）的变异情况,本研究对2013年云南省16个地区的3 622份家禽临床样品进行AⅣ的鸡胚分离和RT-PCR检测,其中分离鉴定到97份H9N2亚型AⅣ分离株,并选取21个分离株进行HA基因测序及系统进化分析,结果表明：21份H9N2亚型AⅣ分离株的HA基因核苷酸序列同源性为86.0 ％～99.4％,均属于欧亚分支的类A/Chicken/BeiJing/1/1994亚分支,而且又进一步划分为Ⅲ-1、Ⅲ-2两个小分支.其中Ⅲ-2分支为云南地区新出现的进化分支.氨基酸比对分析显示,测序的21个HA基因编码蛋白的裂解位点基序均具有低致病性病毒分子特征;与现用疫苗株相比,HA推导氨基酸序列中存在多个氨基酸位点差异;其中,Ⅲ-1与Ⅲ-2分支的AⅣ的HA氨基酸序列多个位点存在各自特有的点突变（氨基酸替换）,这种变异具有一定的进化（亚）分支特异性.此外,HA基因多个受体结合位点氨基酸存在变异,其中234位氨基酸全部变为L,呈现了人流感受体结合特性;部分糖基化位点、抗原表位关键性氨基酸也存在变异.
- 胡媛媛张文东宋建领刘庆亮曾伟王锐郑锦玲彭洁保志鹏张应国范泉水赵焕云张富强
- 关键词：禽流感监测H9N2亚型血凝素
- 禽I型副粘病毒f基因克隆及序列分析被引量：8
- 2003年
- 用RT-PCR一步法对云南省不同禽类(鸡、鸽子)3株禽I型副粘病毒F基因进行扩增和克隆,并对其f基因片段核苷酸序列进行分析,结果表明,云南省禽I型副粘病毒各毒株同源性为88.1%～94.9%,与疫苗株LaSota和强毒株F48E9的同源性为85.6%。所分离两株新城疫病毒在F蛋白裂解位点区(112～117aa)的氨基酸序列与强毒株在这一区域的序列完全相同,表明为强毒株。鸽I型副粘病毒F蛋白裂解位点区的氨基酸序列与PPMV ZQ98-1株在这一区域的序列完全相同,揭示为中强毒株。以1 662bp核苷酸绘制系统发育树,表明云南地方新城疫病毒属于基因Ⅶ型,鸽I型副粘病毒属于基因Ⅵ型。
- 宋建领赵文华杨斌张永仙王金萍信爱国朱建波丛佩清
- 关键词：F基因同源性系统发育
- 鸡脂肪肝出血综合症的诊治被引量：1
- 1997年
- 宋建领
- 关键词：鸡病脂肪肝
- 云南省不同宿主H9N2感染调查和NA分子进化分析被引量：4
- 2011年
- 2006年6月-2007年10月,从云南省16个地州随机采集的各种家禽、家猪的喉气管和口腔棉拭子样品7 901份,应用RT-PCR结合血凝、血凝抑制试验和抗原捕捉ELISA,检测H9N2亚型禽流感感染情况,选择具有代表性的阳性样品,克隆NA全基因并进行基因序列分和推导氨基酸的糖基化位点分析。结果表明,云南省2006-2007年H9N2亚型禽流感病毒在全省14个地州均有流行,感染宿主包括鸡、鸭、鹅和猪;分离的19个毒株中的13个鸡源和1个鹅源毒珠的NA全基因长1 407bp,编码469个氨基酸,同源性为96.1%～99.6%,是目前云南省流行的优势亚群;3个鸭源毒株、1个鹅源和1个猪源毒株NA基因长1 398bp,编码466个氨基酸,5个非鸡源毒株的NA基因的同源性为99%,构成云南目前流行的另一分支,推导氨基酸第61～63位3个氨基酸的缺失是与优势分支的特征性区别;2个分支间NA基因同源性为90%,与国内外其他毒株比较神经氨酸酶基因序列具有多态性。
- 张泉鹏李作生鲍晓伟李乙江张富强郑钧丰王意银张应国张文东宋建领邱薇李刚山张向荣范泉水
- 关键词：H9N2亚型禽流感病毒神经氨酸酶基因
- 鹅副粘病毒F基因的克隆测序及核苷酸序列分析被引量：28
- 2002年
- 以鹅副粘病毒 (GPV) SF0 2株的基因组 RNA为模板 ,通过 RT- PCR的方法扩增出 F基因片段 ,然后将其克隆至 T载体中。经 PCR鉴定后 ,对阳性克隆进行测序。测序后拼接得出 F基因的全序列。与 Gen Bank下载的 9株参考毒株比较 F基因编码区全核苷酸序列 ,发现所测 GPV- SF0 2毒株与参考毒株 L Z- NDV核苷酸序列同源性为 96 %,与F48E9同源性为 92 .5 %,与 L a Sota为 88%。
- 赵文华朱建波姚龙涛宋建领信爱国何水林张念祖
- 关键词：核苷酸序列分析鹅副粘病毒F基因基因克隆
- 2013年云南省禽流感H9N2亚型病毒神经氨酸酶基因序列分析被引量：1
- 2015年
- 目的了解2013年云南省禽流感H9N2亚型病毒NA基因变异及进化特征。方法对2013年云南省禽流感H9N2监测阳性样品进行NA基因克隆、测序及系统发育分析。结果 2013年云南省禽流感H9N2亚型病毒株NA基因核苷酸序列同源性为84.5%-99.5%,属于欧亚分支的类ADKHKY28097分支和类ACKHKG997分支。类ADKHKY28097分支为目前云南优势分支,且又进一步划分为Ⅰ-1、Ⅰ-2小分支。氨基酸比对分析表明,2013年云南毒株NA蛋白402位糖基化位点存在显著变化,161位新增了一个糖基化位点;唾液酸结合位点、抗原位点存在显著变异;酶活性位点稳定。除上述关键性氨基酸位点外,其余位点与现用疫苗株、参考毒株相比存在显著差异;且Ⅰ-1、Ⅰ-2、Ⅱ分支毒株多个位点存在各自特有的氨基酸替代,这种替代具有一定的进化（亚）分支特异性。结论 2013年云南省H9N2亚型禽流感病毒间具有遗传差异,类ADKHKY28097分支已成为当地流行的优势毒株,NA蛋白存在特异性氨基酸变异位点。
- 胡媛媛张文东宋建领张应国赵焕云张富强
- 关键词：禽流感病毒H9N2亚型神经氨酸酶
- 化脓隐秘杆菌可视化LAMP检测方法的建立
- 2023年
- 为建立化脓隐秘杆菌(A.pyogenes)可视化LAMP检测方法,本研究根据A.pyogenes 16S rRNA基因的特异性保守核苷酸序列设计两对LAMP引物,通过反应体系和反应条件的优化,结果显示,本研究建立的LAMP方法的最佳反应条件为62℃反应70 min。利用建立的LAMP方法检测金黄色葡萄球菌、伪结核棒状杆菌、A.pyogenes等山羊和绵羊常见的16种细菌的DNA样品,结果显示仅A.pyogenes DNA样品检测为阳性,其它细菌DNA样品和阴性对照检测均为阴性,表明该方法具有较强的特异性。利用建立的LAMP方法检测不同稀释度的重组质粒标准品pMD19T-Arc,结果显示检测限为8.2拷贝/μL,表明该方法具有较高的敏感性。利用建立的LAMP方法和普通PCR方法对128份山羊和绵羊皮下脓肿样品进行检测,结果显示两种方法对A.pyogenes的阳性检出率分别为18.8%(24/128)和17.2%(22/128),总符合率为98.4%(126/128)。结果表明,本研究首次建立了检测A.pyogenes的基于钙黄绿素指示剂的可视化LAMP方法,为山羊和绵羊A.pyogenes感染的检测提供了一种可视化快速的技术手段。
- 李富祥朱沛赵文华宋建领高华峰
- 关键词：化脓隐秘杆菌
