屠敏
- 作品数：18 被引量：36H指数：4
- 供职机构：解放军第307医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金军队医药卫生科研基金更多>>
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- GVHD病因学的新视野:HLA分子三维结构研究被引量：1
- 2000年
- 目的 :进一步探索GVHD的发病机理 ,提高临床移植疗效。方法 :采用国际通用的微量淋巴细胞毒试验和混合淋巴细胞培养方法 ;基因分型采用PCR SSP方法 ,对基因亚型进行DNA测序 ,再进行HLA三维结构模拟。结果 :① 4名骨髓移植患者中 ,例 1供 受体间HLA Ⅰ、Ⅱ类血清学分型相合 ,DQB1基因亚型不同 ,例 2、3、4均有 1个Ⅰ类抗原 (分别为HLA A、B和A)血清学分型不合和 1个基因亚型不同。HLA三维结构模拟例 1、3、4供 受者差别明显 ,骨髓移植后发生了Ⅲ～Ⅳ度GVHD ;例 2三维结构模拟差别不明显 ,仅发生Ⅰ度GVHD ;② 4个病例供 受体间HLA分子分别相差 14、17、2 0、12个氨基酸 ,相差数量与GVHD无相关性 ;3例重度GVHD供 受体的HLA分子三维结构均在抗原结合区的β转角处出现明显差异 ,而 1例轻度GVHD则无明显差异。 结论 :当异基因骨髓移植供 受体间HLA基因亚型不同时 ,移植后发生GVHD的程度与HLA分子三维结构差别大小有密切关系 ;三维结构的差别又与差异氨基酸所处的位置有关 ;GVHD与抗原氨基酸差别的数量多少没有直接关系。
- 孔繁华孙玉英奚永志任素萍金荔陈兴国刘楠屠敏郭斯启
- 关键词：人类白细胞抗原移植物抗宿主病骨髓移植
- 不完全相合造血干细胞移植中GVHD的预测研究:模拟HLA抗原结构的比较与应用被引量：2
- 2002年
- 采用通用的微量淋巴细胞毒实验和序列测定方法对拟进行造血干细胞移植的患者及供体进行HLA分型 ;用计算机分子模拟手段 ,从HLA分子三维结构方面探讨预测移植物抗宿主病 (GVHD)发生程度 ,以预测移植后GVHD的发生情况。结果发现 ,8例供受体中 ,3例为半匹配移植 ,其中 2例发生了Ⅳ度GVHD ,1例发生了Ⅱ度GVHD ;3例为两个抗原不相合移植 ,其中 1例发生了Ⅱ度GVHD ,2例发生了Ⅱ度GVHD ;2例患者为一个抗原不相合移植 ,分别发生了Ⅰ度、Ⅱ度GVHD ;GVHD的发生程度与HLA不相合抗原RMSD差异的大小呈正相关。提示异基因造血干细胞移植时 ,GVHD发生程度与HLA分子三维结构的差异有密切关系 。
- 韩红星孔繁华奚永志金荔刘楠屠敏孙玉英陈兴国
- 关键词：移植物抗宿主病造血干细胞移植HLA抗原
- PCR-SSP及PCR-SSCP在骨髓移植配型中的联合应用被引量：11
- 1999年
- 目的研究ＨＬＡ抗原分型的方法。方法对２０对已进行ＨＬＡ抗原血清学分型的骨髓移植供、受者采用序列特异引物聚合酶链反应（ＰＣＲＳＳＰ）及单链构象多态性聚合酶链反应（ＰＣＲＳＳＣＰ）进行ＨＬＡ抗原的基因分型。ＤＮＡ的提取采用快速盐析法。结果基因分型结果与血清学分型一致者有１８对，基因分型能明确判定而血清学分型无法判断者有２对；ＰＣＲＳＳＰ与ＰＣＲＳＳＣＰ结果完全一致者有１９对；１对ＰＣＲＳＳＰ分型为ＨＬＡＤＲＢ１相合而ＤＱＢ１不相合，ＰＣＲＳＳＣＰ分型为ＨＬＡＤＲＢ１有轻度差别，而ＤＱＢ１、ＤＰＢ１有明显差别，该例患者骨髓移植后发生了Ⅳ级移植物抗宿主病。结论ＰＣＲＳＳＰ与ＰＣＲＳＳＣＰ联合应用有利于ＨＬＡ配型的准确性。
- 孙玉英孔繁华奚永志刘广贤陈兴国金荔屠敏
- 关键词：骨髓移植PCR-SSPPCR-SSCP白细胞抗原
- IL-6受体在人白血病细胞膜上的表达及亲和力被引量：3
- 2000年
- 目的 :研究各种白血病细胞膜IL 6R的表达、密度及亲和力 ,为深入探讨对IL 6 /IL 6R系统介导IL 6 PE40外毒素融合蛋白靶向杀伤白血病细胞的敏感性提供可靠依据。方法 :采用放射性配基结合实验 (RBA)并结合Scatchard作图法 ,系统分析IL 6R在 8种极具代表性的人类白血病细胞系U937,HL 6 0 ,KG1,TF1,K5 6 2 ,CEM ,HuT2 8和Raji上的表达密度及亲和力 ,同时应用流式细胞术 (FACS)检测IL 6R的α和 β亚单位蛋白在这些白血病细胞上的表达。结果 :RBA表明 ,粒、单、红白血病细胞系HL 6 0 ,U937,KG1和TF1表面存在着高亲和力IL 6R ,平均IL 6R密度 /细胞分别为 2 5 0 2个 ,2 874个 ,2 319个及 932 9个 ,而淋系白血病细胞系CEM ,HuT2 8和Raji以及慢粒K5 6 2细胞系则未测到IL 6R。FACS显示 ,HL 6 0 ,KG1,U937和TF1均高表达IL 6R的α亚单位蛋白 ,而CEM ,HuT2 8及K5 6 2则不表达IL 6Rα亚单位蛋白 ;IL 6Rβ亚单位蛋白在U937,KG1,TF1,HuT2 8及CEM中呈阳性表达 ,而在HL 6 0 ,Raji和K5 6 2细胞中则为阴性。结论 :鉴于粒、单、红白血病细胞异常高表达IL 6R ,而淋系和慢粒白血病呈阴性表达这一事实 ,提示急非淋白血病可能更适合用重组IL 6 PE40外毒素融合蛋白进行IL 6 /IL 6R介导的靶向治疗。
- 刘爽奚永志郭斯启刘楠屠敏金荔陈兴国孔繁华
- 关键词：白血病细胞IL-6受体
- HLA分子三维结构与GVHD相关性研究
- 目的:进一步探索GVHD的发病机理,提高临床移植疗效。方法:采用国际通用的微量淋巴细胞毒试验和混合淋巴细胞培养方法;基因分型采用 PCR-SSP方法,对基因亚型进行DNA测序,再进行HLA三维结构模拟。结果:(1)4例骨...
- 孔繁华孙玉英奚永志任素萍金荔陈兴国刘楠屠敏郭斯启
- 关键词：人类白细胞抗原移植物抗宿主病骨髓移植
- 文献传递
- HL-60细胞中IL6基因的克隆及鉴定被引量：2
- 1999年
- 目的：为探索性构建重组人白细胞介素６－绿脓杆菌外毒素融合蛋白（ＩＬ６－ＰＥ４０）以选择性杀伤高表达ＩＬ６受体（ＩＬ６Ｒ）的白血病细胞，本研究试图从人急性早幼粒细胞白血病细胞株（ＨＬ－６０）中克隆Ｎ－末端缺失２４个氨基酸的人ＩＬ６基因（ＩＬ６ｃＤＮＡ）并构建含此基因的重组质粒。方法：根据ＩＬ６基因序列设计合成可扩增ＩＬ６ｃＤＮＡ的特异性引物；利用基因重组技术，构建含ＩＬ６基因的重组质粒ｐＵＣ－ＩＬ６。结果与结论：本文首次从ＨＬ－６０中扩增出预期４８０ｂｐ的ＩＬ６ｃＤＮＡ，将其克隆至ｐＵＣ１８质粒中，命名为ｐＵＣ－ＩＬ６，并经ＥｃｏＲＩ／ＢａｍＨＩ双酶切电泳及序列分析鉴定加以确证，为进一步构建重组人ＩＬ６－ＰＥ４０奠定了坚实基础。
- 郑黎燕奚永志孔繁华鱼咏涛金荔陈兴国屠敏刘楠
- 关键词：白细胞介素6白血病HL-60细胞克隆融合蛋白
- HLA-A~*02等位基因分型技术及汉族HLA-A~*02多态性研究被引量：7
- 1999年
- 建立高分辨率的套式ＰＣＲ－ＳＳＰ，对１７个ＨＬＡ－Ａ＊０２等位基因分型。利用国际标准分型细胞进行特异性鉴定，并在５４例Ａ＊０２阳性的无血缘关系汉族健康人中应用。共检测到５个Ａ＊０２亚型，显示出较高多态性：其中Ａ＊０２１１（ｎ＝２）首次在东方人群检测到；Ａ＊０２０１频率最高，占有４８．２％；其余依次为Ａ＊０２０６、Ａ＊０２０７和Ａ＊０２０３。套式ＰＣＲ－ＳＳＰ既适用于移植供体选择，又可用于人类进化研究。
- 任素萍孔繁华金荔陈兴国屠敏
- 关键词：HLA-A抗原等位基因遗传多态性
- 毒素蛋白PE40的基因克隆及序列分析被引量：5
- 1999年
- 细胞因子－受体介导的靶向杀伤作为导向治疗白血病与肿瘤的第二代新策略，是现代分子导向药物研究的最新领域之一。它是利用细胞因子与其受体的特异性结合来导向传递重组细胞因子－细菌外毒素融合蛋白以达到特异性杀伤高表达相应细胞因子受体的白血病及肿瘤细胞〔１～３〕...
- 郑黎燕奚永志孔繁华金荔陈兴国屠敏
- 关键词：白血病基因治疗基因克隆
- HLA分子三维结构模拟分析与移植物抗宿主病被引量：4
- 1999年
- 孙玉英孔繁华奚永志刘明东陈兴国金荔屠敏
- 关键词：移植物抗宿主病GVHDHLA
- CD34^+造血细胞免疫磁性高效富集仪CMSI-100的研制及应用被引量：2
- 2002年
- 根据免疫磁性分离原理 ,选用能产生高磁场强的磁性材料钕铁硼 ,其核心是将其设计成由低碳钢间隔的 4块钕铁硼 ,并且使每块钕铁硼的规格必须限制在 3.5cm× 2 .0cm× 0 .3cm ,以确保每块钕铁硼平面所具有的磁场强度平均可达 2 70 0高斯。当所切磨的钕铁硼规格达不到该标准时 ,由此产生的磁场强度 >2 70 0高斯或 <2 70 0高斯 ,对CD34+造血细胞的分离效果均不理想。经对人正常骨髓CD34+ 造血细胞的免疫磁性分离证实 ,采用CMSI 10 0富集后的CD34+ 造血细胞纯度平均 >90 % ,细胞活力 >95 % ,达到国际上最好水平 ,其性能完全可与国际通用先进的IsolexTM5
- 奚永志张双喜孙玉英郭斯启刘楠屠敏孔繁华
- 关键词：免疫磁性分离钕铁硼磁场强度CD34^+造血细胞
