徐杨
- 作品数:13 被引量:20H指数:2
- 供职机构:甘肃省医学科学研究院更多>>
- 发文基金:甘肃省科技支撑计划甘肃省卫生行业科研计划项目甘肃省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- β2微球蛋白半定量金标快速检测试剂盒
- 本实用新型公开了一种β2微球蛋白半定量金标快速检测试剂盒,属于临床医学检测领域。所述试剂盒包括卡盒、比色卡和试纸条三部分:卡盒包括盒盖(8)与盒底(14)两部分,卡盒内置比色卡(9)和试纸条。卡盒正面可见检视窗(1)、加...
- 杜惠芬李克生徐杨连晓雯柴丹丹
- 文献传递
- 胱抑素C和β2微球蛋白半定量金标联合检测试剂盒
- 本实用新型公开了一种胱抑素C和β2微球蛋白半定量金标联合检测试剂盒,属于医学诊断技术领域。所述试剂盒由卡盒、比色卡和试纸条三部分组成:卡盒包括盒盖(8)与盒底(14)两部分,卡盒内置比色卡(9)和试纸条。卡盒正面可见检视...
- 杜惠芬李克生徐杨
- 文献传递
- 抗人胱蛋白酶抑制剂C单克隆抗体的制备及鉴定被引量:1
- 2016年
- 目的制备抗人Cys-C单克隆抗体并对其生物学特性进行鉴定。方法用基因工程表达的Cys-C抗原免疫BALB/c小鼠,用杂交瘤技术制备抗人Cys-C单克隆抗体,间接ELISA法检测单克隆抗体的效价、亲和力,鉴定单克隆抗体的亚类并检测抗原位点互补关系,SDS-PAGE鉴定抗体纯度,秋水仙素阻抑法鉴定染色体数目。结果筛选出2株能稳定分泌抗人Cys-C单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为2H2、3C4,抗体Ig亚类均为IgG1,亲和常数分别为7.429×10-8、1.95×10-7,2株单克隆抗体抗原位点不重叠,染色体鉴定符合杂交瘤细胞的特性。结论成功制备了特异性的抗人Cys-C单克隆抗体,为Cys-C检测试剂盒的研究开发奠定了基础。
- 徐杨杜惠芬连晓雯张瑞君柴丹丹李克生
- 关键词:胱蛋白酶抑制剂C单克隆抗体
- 再生基因4(REG4)真核表达载体的构建及其蛋白在HEK293T细胞中的表达、纯化被引量:1
- 2023年
- 目的构建再生基因4(regenerating gene 4,REG4)的真核表达载体,转染人胚肾细胞293T(human embryonic kidney 293T cells,HEK 293T),获得重组人再生胰岛衍生蛋白IV(regenerating islet-derived protein IV,Reg IV)。方法根据NCBI数据库REG4基因序列进行基因优化、合成,将其克隆至pCDNA3.4载体并进行双酶切和测序鉴定,通过转染试剂聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)将pCDNA3.4-REG4质粒瞬时转染至HEK 293T细胞(实验组),同时以pEGFP-C1质粒作为转染对照组,未转染重组质粒的HEK 293T细胞作为空白对照组。荧光显微镜观察转染对照组转染效率,分别收集实验组及空白对照组细胞和细胞培养液上清,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)与免疫印迹试验(Western-Blot,WB)检测Reg IV蛋白表达水平。通过镍柱及丙烯葡聚糖凝胶S-400(Sephacryl S-400)柱进行蛋白纯化,SDS-PAGE及WB对纯化后重组蛋白进行鉴定。结果经测序和双酶切鉴定,重组质粒pCDNA3.4-REG4构建成功。转染对照组(pEGFP-C1质粒)荧光显微镜观察结果显示转染效率约50%,表明转染成功。WB结果显示仅在实验组(pCDNA3.4-REG4质粒)的细胞中检测到RegIV蛋白。镍柱纯化时目的蛋白无法与镍柱填料有效结合,SephacrylS-400凝胶柱层析纯化获得了此重组蛋白。结论成功构建了REG4基因真核表达载体并在HEK 293T细胞中成功表达,为深入研究Reg IV蛋白的作用机理及开发潜在的抗癌靶向药物奠定了基础。
- 徐杨杜惠芬李克生柴丹丹石晓玲连晓雯张学良
- 关键词:真核表达瞬时转染蛋白纯化
- 再生基因4(RegⅣ)的原核表达、蛋白结构复性及纯化
- 2020年
- 目的:构建再生基因4(Reg Ⅳ)的原核表达载体,获得重组人Reg Ⅳ蛋白。方法:将已构建好的pEGFP-C1-Reg Ⅳ质粒进行酶切纯化获得目的基因,并构建到pET-30a原核表达载体上,经测序鉴定后将序列正确的重组质粒转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE凝胶电泳鉴定,并用凝胶层析对表达产物进行复性纯化。结果:构建了pET-30a-Reg Ⅳ原核表达重组质粒,IPTG诱导表达出约22KD的重组蛋白,表达产物经复性纯化后获得纯度较高的目的蛋白。结论:成功构建了Reg Ⅳ原核表达载体,并成功表达了重组人Reg Ⅳ蛋白。
- 徐杨张学良杜惠芬柴丹丹连晓雯张瑞君李克生
- 关键词:原核表达纯化
- 金标法检测尿β_2-MG在肾功能损伤诊断中的临床价值被引量:12
- 2019年
- 目的评价尿液β_2-微球蛋白(β_2-MG)金标检测试剂盒在肾功能早期损伤诊断中的应用价值。方法将临床诊断为肾病综合征患者53例、慢性肾炎综合征患者40例、慢性肾衰竭患者18例、高血压肾病患者33例、糖尿病肾病患者23例作为研究组,体检健康者157例作为对照组,以β_2-MG金标检测试剂盒检测β_2-MG水平,并与胶乳增强免疫比浊法检测结果进行比较。结果金标法与胶乳增强免疫比浊法检测尿液β_2-MG阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05);金标法检测临床确诊肾病的167例患者尿β_2-MG的灵敏度为76.7%,符合度为85.2%,特异度为94.3%。结论尿液β_2-MG金标检测试剂盒对诊断肾功能早期损伤具有一定的临床应用价值。
- 徐杨杜惠芬李克生李光迪张瑞君柴丹丹连晓雯
- 关键词:Β2-微球蛋白早期肾损伤金标法
- 金银花中绿原酸提取工艺的改进被引量:5
- 2013年
- 目的:探索金银花的新型提取工艺。方法:采用紫外分光光度法测定绿原酸含量,比较水提法与液-液双相连续萃取法对绿原酸提取率的差别。结果:水提法与液-液双相连续萃取法对绿原酸提取率的差异具有显著性,液-液双相连续萃取法所得浸膏率低、绿原酸占浸膏比率高。结论:液-液双相连续萃取法所提绿原酸虽在含量上低于普通水提取,但其纯度高,杂质含量少,可作为一种有效的金银花中绿原酸的提取分离方法。
- 徐杨王兴刚贺殿贾忠马志刚李克生
- 关键词:金银花绿原酸
- REG4在炎症和肿瘤中的研究进展
- 2024年
- REG4是Reg家族的成员,它不仅介导病原体的炎症/免疫反应,还参与病原体和肿瘤的免疫逃逸,并具有与细胞间黏附和迁移有关的功能。许多研究表明,REG4在肿瘤的发生发展过程中具有重要作用,能够促进肿瘤的发生、增殖、转移、抵抗凋亡、化疗/放疗抵抗和促进肿瘤干性等。本文总结了REG4相关的最新研究进展,包括REG4的抗炎和致癌活性及REG4诱导的信号通路在炎症、肿瘤进展中的作用,以期为炎症的治疗及肿瘤的早期预防、诊断、治疗及预后评估提供依据。
- 徐杨杜惠芬李克生柴丹丹石晓玲连晓雯张学良
- 关键词:炎症肿瘤生理功能
- β_2-微球蛋白金标快速检测试剂条的研制
- 2015年
- 目的研制一种β2-微球蛋白(β2-MG)金标快速检测试剂条。方法以健康人群血清及尿液β2-MG含量均值的1.5倍作为金标检测试剂条的cut-off值。制备胶体金,标记β2-MG单抗并固化于玻璃纤维,将其与抗体包被的硝酸纤维素膜组装成β2-MG金标检测试剂条。用健康者、糖尿病患者和肾病患者的血清及尿液对试剂条的特异性、敏感性、符合性及稳定性进行测试,与全自动生化仪同步检测,进行符合性实验。结果β2-MG金标检测试剂条血清和尿液cut-off值分别为1.5 mg/L和0.27 mg/L。试剂条对血清及尿液检测特异性分别为97.50%、95.00%,检测敏感性为93.33%~96.67%,试剂条重复性好,37℃条件下12 d质量稳定,与免疫比浊试剂的符合率为88.89%~94.93%。结论β2-MG金标检测试剂条是一种特异性强、敏感性高、快速、简便,适宜普及推广的肾功能检测试剂。
- 李克生杜惠芬李光迪刘玉梅连晓雯徐杨
- 关键词:Β2-微球蛋白
- 甲状腺结节检出率及相关因素分析
- 2024年
- 目的:了解甲状腺结节检出率并分析相关影响因素。方法:选取甘肃省肿瘤医院体检中心体检的铁路和医院职工的体检资料为研究对象,依据甲状腺超声检查结果判定甲状腺结节,依据体检数据分析受检人群甲状腺结节检出率的影响因素。结果:3451名受检者甲状腺结节的总检出率为30.37%,其中2434名男性检出率为27.73%,1071名女性检出率为36.68%,女性甲状腺结节的检出率明显高于男性(P<0.01)。随年龄增长甲状腺结节检出率逐步增加,尤其女性在45岁以后,男性在60岁以后,检出率显著上升,TIRADS分级比例显著增加。单因素分析显示,总胆固醇、低密度脂蛋白和糖化血红蛋白与甲状腺结节的检出率相关(P<0.05),而甘油三酯水平仅与男性甲状腺结节的检出率相关(P<0.05),与女性无关。多因素logistic回归分析显示,糖化血红蛋白比例增高是甲状腺结节发生的独立危险因素,而总胆固醇水平升高则是男性甲状腺结节发生的另一独立危险因素。结论:体检人群甲状腺结节检出率较高,45岁以后甲状腺结节检出率逐年增高,总胆固醇水平升高和糖化血红蛋白比例增高是甲状腺结节检出率的独立危险因素,具体机制有待进一步研究。
- 古扎努尔·尼牙孜连晓雯李克生梁金磊徐杨柴丹丹
- 关键词:甲状腺结节糖化血红蛋白检出率影响因素