朱明华
- 作品数：11 被引量：54H指数：4
- 供职机构：山东农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金山东省农业重大应用技术创新课题更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 鸡奇异变形杆菌外膜蛋白的抗血清制备及其荧光标记抗体检测方法的建立
- 立鸡奇异变形杆菌(P.mirabilis)直接荧光标记抗体检测方法，本研究采用改良的方法提取了奇异变形杆菌OMP。以该OMP免疫健康新西兰家兔制备兔抗鸡奇异变形杆菌OMP高免血清，制得纯化的IgG,用FITC标记得到兔抗...
- 朱明华朱瑞良王慧孙寅剑马荣德谭燕玲魏凯王新建郭文龙
- AA肉种鸡中内源性类J亚群禽白血病病毒gp85基因的克隆与分析
- 利用ALV-J gp85基因两侧的序列片段为引物,从山东潍坊某肉中鸡场送检的7日龄肉种鸡基因组中完整地扩增了内源性类ALV-J gp85基因。利用ALV-J env基因特异性引物不能扩增出长度为2.2kbp的目的片段,在...
- 郭文龙朱瑞良闫振贵马荣德朱明华王新建谭延玲王慧魏凯
- 关键词：聚合酶链式反应
- 文献传递
- 运用23S rRNA对禽波氏杆菌分离株的进化分析
- 析波氏杆菌分离株的进化特点，本研究通过PCR反应扩增分离保存的8株禽波氏杆菌、3株兔支气管败血波氏杆菌及1株猪支气管败血波氏杆菌菌株的23S rRNA基因的片Ye受(710 bp)，分别克隆到载体pMD18-T.然后测序...
- 谭燕玲朱瑞良马荣德王慧魏凯王新建郭文龙朱明华
- 禽波氏杆菌单因子血清的制备及血清分型的探索
- 氏杆菌病主要是由禽波氏杆菌引起的一种高度接触性传染病，利用波氏杆菌的14个菌株分别制备相应的抗血清，然后对抗血清进行交叉吸收试验，得到Ⅰ型和Ⅱ型2种单因子血清，不同血清型的单因子血清不与其他血清型菌株发生凝集。利用这2种...
- 马荣德朱瑞良郭文龙朱明华孙寅剑
- 奇异变形杆菌分离株23S rRNA序列分析被引量：5
- 2011年
- 通过PCR反应扩增7株鸡奇异变形杆菌和1株兔奇异变形杆菌的23SrRNA基因片段(1045bp),经克隆测序,用DNA Star分析软件将所获得的序列与GenBank中收录的奇异变形杆菌、普通变形杆菌以及其他相近属的23S rRNA基因序列进行同源性比较,并由此构建奇异变形杆菌系统进化发生树。结果表示,本实验室保存的7株鸡奇异变形杆菌核苷酸序列与GenBank中收录的奇异变形杆菌核苷酸序列同源性为99.4%～99.8%,与兔奇异变形杆菌核苷酸序列同源性为98.8%～99.3%,与普通变形杆菌的核苷酸序列同源性为95.4%～96.2%,而与其他相近属同源性只有92.9%～93.4%。结果表明,23S rRNA基因序列分析可以作为鉴定奇异变形杆菌的一种快速、简便的方法。
- 王慧朱瑞良朱明华谭燕玲孙振红魏凯盛鹏程王新建
- 关键词：奇异变形杆菌RRNAPCR同源性进化
- 应用23S rRNA对禽波氏杆菌分离株的进化分析被引量：1
- 2011年
- 通过PCR扩增分离保存的8株禽波氏杆菌、3株兔支气管败血波氏杆菌及1株猪支气管败血波氏杆菌菌株的23S rRNA基因的片段(710bp),分别克隆到载体pMD18-T后测序。利用BLAST工具进行同源性搜索;用DNAStar分析软件进行同源核苷酸序列的多重比较分析并构建禽波氏杆菌菌株的系统生物进化树。结果显示,8株禽波氏杆菌核苷酸序列之间同源性为99.2%～99.7%,与GenBank中收录的NC_010645株禽波氏杆菌核苷酸序列同源性为92.4%～92.5%,与兔支气管败血波氏杆菌和猪支气管败血波氏杆菌的核苷酸序列同源性均为98.5%～99.2%。国内分离的禽波氏杆菌菌株和支气管败血波氏杆菌菌株均与国外分离菌株在遗传基因上有一定的差异。结果表明,23S rRNA序列分析可以作为鉴定禽波氏杆菌的一种快速简便的方法。
- 谭燕玲朱瑞良马荣德王慧魏凯王新建郭文龙朱明华
- 关键词：禽波氏杆菌RRNAPCR基因分析
- 鸡奇异变形杆菌的分离鉴定及生物学特性的研究
- 鸡奇异变形杆菌病（Proteus mirabilis disease）是近年来国内新发现的一种急性热性细菌性传染病。本病的特征是呼吸困难、咳嗽、体温升高、腹泻。病鸡主要表现为菌血症、败血症，一侧性或两侧性瘫痪或水样腹泻，...
- 朱明华
- 关键词：系统进化外膜蛋白间接免疫荧光间接ELISA
- AA肉种鸡内源性类ALV-J gp85基因及其抗原表位的分析
- 2011年
- 利用ALV-J gp85基因两侧的序列片段为引物,从山东潍坊某肉种鸡场送检的7日龄肉种鸡基因组中完整地扩增了内源性类ALV-J gp85基因。利用ALV-J env基因特异性引物不能扩增出长度为2.2kb的目的片段,用ALV-J特异性单抗JE-9做间接免疫荧光检测,也呈现阴性反应。这种内源性类ALV-J gp85基因与已报道的禽内源性反录病毒EAV-HP序列的同源性为85.6%～93.8%,其中与ADOL 0系来航鸡EAV-HP的相似性最高(93.8%)。所得到的内源性类ALV-J gp85基因与外源性ALV-J毒株HPRS-103、SD07LK1、NX0101的同源性分别为93.8%、91.8%和91.7%。并且与外源性ALV-J gp85基因具有相似的Jameson-Worlf抗原表位优势。这种内源性类gp85基因很可能与肉雏鸡早期感染ALV-J后所呈现的免疫耐受现象有关。
- 郭文龙朱瑞良崔治中闫振贵马荣德谭燕玲朱明华王新建
- 关键词：GP85基因聚合酶链式反应
- 三种常见鸡胚胎性疫病病原人工共感染的试验检测被引量：3
- 2010年
- 近几年,家禽发生多种病原共感染的现象非常普遍,多种病原共感染常常引起非典型的病变,并进而导致重大的经济损失。细菌性胚胎性疫病病原种类较多,且大多是条件性致病菌,由不同的细菌多重感染诱发的疾病越来越常见,鸡毒性支原体(Mycoplasma gallisepricum,MG)、鸡沙门氏菌(Salmonella Avium)、禽波氏杆菌(Bordetella Avium)为三种常见鸡胚胎细菌性疫病的病原。因此,本研究针对这三种常见鸡胚胎细菌性疫病的病原进行了共感染的分析与检测。目的在于研究这三种微生物的共感染的发病情况、病理变化、病原微生物的分布及其消长规律,以及与单独感染的差别。通过本研究为鸡场中此类疾病提供理论依据。方法:分别对1日龄SPF雏鸡(10只/组)和11日龄SPF鸡胚(10枚/组)进行3种病原、2种病原、1种病原的感染。随时进行生长情况的观察,对死亡雏鸡、鸡胚进行剖检。结果,无论通过肉眼观察和还是病理学观察,3种病原共感染的雏鸡和鸡胚病变最严重,出现死亡时间最早,并且死亡率最高,两种病原共感染次之,但是多种病原共感染情况都比一种病原单独感染严重。为了进一步研究发生共感染之后,病原的分布及其随时间的消长规律,分别对剖检雏鸡与鸡胚取样,进行IFA与PCR的检测,结果表明,支原体的侵袭,气囊感染最严重,肾脏次之,其后是肝脏。波氏杆菌与沙门氏菌在肝脏和法氏囊感染最严重,肾脏和肺脏次之,另外,对于波氏杆菌感染鸡,从皮下也有大量病原菌存在。雏鸡在感染24 h内各病原含量呈快速增长趋势,36 h之后达到高峰,然后下降,在三种病原共感染的雏鸡的组织中,每种病原的含量与单独感染、双重感染的含量相差不大。鸡胚在感染24 h内各病原含量呈增长趋势,24 h之后下降,多种病原共感染的鸡胚分离得到的单独一种病原的含量略低于单独感染的鸡胚。本研究通过�
- 翁立雪朱瑞良朱彩霞刘冠华曲朝杰朱明华
- 关键词：共感染禽波氏杆菌沙门氏菌鸡毒支原体
- 鸡奇异变形杆菌外膜蛋白的抗血清制备及其荧光标记抗体检测方法的建立被引量：7
- 2010年
- 为建立鸡奇异变形杆菌(P.mirabilis)直接荧光标记抗体检测方法,本研究提取P.mirabilis外膜蛋白(OMP),以OMP免疫健康新西兰家兔制备兔抗鸡P.mirabilis OMP高免血清,纯化的IgG,用FITC标记得到兔抗鸡P.mirabilis OMP-IgG的荧光标记抗体,建立直接荧光标记抗体检测方法。应用该方法检测临床样品184份,检测结果与细菌分离法和微量平板凝集比较,结果表明提取的OMP含有6种成分,分子量分别为67.0ku、63.1ku、57.5ku、53.7ku、43.0ku和31.6ku,经过优化的OMP-IgG荧光标记抗体最佳工作浓度为0.25mg/mL,最佳感作时间为30min。临床检测结果显示该方法具有简便、快速、敏感和特异性强等优点,为鸡P.mirabilis病的流行病学调查和临床快速诊断提供了技术保障。
- 朱明华朱瑞良王慧孙寅剑马荣德谭燕玲魏凯王新建郭文龙
- 关键词：奇异变形杆菌外膜蛋白荧光抗体
