朱翔
- 作品数：18 被引量：68H指数：6
- 供职机构：南京医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划江苏省重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 机会性致病原虫感染的免疫学研究进展被引量：2
- 2005年
- 朱翔张兆松
- 关键词：机会性感染原虫感染免疫学研究免疫功能受损AIDS患者蓝氏贾第鞭毛虫
- 日本血吸虫感染过程中抑制性因子的表达特征
- 2005年
- 目的立足于基因组水平考察日本血吸虫慢性感染小鼠CD_4^+ T应答中抑制性因素的参与及可能的调控作用。方法采用高密度寡核苷酸芯片(Affymetrix芯片)对日本血吸虫感染0、3、6、13周小鼠脾脏中的CD_4^+ T细胞进行全基因组分析,获得相关抑制性因子的基因表达谱。结果基因芯片结果显示日本血吸虫感染从急性期至慢性期过程中抑制性因子的表达基因表达逐步上调,呈现基本一致的变化,包括抑制性细胞因子、阻断抗体、细胞凋亡、负调控分子的高表达等。结论从胞内信号转导通路至细胞凋亡的整体水平,多层次因素参与了日本血吸虫感染宿主免疫应答的负调控机制。
- 季旻珺苏川王勇吴海玮朱翔蔡晓萍张兆松吴观陵
- 关键词：日本血吸虫CD4^+T细胞
- 日本血吸虫22.6kDa抗原T细胞表位的重组、表达及初步鉴定被引量：12
- 2003年
- 目的 鉴定日本血吸虫中国大陆株 2 2 .6kDa抗原 (Sj2 2 .6 )的T细胞表位。 方法 用计算机软件预测Sj2 2 .6分子的T细胞表位 ,设计并合成其编码核苷酸 ,定向克隆入融合表达载体pET 32c( + ) ,转化大肠杆菌BL2 1感受态细胞 ,经酶切及测序鉴定出重组克隆。阳性克隆经IPTG诱导表达 ,表达产物用NTA柱纯化。用纯化后的表位肽融合蛋白体外刺激C3H小鼠脾单个核细胞 ,3 H TdR掺入法检测其增殖。 结果 用计算机软件预测获得Sj2 2 .6抗原的 4个候选表位肽 ,并成功克隆入pET 32c( + )。其重组体均可表达分子量约 2 0kDa的融合蛋白 ,用NTA柱纯化后经 1 2 %聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)显示单一条带。其中P4、P5、P6融合蛋白能有效刺激小鼠脾单个核细胞增殖。 结论 从Sj2 2 .6抗原中初步鉴定出P4、P5、P6
- 王新军张兆松李光富王勇刘丰季旻珺朱翔蔡晓萍吴观陵
- 关键词：日本血吸虫T细胞表位血吸虫病克隆
- 干扰素-γ对感染日本血吸虫小鼠GTP酶表达的影响被引量：1
- 2004年
- 目的 探讨干扰素 γ(IFN γ)对小鼠抗日本血吸虫感染保护力的机制。 方法 采用高密度寡核苷酸芯片 (Affymetrix芯片 )结合半定量逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR )方法 ,对BALB/c小鼠感染日本血吸虫过程中脾脏CD4+ T细胞进行基因转录水平分析 ,获得IFN γ诱导鸟苷三磷酸 (GTP)酶家族成员的变化图谱 ;并对其中IFN γ诱导GTP酶 (IGTP)进行分子克隆和序列测定。 结果 小鼠自然感染日本血吸虫过程中 ,IFN γ诱导GTP酶家族成员的基因表达呈现特征性变化 ,感染后 3wk ,基因表达上调或变化不显著 ;感染后 6wk至 13wk ,基因表达持续受到抑制。这种变化特征经RT PCR方法所证实。从小鼠脾脏可扩增出IGTP全长基因 ,但退火温度降低时出现IGTP基因转录缺失。 结论 小鼠急性感染日本血吸虫后 ,体内IFN γ通路逐步受到抑制 ,针对血吸虫感染的依赖IFN
- 季旻珺蔡晓萍苏川吴海玮李光富王勇朱翔王新军张兆松吴观陵
- 关键词：干扰素-Γ日本血吸虫病小鼠GTP酶
- CpG寡核苷酸的筛选及其对rSj28GST的免疫佐剂作用被引量：6
- 2004年
- 目的 研究 Cp G寡核苷酸 (Cp G ODN)对日本血吸虫重组 2 8k Da GST(r Sj2 8GST)抗原分子的免疫佐剂作用和诱导 Th1型反应的效应。方法 用淋巴细胞增殖试验筛选对鼠有良好免疫刺激作用的 Cp G ODN;用基因工程方法生产 r Sj2 8GST抗原分子 ;EL ISA检测小鼠抗 r Sj2 8GST的同型抗体 Ig G1 、Ig G2 a水平。结果 筛选出的 Cp G ODN如 182 6、2 0 0 2、182 6 4、2 10 2等具有良好的免疫刺激活性 ,其 SI>2 ;纯化的 r Sj2 8GST抗原分子 ,呈单一电泳条带 ;以 Cp G ODN为 r Sj2 8GST免疫佐剂 ,其免疫小鼠产生的抗体滴度显著高于对照组 ,且同型抗体 Ig G2 a与 Ig G1 比值也明显升高。结论 Cp G ODN182 6 4是一种良好的免疫佐剂 ,并可显著诱导
- 李光富张兆松朱鸿飞王勇朱翔王新军季旻珺刘丰蔡晓萍吴海玮吴观陵
- 关键词：CPG寡核苷酸日本血吸虫谷胱甘肽-S-转移酶免疫佐剂
- 趋化因子在日本血吸虫感染模型中的表达特征被引量：1
- 2003年
- 目的 研究日本血吸虫感染模型中趋化因子(chemokine)在CD_4^+T细胞中的表达概貌,并探讨其与Th细胞极化和免疫病理的相关性。方法 采用高密度寡核苷酸芯片(Affymetrix芯片)技术,从基因水平获得日本血吸虫不同感染时期CD_4^+T细胞表达的趋化因子概貌,并用反转录PCR(RT-PCR)凝胶成像半定量技术验证嗜酸性粒细胞趋化因子(ECF-L)的表达水平。同时观察趋化因子表达与病理的的关联。结果 日本血吸虫虫卵沉积前,MIG、RANTES明显增强;感染6周IP-10、MIP-2、MIP-1α、MIP-1β、ECF-L升高,持续到感染13周;GRO、Lymphotactin、MCP-1、RANTES在感染13周显著增强。RT-PCR半定量验证ECF-L表达模式与基因芯片结论一致。结论 日本血吸虫人工感染小鼠的CD_4^+T细胞表达大量趋化因子,它们共同参与Th1/Th2免疫应答,影响免疫病理状态;改变趋化因子格局可能影响疾病的自然转归。
- 蔡晓萍季旻珺李光富苏川朱翔王新军张兆松吴观陵
- 关键词：日本血吸虫CD4^+T细胞趋化因子基因芯片RT-PCR
- 日本血吸虫副肌球蛋白T细胞表位的预测和鉴定被引量：8
- 2004年
- 目的鉴定日本血吸虫副肌球蛋白的T细胞表位。方法用SYFPEITHI软件预测日本血吸虫(中国大陆株)副肌球蛋白的T细胞表位,候选表位分别命名为P20、P21、P22、P23、P24。设计并合成候选表位的编码核苷酸,定向克隆入融合表达载体pET-32c(+),经酶切及测序鉴定出重组克隆。阳性克隆经IPTG诱导表达,表达产物以Ni2+-NTA柱亲和层析及透析纯化。纯化后的硫氧还蛋白(Trx)融合蛋白体外刺激C3H/HeJ及C57BL/6小鼠腹股沟淋巴结或脾脏单个核细胞,3H-TdR掺入法检测其增殖。结果候选表位中P20、P21、P22、P23能有效刺激C3H鼠致敏淋巴细胞细胞增殖,P20、P22能刺激C57鼠致敏淋巴细胞增殖。结论P20和P22可能是日本血吸虫副肌球蛋白的通用性T细胞表位。
- 王新军张兆松王勇吴海玮张蕾李光富季旻珺朱翔蔡晓萍刘丰苏川吴观陵
- 关键词：日本血吸虫副肌球蛋白表位
- Sj28GST基因克隆和高效表达产物的纯化被引量：4
- 2004年
- 目的 从日本血吸虫中国大陆株成虫cDNA文库中克隆 2 8kDa谷胱甘肽 -S -转移酶 (Sj2 8GST)基因 ,获得用于疫苗和T细胞表位研究的高纯度重组融合蛋白 2 8GST -TRX。方法 应用引物特异性PCR技术 ,从日本血吸虫中国大陆株成虫cDNA文库中扩增Sj2 8GST基因 ,经琼脂糖凝胶电泳结合碱基序列分析鉴定后 ,采用定向克隆技术构建Sj2 8GST -TRX融合蛋白重组表达载体并诱导其在大肠杆菌BL2 1(DE3)的表达 ,用Western -blotting测定以融合蛋白方式表达的Sj2 8GST的免疫原性 ,通过包涵体纯化结合Ni+柱亲和层析获得高纯度重组融合蛋白。结果 Sj2 8GSTPCR产物为约 6 4 0bp ,其碱基序列 (6 33bp)和推导的氨基酸序列 (2 11aa)与GenBank报道一致 ;获得了Sj2 8GST -TRX重组质粒 ;2 8GST -TRX融合蛋白在大肠杆菌以包涵体形式高效表达 ;在分子量为约 4 3kDa处有一能与羊抗Sj2 8GST抗体产生特异性反应的含 2 8GST融合蛋白条带 ;包涵体纯化法结合Ni+ 亲和层析可获得高纯度的重组融合蛋白。结论 获得到了日本血吸虫中国大陆株 2 8GST分子的全长基因和高纯度重组 2 8GST -TRX融合蛋白 ,该融合蛋白具有天然Sj2 8GST免疫原性。
- 李光富张兆松王新军李春玲王勇季旻刘丰蔡晓萍朱翔
- 关键词：基因克隆纯化日本血吸虫
- 日本血吸虫(中国大陆株)线粒体相关蛋白rSj338的免疫细胞化学定位被引量：3
- 2002年
- 目的 应用免疫电镜技术观察日本血吸虫线粒体相关蛋白rSj338在成虫组织细胞中的分布和定位。 方法 收集新鲜的日本血吸虫成虫 ,常规固定、包埋 ,制备日本血吸虫成虫超薄冷冻切片。用纯化的抗rSj338单特异多克隆抗体为一抗 ,同时 ,以正常兔血清作阴性对照 ;以直径为 10nm胶体金颗粒标记的蛋白A进行定位 ,进行组织化学反应 ,透射电镜观察日本血吸虫线粒体相关蛋白rSj338在成虫组织细胞中的分布和定位。 结果 高密度胶体金颗粒主要分布于日本血吸虫线粒体外膜上 ,在线粒体的嵴上也见分布。结论 rSj338蛋白确为日本血吸虫线粒体相关蛋白 。
- 胡雪梅张兆松吴海玮李春林苏川季旻王勇朱翔吴观陵
- 关键词：日本血吸虫线粒体相关蛋白免疫细胞化学免疫电镜
- 日本血吸虫慢性感染致CD_4^+ T细胞凋亡的分子基础被引量：7
- 2004年
- 目的 立足于全基因水平考察日本血吸虫慢性感染小鼠CD+4T细胞的凋亡相关基因的变化。方法 采用三色流式细胞术结合高密度寡核苷酸芯片 (Affemetrix芯片 ) ,对日本血吸虫感染 13周的小鼠脾脏中的CD+4T细胞进行凋亡观察及基因转录分析 ,获得凋亡相关基因的表达图谱。结果 日本血吸虫慢性感染小鼠CD+4T细胞的凋亡率均明显高于正常小鼠 (P <0 0 1) ;感染小鼠的CD+4T细胞中有 2 5个凋亡相关基因与正常小鼠相比有显著性差异 ,包括凋亡促进基因—生长抑制和DNA损伤 -GADD家族和肿瘤坏死因子α诱导蛋白 3,凋亡抑制基因—IAP等。结论 日本血吸虫慢性感染小鼠CD+4T细胞的凋亡可能是导致宿主免疫下调的原因之一。凋亡通路中存在复杂的凋亡促进基因和抑制基因的相互作用 ,其中肿瘤坏死因子α诱导蛋白 3可能是日本血吸虫感染诱导CD+4T细胞凋亡的特征性因子。
- 季旻珺苏川朱翔李春玲张兆松吴观陵
- 关键词：日本血吸虫流式细胞术凋亡
