朱靖
- 作品数：22 被引量：42H指数：4
- 供职机构：山东省实验动物中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金山东省医学科学院科研基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 反转录差异显示技术及其方法的改进被引量：12
- 2005年
- 运用mRNA反转录差异显示技术可以了解不同细胞或同类细胞在不同发育阶段、不同生理状态下的基因表达状况 ,为研究生命活动过程提供重要信息。文章对差异显示反转录聚合酶链式反应技术的基本原理 ,优点与缺点 ,以及近年来对该技术涉及的RT PCR方法、引物设计、PCR反应参数、电泳及差异条带的显示方法以及杂交方式进行了论述和评价 ,并对其应用前景进行了简单分析。
- 朱靖杜立新
- 关键词：银染
- 正交法整体优化差异显示反应体系被引量：9
- 2004年
- mRNA差异显示PCR(mRNAdifferentialdisplayPCR ,DDRT PCR)是分离差异表达基因的有效方法 ,但该方法的准确性极易受到外部因素和内部因素的影响。采用正交法优化DDRT PCR反应条件 ,充分考虑到模板浓度、锚定引物浓度、随机引物浓度、dNTPs浓度、镁离子浓度以及Taq酶用量等因素在差异显示反应过程中的交互作用 ,一次PCR反应即可确定最佳反应组合。将筛选出的条件用于DDRT PCR ,得到差显结果假阳性率低 ,重复性和稳定性好 ,而且简化了反应条件的优选程序 ,这表明正交法是优化差异显示反应条件的理想方法。为了进一步简化整个差异显示反应系统的操作程序 ,降低假阳性率 ,研究采用了非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 (polyacrylamidegelelectrophoresis,PAGE)和银染显示差异带的方法 ,并用反向Northern法来验证回收条带 。
- 柳淑芳杜立新朱靖王爱华李宏滨
- 关键词：DDRT-PCR银染
- 小鼠白血病抑制因子基因的克隆、表达及其对维持鸡原始生殖细胞未分化状态的影响
- 2008年
- 为了探索鸡原始生殖细胞(Primordial germ cells,PGCs)适合的培养体系,我们在已构建的分泌型真核表达载体pSecTag-mlif(sp-)的基础上,通过脂质体介导将mlif转染到鸡PGCs和鸡胚胎成纤维(Chicken embryonic fibroblast,CEF)细胞中,48h后收集细胞上清液,蛋白印迹均检测到小鼠白血病抑制因子(mLIF)的表达。以CEF细胞作饲养层,分七组来培养鸡PGCs,结果发现四组和五组培养的PGCs生长状态最好,三组传代后开始2-3天生长状况较好,3天后克隆周围有明显的分化现象。本实验将已构建了含mLIF基因的分泌型真核表达载体成功地瞬时转染到PGCs和CEF细胞中,且表达的mLIF具有维持鸡PGCs未分化状态的功能。
- 杨娜娜朱靖史卫峰孟春花杜立新
- 关键词：转染脂质体白血病抑制因子
- 小尾寒羊多胎性能候选基因的研究进展被引量：5
- 2004年
- 小尾寒羊具有常年发情、性成熟早和多胎性能的高繁殖力特性,平均每胎产羔2.6只,是我国优良的地方绵羊品种,也是我国独特的遗传资源。目前在BooroolaMerino羊、Inverdale羊和Hanna羊中已找到影响多胎性能的主基因,但国内对小尾寒羊多胎性能遗传机制的研究主要集中在常规的选育和分子标记方面,也有一些以候选基因法从分子水平上对小尾寒羊多胎机制进行研究,仍没有确立控制小尾寒羊高繁特性的主效基因,本文就其研究现状进行综述,为小尾寒羊主效基因的研究提供有益的参考。
- 朱靖杜立新
- 关键词：小尾寒羊多胎性能候选基因繁殖力
- 实验动物设施设计建造中存在的问题及对策研究
- 目的 研究实验动物设施设计和建造中的问题及解决对策。实验动物设施是开展实验动物工作的基础条件和工作的平台，是承载动物生产和实验的载体，标准的实验动物设施才能保证动物实验的准确性和可重复性。问题 目前实验动物设施设计中存在...
- 金东庆崔明勇朱靖王伟刘学玲马向东刘红云
- 关键词：实验动物
- pSecTag-EGFP真核表达载体的构建及其转染鸡胚胎成纤维细胞的研究被引量：1
- 2008年
- 目的研究pSecTag真核表达载体转染鸡胚胎成纤维细胞的转染效率,选出该质粒转染鸡胚胎成纤维细胞的最佳转染条件,从而为研究目的基因在鸡胚胎成纤维细胞中成功表达奠定基础。方法用PCR方法克隆得到EGFP基因,通过酶切、连接、转化的方法构建了pSecTag-EGFP分泌型真核表达载体,设计优化试验,通过脂质体介导的方法转染鸡胚胎成纤维细胞,用Bradford检测法检测正交优化不同组合细胞培养液中所表达分泌的增强绿色荧光蛋白的相对含量。结果成功构建pSecTag-EGFP分泌型真核表达载体,并选出该质粒转染鸡胚胎成纤维细胞的最佳转染条件,即脂质体加2μl、质粒加1.0μg。结论脂质体介导的方法能有效转染鸡胚胎成纤维细胞。
- 朱靖窦如海金东庆杨娜娜
- 关键词：EGFP基因真核表达载体
- 山东省实验动物与动物实验公共服务平台的建设与发展
- 2012年
- “山东省实验动物与动物实验公共服务平台建设”项目获山东省自主创新重大科技专项支持。山东省实验动物中心作为项目承担单位，山东省医学科学院药物研究所为参加单位，该项目历时5年，目前基本建成集实验动物生产繁育体系、动物实验规范化服务体系、实验动物科学管理体系、实验动物信息（网络）体系、实验动物监督检测服务体系于一体的平台体系。目前已经在山东省医学科学院东部新区建成一个规模较大的实验动物生产繁育基地和动物实验服务基地。
- 王可洲金东庆周东顺朱靖郑茂恩
- 关键词：实验动物动物实验公共服务平台信息网络
- 小尾寒羊多胎性状相关基因的遗传研究及生物信息学分析
- 本课题组采用SMART技术在国内外首次成功构建了高质量的小尾寒羊卵巢组织cDNA文库，该文库的原始容量为5×106，重组率达到96﹪以上，扩增后库的滴度达1×109pfu/ml，文库中插入片段大小分布在0.5～5.0kb...
- 朱靖
- 关键词：小尾寒羊卵巢同源克隆生物信息学CDNA文库
- 文献传递
- PCR快速筛选重组克隆方法的建立被引量：3
- 2005年
- 目的 :建立一种PCR技术快速筛选重组克隆的方法。方法 :用Triton裂解菌落作为模板 ,以pMD - 18T载体多克隆位点设计的引物与目的基因猪 β-INF引物设计不同组合 ,PCR扩增待检重组克隆。 结果 :PCR技术快速筛选出猪 β -INF重组克隆并鉴定了插入方向。结论
- 张传生耿立英杨娜娜孟春花朱靖杜立新
- 关键词：重组克隆PCR
- 小鼠LIF基因分泌型真核表达载体的构建及其应用研究
- 目的 构建小鼠白血病抑制因子的真核表达载体,有助于开展高其他实验动物的胚胎干细胞的定向分化研究.方法 运用RT-PCR技术,克隆含信号肽和不含信号肽的小鼠分泌型白血病抑制因子,通过pMD18-Tsimple载体和pBS-...
- 朱靖金东庆李志彦窦如海杨娜娜
- 关键词：小鼠真核表达载体
- 文献传递
